Nhi t đ phòng t = 5 phút = 517 nm 120 L m u + 180 L DPPH L c và o m t đ quang
43
2.3.10. Ph ngăphápălo iătanninăb ngăcollagen
Các tannin đ c tr ng b i kh n ng hịa tan trong các dung mơi phân c c, có th hình thƠnh liên k t ch t ch v i protein t o k t t a, đơy c ng lƠ h ng nghiên c u ph bi n nh t cho các ph ng pháp lo i b tannin kh i các chi t xu t th c v t. Tuy các nghiên c u tách lo i tannin v n còn h n ch nh ng đư có m t s ph ng pháp đ c th c hi n nh k t t a b ng gelatin, k t t a v i acid-alcohol hay alkali-alcohol, h p th b ng nh a polyamide đ c thi t l p b i Wall và c ng s (1969) hay nh a
polyvinylpyrolidone (PVP) đ c mô t b i Loomis và Battaile (1966) cho th y có th lo i ph n l n tannin kh i cao chi t [89]. Tuy nhiên các ph ng pháp trên v n còn m t s nh c đi m nh vi c k t t a v i gelatin có th lƠm gi m ch t l ng s n ph m, gi m đ n đnh trong quá trình b o qu n do gelatin hịa tan trong n c vƠ không lo i
ra đ c h t trong s n ph m cu i. Ph ng pháp k t t a v i acid-alcohol hay alkali- alcohol khơng có tính ch n l c c th đ i v i tannin và các thành ph n ho t tính b t n th t đáng k . Tannin tuy đ c báo cáo là h p ph b i nh a polyamide t t h n h t
nh ng kh n ng ch n l c h p ph v n còn nghi ng i.
Xue-Oin vƠ c ng s đư đ ra m t ph ng pháp lo i b tannin trong chi t xu t th c v t b ng cách s d ng ch t h p ph collagen, cho th y đ c kh n ng lo i b tannin b ng ph ng pháp nƠy có nhi u u đi m và kh c ph c đ c m t s các h n ch t các ph ng pháp đư đ c nêu trên [90].
Phân t collagen đ c c u t o b i ba chu i polypeptide v i trình t chính c a chúng v c b n lƠ các đo n tripeptide l p l i, (Gly – X – Y)100-400 v i X th ng là
proline vƠ Y đôi khi lƠ hydroxyproline. Các chu i polypeptide v i c u trúc xo n ba
đ c t o thành thông qua liên k t hydro đ t o thành phân t collagen khơng hịa tan
trong n c, ch a các nhóm ch c nh –COOH, -NH2, -CONH2, -CONH-, tr thành m t l i th giúp lo i b tannin t t h n các v t li u t ng h p khác [91]. c tính khơng
tan trong n c c a collagen cho th y nó có th đ c s d ng nh m t pha b t đ ng
đ h p ph tannin, đi u này có th kh c ph c đ c nh c đi m c a gelatin. M c khác, các nghiên c u ch ra r ng tannin ti p c n b m t c a collagen b ng liên k t k n c
44
liên k t n đ nh này, các phân t c n có kích th c phân t đ l n vƠ l ng nhóm phenolic hydroxyl c n thi t. H u h t các ho t ch t t chi t xu t cây thu c khơng có kh n ng t o liên k t hydro đa đi m v i collagen do chúng không có đ l ng phenolic hydroxyl ho c thi u các c u trúc phenolic hydroxyl li n k . i u này cho th y m t cách rõ ràng r ng s i collagen có th đ c s d ng đ lo i b tannin m t cách ch n l c t t h n khi dùng nh a polyamide, các tannin ng ng t g n nh đ c lo i b hoƠn toƠn, các ho t ch t khác có m c đ h p ph th p, đ ng th i các phân t cƠng l n cƠng t ng tính h p ph vƠđ c lo i b kh i cao chi t. Do đó đơy lƠ m t
ph ng pháp lo i b tannin kh i d ch chi t lá i đ c ki n ngh trong khuôn kh lu n
v n nƠy [90].