Chương 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.5. Phương pháp nghiên cứu
2.5.3. Kỹ thuật sử dụng trong nghiên cứu
2.5.4.1. Xét nghiệm nồng độ chì máu ở người lao động:
a) Xét nghiệm nồng độ chì máu
Xét nghiệm nồng độ chì máu của người lao động tại Khoa Xét nghiệm và phân tích, Viện Sức khỏe nghề nghiệp và môi trường bằng phương pháp Quang phổ hấp phụ nguyên tử lò Graphit (GFAAS) (Phụ lục số 8).
b) Chẩn đốn nhiễm độc chì
Chẩn đốn nhiễm độc chì nghề nghiệp theo hướng dẫn tại Thơng tư số 15/2016/TT-BYT ngày 15/5/2016 của Bộ trưởng Bộ Y tế [2]. Người lao động bị nhiễm độc chì nghề nghiệp khi nồng độ chì máu >40 µg/dL.
Chẩn đốn mức độ nhiễm độc chì ở người lao động theo hướng dẫn tại Quyết định 1548/QĐ –BYT ngày 10/5/2012 của Bộ trưởng Bộ Y tế [3]. Cụ thể:
- Nhiễm độc mức khơng có triệu chứng hoặc triệu chứng kín đáo khi nồng độ chì máu >10 – 40 µg/dL.
- Nhiễm độc mức nhẹ: nồng độ chì máu từ >40 - 70 µg/dL.
- Nhiễm độc mức trung bình: nồng độ chì máu từ >70 -100 µg/dL. - Nhiễm độc mức nặng: nồng độ chì máu >100 µg/dL
2.5.4.2. Xét nghiệm nồng độ chì máu trẻ em
a) Xét nghiệm nồng độ chì máu
Xét nghiệm nồng độ chì máu của trẻ em được tiến hành ngay tại hiện trường bằng thiết bị phát hiện nhanh LeadCare IITM (Phụ lục số 9).
Phạm vi hiển thị kết quả của thiết bị LeadCare IITM từ 3,3 đến 65 µg/dL.
- Khi màn hình hiển thị “Low” (thấp), tức là nồng độ chì máu dưới 3,3 µg/dL. Kết quả sẽ được ghi là <3,3 µg/dL.
- Khi màn hình hiển thị các giá trị từ 3,3 đến 65,0 µg/dL. Kết quả ghi theo đúng giá trị được hiển thị.
- Khi màn hình hiển thị “High” (cao), tức là nồng độ chì máu trên 65 µg/dL. Kết quả ghi là > 65 µg/dL.
Lấy máu
Hút máu đến vạch trên mao quản thủy tinh.
Chuẩn bị máu
Bơm máu vào ống thủy tinh và lắc đều.
Xét nghiệm
Nhỏ một giọt máu lên thanh cảm biến. Đọc kết quả sau 3 phút.
Hình 2.1. Quy trình lấy máu xét nghiệm nồng độ chì máu trên thiết bị
b) Chẩn đốn nhiễm độc chì
- Chẩn đoán nhiễm độc chì ở trẻ em theo hướng dẫn tại Quyết định 1548/QĐ –BYT ngày 10/5/2012 của Bộ trưởng Bộ Y tế [3]. Trẻ em bị nhiễm độc chì khi nồng độ chì máu >10 µg/dL.
- Chẩn đốn mức độ nhiễm độc chì của trẻ em như sau:
+ Nhiễm độc mức trung bình và mức nặng: Nồng độ chì máu ≥ 45 µg/dL.
2.5.4.3. Xét nghiệm nồng độ delta ALA niệu bằng phương pháp quang phổ hấp phụ nguyên tử
Xét nghiệm delta ALA niệu: thực hiện tại Khoa xét nghiệm và phân tích, Viện Sức khỏe nghề nghiệp và Mơi trường theo phương pháp quang phổ hấp phụ nguyên tử (Phụ lục 10).
Do điều kiện không tổ chức thu thập mẫu nước tiểu của người lao động trong 24 giờ, chúng tơi triến hành lấy mẫu nước tiểu bãi. Vì vậy, khơng chẩn đốn nhiễm độc chì dựa vào nồng độ delta ALA niệu, mà tính theo đơn vị nồng độ delta ALA niệu trên nồng độ creatinine niệu (mg/g creatinine) để so sánh giữa các nhóm người lao động có mức chì máu khác nhau.
2.5.4.4. Xét nghiệm nồng độ creatinine niệu
Xét nghiệm nồng độ creatinine bằng thiết bị sinh hóa tự động HITACHI - Nhật Bản.
2.5.4.5. Phân tích đa hình gene ALAD
Phân tích đa hình gene thực hiện tại Khoa xét nghiệm và phân tích, Viện Sức khỏe nghề nghiệp và môi trường bằng phương pháp PCR-RFLP (Phụ lục số 10) nhằm xác định tần suất xuất hiện các kiểu gene GG, GC, CC tại điểm đa hình rs1800435 trên gene ALAD.
2.5.4.6. Điều tra bằng bộ câu hỏi
a) Đối với người lao động (Phụ lục số 3)
- Tình trạng sức khỏe, tình hình bệnh tật liên quan đến nhiễm độc chì.
- Yếu tố nghề nghiệp: tuổi nghề, cơng việc, sử dụng phương tiện bảo
vệ cá nhân.
- Yếu tố hành vi: hút thốc lá, uống rượu, rửa tay. b) Đối với trẻ em (Phụ lục số 4)
- Yếu tối liên quan đến nhiễm độc chì (hành vi của trẻ, nguy cơ nhiễm độc chì do người thân tham gia tái chế chì).
- Kiến thức, thái độ và hành vi của người chăm sóc trẻ em về phịng chống nhiễm độc chì cho trẻ em.
Hình 2.3. Thiết kế nghiên cứu