CHƯƠNG III : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.2.1Xác định cơng thức hóa học của hợp chất WA2: 4-(3ʹ-O-sulfate-4ʹ-
3.2 Phân lập chất
3.2.1Xác định cơng thức hóa học của hợp chất WA2: 4-(3ʹ-O-sulfate-4ʹ-
hydroxyphenyl)-2-butanone (chất mới)
Hợp chất WA2 thu được từ phân đoạn chiết nước của loài A. aureum ở dạng bột, màu trắng.
Phổ khối phân giải cao HR-ESI-MS ion âm cho peak ion giả phân tử tại m/z = 259.0291 [M-H]- (khối lượng tính toán 259.0282, C10H11O6S). Kết hợp dữ liệu phổ NMR cho phép xác định công thức phân tử của hợp chất WA2 là C10H12O6S.
Hình 4. Phổ HR-ESI-MS (negative) của hợp chất WA2
Phổ hồng ngoại FT-IR của hợp chất WA2 cho các vân hấp thụ của nhóm hydroxyl (3388cm-1), carbonyl (1728 cm-1), tín hiệu của vòng thơm (1658 và 1467 cm-1) và nhóm sulfate (1178, 1024 và 993 cm-1)
Trang 28
Hình 5. Phổ IR của hợp chất WA2
Phổ 13C-NMR và DEPT của WA2 cho tín hiệu của 10 nguyên tử carbon bao gồm
một nhóm methyl tại δC 29.1 (C-1); hai nhóm methylene tại δC 44.3 (C-3) và 28.1 (C- 4), một nhóm carbonyl ketone tại δC 207.7 (C-2); các tín hiệu carbon thơm bao gồm ba tín hiệu của nhóm methine tại δC 124.5 (C-6’), 122.8 (C-2’) 117.0 (C-5’) và ba tín hiệu carbon bậc bốn tại δC 147.2 (C-4’), 140.5 (C-3’), 132.1 (C-1’), tương ứng với một vòng thơm 3 lần thế.
Trang 29
Phổ 1H-NMR của hợp chất WA2 chỉ ra sự có mặt của 3 proton thơm đặc trưng cho hệ spin ABX tại δH 6.92 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-2’), 6.77 (1H, dd, J = 2.0; 8.5 Hz, H-
6’) và 6.70 (1H, d, J = 8.5 Hz, H-5’); các tín hiệu proton của hai nhóm methylene tại δH 2.70 (2H, m, H2-3) và 2.64 (2H, m, H2-4); tín hiệu proton của nhóm methyl tại δH 2.07 (3H, s, H3-1) và một tín hiệu proton của nhóm hydroxyl gắn vào vòng thơm tại δH 8.67 (1H, s, 4’-OH). Dữ liệu phổ 1
H và 13C NMR của WA2 gợi ý hợp chất WA2 là một dẫn xuất arylbutanone, các tín hiệu carbon và proton được gán chính xác thơng qua các tương quan trên phổ HSQC, 1H-1H COSY và HMBC của hợp chất này.
Hình 7. Phổ 1H-NMR (500 MHz, DMSO- d6) của hợp chất WA2
Phổ 1H-1H COSY của WA2 chỉ ra sự tương quan giữa các proton H2-3/H2-4, bên cạnh đó tương tác giữa proton H3-1 (δH 2.07) với C-2 (δC 207.7) và C-3 (δC 44.3) trên phổ HMBC cho phép xác định hợp chất WA2 có một nhóm thế là –CH2CH2COCH3. Vị trí của nhóm thế này được xác định là gắn vào vịng thơm tại vị trí C-1’ (δC 132.1)
Trang 30
(δC 122.8) và C-1’ (δC 132.1). Ngoài ra, trên phổ HMBC của hợp chất WA2 còn cho thấy tương tác giữa proton của nhóm hydroxyl 4’-OH (δH 8.67) với C-4’ (δC 147.2), C-3’ (δC 140.5) và C-5’ (δC 117.0) gợi ý rằng nhóm hydroxyl được gắn vào vị trí C-4’ của vòng thơm. Các dữ liệu phổ của hợp chất WA2 đã chỉ ra phân tử của hợp chất WA2 có chứa một vịng benzene 3 lần thế với nhóm thế thứ nhất được xác định là nhóm –CH2CH2COCH3 tại vị trí C-1’ và nhóm thế thứ 2 được xác định là nhóm hydroxyl tại vị trí C-4’ trên vịng thơm.
Hình 8. Tương quan (H C) HMBC của hợp chất WA2
H4/C2’ H4/C1’ H3/C1’
H4/C2
Trang 31
Hình 9. Tương quan (H C) HMBC của hợp chất WA2
4’-OH/C5
4’-OH/C3’
4’-OH/C4’
Trang 32
Hình 10. Tương quan (H C) HMBC của hợp chất WA2
Các dữ liệu phổ NMR của WA2 tương tự như với hợp chất 4-(3ʹ,4ʹ -
dihydroxyphenyl)-2-butanone (8), là một arylbutanone đã được phân lập trước đó từ
lồi A. aureum [19]. Tuy nhiên, khi so sánh số liệu phổ của hợp chất WA2 với hợp chất này trong tài liệu tham khảo [38] với cùng dung môi đo phổ là DMSO-d6 cho thấy tại các vị trí C-2’ và C-3’ có sự khác biệt đáng kể, đặc biệt tại vị trí C-3’ của
WA2 có độ chuyển dịch giảm ( - 4.7 ppm) trong khi đó, độ chuyển dịch của các
carbon ở vị trí ortho và para đối với C-3’ lại tăng ( + 3.6 - 6.9 ppm). Bên cạnh đó,
H4/C3 H3/C4
Trang 33
dữ liệu phổ HR-ESI-MS chỉ ra khối lượng phân tử của hợp chất WA2 được xác định là 260 amu, so với hợp chất 4-(3ʹ,4ʹ -dihydroxyphenyl)-2-butanone thì WA2 hơn hợp chất này 80 amu. Sự khác biệt về dữ liệu phổ giữa hai hợp chất này cho phép xác định nhóm thế tại vị trí C-3’ của vịng thơm là một nhóm O-sulfate, là nhóm thế thường
gặp trong các hợp chất phân lập từ một số loài thực vật ngập mặn [39].
Bảng 2. Dữ liệu phổ 1H-NMR (500 MHz), 13C-NMR (125 MHz) của hợp chất
WA2 và 4-(3ʹ,4ʹ -dihydroxyphenyl)-2-butanone [38], dung môi đo DMSO- d6
Vị trí C WA2 4-(3ʹ,4ʹ -dihydroxyphenyl)-2-butanone [38] δC (ppm) δH (ppm) (J in Hz) δC (ppm) δH (ppm) (J in Hz) 1 29.7 2.07 (3H, s) 30.3 2.05 (3H, s) 2 207.7 - 208.4 - 3 44.3 2.70 (2H, m) 45.1 2.60 (2H, m) 4 28.2 2.64 (2H, m) 28.9 2.60 (2H, m) 1’ 132.1 - 132.6 - 2’ 122.8 6.92 (1H, d, J = 2.0) 115.9 6.54 (1H, d, J = 1.9) 3’ 140.5 - 145.2 - 4’ 147.2 - 143.6 - 5’ 117.0 6.70 (1H, d, J = 8.5) 116.0 6.60 (1H, d, J = 8.1) 6’ 124.5 6.77 (1H, dd, J = 2.0; 8.5) 119.1 6.40 (1H, dd, J = 1.9; 8.1) 4’-OH 8.67 (1H, s, OH) -
Tóm lại, với việc phân tích chi tiết các dữ liệu phổ, hợp chất WA2 được xác định là 4-(3ʹ -O-sulfate-4ʹ -hydroxyphenyl)-2-butanone, cấu trúc hóa học này được kiểm tra trên SciFinder cho biết đây là một hợp chất mới.
C10H12O6S
a
b
Hình 11. Cấu trúc (a) và một số tương quan 1H-1H COSY và HMBC (b) của WA2 Tương tác 1H-1H COSY
Trang 34