CHƯƠNG III : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.2.2Xác định cơng thức hóa học của hợp chất WA3: 4-(3’-O-sulfate 4ʹ-
3.2 Phân lập chất
3.2.2Xác định cơng thức hóa học của hợp chất WA3: 4-(3’-O-sulfate 4ʹ-
hydroxyphenyl)- 2(R)-butanol (chất mới)
Hợp chất WA3 thu được khi tinh chế phân đoạn F2.3, là chất bột màu trắng. Phổ khối phân giải cao HR-ESI-MS ion âm cho peak ion giả phân tử tại m/z
=261.0446 [M-H]- (khối lượng tính tốn 261.0438, C10H13O6S). Kết hợp dữ liệu phổ NMR cho phép xác định công thức phân tử của hợp chất WA3 là C10H14O6S.
Hình 12. Phổ HR-ESI-MS (negative) của hợp chất WA3
Hình 13. Phổ IR của hợp chất WA3 [M-H]- C10H13O6S
Trang 35
Phổ hồng ngoại IR của hợp chất WA3 cho các vân hấp thụ của nhóm hydroxyl tại 3383 cm-1, tín hiệu vịng thơm tại 1643 và 1512 cm-1 và của nhóm sulfate tại 1269, 1024 và 993 cm-1.
Hình 14. Phổ DEPT (125MHz, DMSO- d6) của hợp chất WA3
Phổ NMR của hợp chất WA3 cho các tín hiệu tương tự như phổ của WA2, với duy
nhất một điểm khác biệt đó là sự xuất hiện các tín hiệu của nhóm hydroxyl (OH) tại vị trí C-2 thay vì nhóm carbonyl (C=O) như ở hợp chất WA2. Phổ 13C-NMR và DEPT của hợp chất WA3 cho thấy 10 tín hiệu carbon trong đó bao gồm: 1 nhóm methyl (CH3) tại δC 23.5 ppm (C-1), hai nhóm methylene (CH2) tại δC 41.0 (C-3) ppm và 30.6 ppm (C-4); một nhóm oxymethine (CH-OH) tại δC 65.2 ppm (C-2); các tín hiệu carbon thơm trong đó ba tín hiệu của nhóm methine tại δC 124.5 (C-6’), 122.8 (C-2’) 116.9 (C-5’) và ba tín hiệu carbon bậc bốn tại δC 146.9 (C-4’), 140.5 (C-3’), 133.4 (C-1’), đặc trưng cho một vịng thơm 3 lần thế.
Trang 36
Hình 15. Phổ 1H-NMR (500MHz, DMSO- d6) của hợp chất WA3
Phổ 1H-NMR của hợp chất WA3 chỉ ra sự có mặt của 3 proton thơm đặc trưng cho hệ spin ABX tại δH 6.91 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-2’), 6.76 (1H, dd, J = 2.0; 8.5 Hz, H- 6’) và 6.70 (1H, d, J = 8.5 Hz, H-5’); các proton của hai nhóm methylene tại δH 2.50 (1H, m, H-4a), 2.43 (1H, m, H-4b) và 1.54 (2H, m, H2-3); 3 proton của nhóm methyl
tại δH 1.06 (3H, d, J = 6.5 Hz, H3-1); 1 proton của nhóm oxymethine tại δH 3.57 (1H,
m, H-2); tín hiệu proton của hai nhóm hydroxyl tại δH 8.61 (1H, s, 4’-OH) và 4.42
Trang 37
Hình 16. Phổ 1H-1H COSY của hợp chất WA3
Phổ 1H-1H COSY của WA3 chỉ ra sự tương quan giữa các proton H2-3/H-4a, H-4b, H-2; giữa H-2/H3-1, 2-OH. Bên cạnh đó, phổ HMBC của hợp chất này cho
thấy tương tác giữa proton của nhóm 2-OH (δH 4.42) với C-1 (δC 23.5), C-2 (δC 65.2) và C-3 (δC 41.0), giữa 3 proton của nhóm methyl H3-1 (δH 1.06) với C-2 (δC 65.2) và C-3 (δC 41.0) chứng tỏ trong phân tử hợp chất WA3 có chứa một nhóm thế
CH3-CHOH-CH2-CH2-. Vị trí của nhóm thế này được xác định là gắn vào vịng thơm tại vị trí C-1’ (δC 133.4) thơng qua tương quan giữa H-4a (δH 2.50) và H-4b (δH 2.43) với C-1’ (δC 133.4) và C-2’ (δC 122.8). Ngồi ra, trên phổ HMBC của hợp chất WA3 cịn cho thấy tương tác giữa proton của nhóm hydroxyl 4’-OH (δH 8.61) với C-4’(δC 146.9), C-3’(δC 140.5), C-5’ (δC 116.9) gợi ý rằng nhóm hydroxyl được gắn vào vị trí C-4’ trên vịng thơm. H-3/H-4b H-3/H-4a H-1/H-2 H-3/H-2 H-2/2-OH
Trang 38
Hình 17. Tương quan (H C) HMBC của hợp chất WA3
H4b/C1’ H4a/C1’ H4b/C2’ H4a/C2’ H1/C2 H1/C3 2-OH/C1 2-OH/C3 2-OH/C2 H4a/C3 H4b/C3
Trang 39
Hình 18. Tương quan (H C) HMBC của hợp chất WA3
Từ các dữ liệu trên, WA3 được xác định là 4-(3ʹ-O-sulfate-4ʹ-hydroxyphenyl)-2- butanol. Hợp chất này có một tâm bất đối tại vị trí C-2 trong phân tử, cấu hình tuyệt đối tại C-2 được xác định bằng việc so sánh góc quay cực riêng của chất này với các dẫn xuất 4-aryl-2(R)-butanol với góc quay cực riêng có giá trị âm và 4-aryl-2(S)- butanol với góc quay cực riêng có giá trị dương [40]. Giá trị góc quay cực riêng của WA3 là [𝛼]𝐷25 = - 28.6 (c, 0.1, MeOH), như vậy cấu hình tại vị trí C-2 được xác định là 2R. Như vậy, hợp chất WA3 được xác định là 4-(3ʹ-O-sulfate-4ʹ-
4-OH/C5’
4-OH/C4’ 4-OH/C3’
Trang 40
hydroxyphenyl)- 2(R)-butanol, cấu trúc hóa học này được kiểm tra trên SciFinder cho biết đây là một hợp chất mới.
C10H14O6S a b
Hình 19. Cấu trúc (a) và một số tương quan 1H-1H COSY và HMBC (b) của WA3 Bảng 3. Dữ liệu phổ 1H-NMR (500 MHz), 13C-NMR (125 MHz) của hợp chất
WA3 và WA2 trong dung mơi đo DMSO-d6
Vị trí C WA3 WA2 δC (ppm) δH (ppm) (J in Hz) δC (ppm) δH (ppm) (J in Hz) 1 23.5 1.06 (3H, d, J = 6.5) 29.7 2.07 (3H, s) 2 65.2 3.57 (1H, m) 207.7 - 3 41.0 1.54 (2H, m) 44.3 2.70 (2H, m) 4 30.6 2.50 (1H, m) 2.43 (1H, m) 28.2 2.64 (2H, m) 1’ 133.4 - 132.1 - 2’ 122.8 6.91 (1H, d, J = 2.0) 122.8 6.92 (1H, d, J = 2.0) 3’ 140.5 - 140.5 - 4’ 146.9 - 147.2 - 5’ 116.9 6.70 (1H, d, J = 8.5) 117.0 6.70 (1H, d, J = 8.5) 6’ 124.5 6.76 (1H, dd, J = 2.0; 8.5) 124.5 6.77 (1H, dd, J = 2.0; 8.5) 4’-OH 8.61 (1H, s) 8.67 (1H, s, OH) 2-OH 4.42 (1H, d, J = 4.5) -