2.2.3.1 Vật liệu nghiên cứu
- 2ml máu tĩnh mạch chống đông EDTA/lần làm xét nghiệm TPTTBM hàng ngày trong thời gian huy động của BN/NH, và xét nghiệm đếm tế bào CD34+ ngày thứ 4 của quá trình huy động.
- 1 ml mẫu đơn vị khối TBG thu nhận làm xét nghiệm TPTTBM, xét nghiệm đếm tế bào CD34+ .
- 1ml mẫu đơn vị khối TBG đông lạnh sau phá đông làm xét nghiệm TPTTBM, xét nghiệm xác định tỷ lệ tế bào TBCN sống bằng phương pháp nhuộm XanhTrypan.
- 2 ml mẫu đơn vị khối TBG đông lạnh sau phá đông làm xét nghiệm cấy vi khuẩn và nấm.
2.2.3.2 Trang thiết bị kỹ thuật và sinh phẩm:
Cho quá trình thu nhận TBG:
- G-CSF (Filgrastim: biệt dược là Neupogen 300µg).
- Máy gạn tách tế bào tự động: Cobe- Spectra version 7.0 của Nhật, máy Optia version 7 của Mỹ, máy COMTEC Fresinius của Đức và bộ kit tách tế bào tương ứng.
Cho quá trình giảm thể tích và bảo quản đông lạnh: - Phòng sạch.
- Bàn ép huyết tương (Terumo, Nhật Bản), kẹp túi máu. - Tủ sinh học vô trùng cấp II .
- DMSO 100% của Đức; Dextran T40 của Đức.
- Túi bảo quản chuyên dụng 50- 100ml (Gambro, Mỹ).
- Máy hạ lạnh tự động CryoMed Controlled Rate Freez của Thermoscientific của Mỹ.
- Hệ thống bình bảo quản và cấp Nito lỏng (MVE, Mỹ). - Bể ấm 37oC (Bain marie).
Để đánh giá các chỉ số nghiên cứu:
- Máy đếm tế bào tự động Beckman Coulter của Mỹ. - Kính hiển vi quang học Nikon của Nhật .
- Máy Flowcytometry FC500 của Mỹ, bộ panel kháng thể đơn dòng gắn huỳnh quang: CD34/CD45, 7 ADD, CD45/ Control.
- Dung dịch Xanh Trypan 0.4%.