- Xỏc định hàm lượng đường khử trong mẫu
3.1.1. Chọn nồng độ dịch thớch hợp cho quỏ trỡnh đồng hoỏ
Dịch CD trước khi đem đồng hoỏ, bao gồm phần lớn cyclodextrin, glucoza và một ớt maltoza nờn dễ dàng cho nấm men chuyển hoỏ.
Do hàm lượng đường là yếu tốảnh hưởng trực tiếp đến hoạt động của nấm men nờn ta tiến hành thớ nghiệm với cỏc mẫu cú nồng độ dịch khỏc nhau,
trong điều kiện nhiệt độ là 35°C; tốc độ lắc là 125 vũng/phỳt; lượng nấm men
bổ sung vào là 3,0%; thời gian nuụi cấy là 24 h.
Sử dụng dịch CD sau khi thuỷ phõn bằng Sumizyme L, AMG và tiến hành
pha loóng để đạt được cỏc nồng độ thớch hợp từ 5°Bx đến 30°Bx.
Cỏc điều kiện được đặt ra ở trờn là nhằm tối ưu hoỏ nồng độ dịch, và từng
điều kiện một sẽ được tối ưu trong cỏc thớ nghiệm tiếp theo.
Và sau 24h nuụi cấy, ta tiến hành xỏc định cỏc chỉ tiờu OD, °Bx, hàm
lượng đường sút và DE. Kết quảthu được ở bảng 3.1.
Bảng 3.1. Xỏc định nồng độ dịch thớch hợp cho quỏ trỡnh đồng hoỏ
Nồng độ dịch (°Bx) Cỏc thụng số OD °Bx Đường sút (g/l) DE 5 3,311 3 8 25,3 10 3,311 5 13 25,8 15 3,436 8 18 26,0 20 3,436 12 32 26,6 25 3,436 13 35 27,0 30 3,434 14 37 28,4
Trong mụi trường cú nồng độ đường thấp là 5 và 10°Bx thỡ nấm men
sinh trưởng dễ dàng hơn nờn khả năng đồng hoỏ đường khỏ nhanh và hàm
lượng đường sút đạt thấp nhất là 8 g/l và 13; tương ứng với DE là 25,3 và
25,8.
Tuy nhiờn, ở nồng độ dịch thấp thỡ lượng sinh khối nấm men đạt được khụng cao; OD chỉ đạt 3,311. Ngoài ra, nồng độ dịch thấp, khi ỏp dụng vào sản xuất sẽ gặp nhiều khú khăn do tiờu tốn nhiệt và thiết bị.
Nhưng, nếu nồng độ dịch cao quỏ (25 và 30°Bx), gõy ức chế sự hoạt
động của nấm men nờn sinh khối nấm men hầu như khụng cũn tăng so với
nồng độ 15°Bx; OD vẫn là 3,436. Vỡ thế, hàm lượng đường sút cú trong dịch cũn khỏ cao là 32 và 35 g/l; tương ứng với DE là 26,6 và 27,0.
Tại nồng độ 15°Bx, nấm men sinh trưởng và phỏt triển tốt nhất, lượng sinh khối tế bào nấm men cao; OD đạt 3,436 và lượng đường sút trong dịch chỉ cũn là 18.
Do vậy, nồng độ dịch thớch hợp cho quỏ trỡnh đồng hoỏ là 15°Bx và nồng độ này sẽ được sử dụng cho cỏc thớ nghiệm sau.