- Xỏc định hàm lượng đường khử trong mẫu
B ảng 3.4 Xỏc định thời gian nuụi cấy thớch hợp cho quỏ trỡnh đồng hoỏ
3.4.1. Chọn nồng độ dịch thớch hợp cho quỏ trỡnh kết tinh α-CD
Một trong những phương phỏp thu hồi α- CD tinh khiết là phương phỏp
kết tinh. Sự kết tinh α- CD được xỏc định dựa trờn độ hồ tan khi dịch đó đạt trạng thỏi quỏ bóo hồ. Theo lý thuyết, độ hồ tan của α- CD là 14,2g/ 100 ml ở 250C. Nếu nồng độ α- CD thấp, chưa đến điểm bóo hồ thỡ khụng thể kết tinh. Nếu nồng độ α- CD cao, dịch đặc, cũng khụng cú khả năng kết tinh. Vỡ vậy, chỳng tụi đó tiến hành nghiờn cứu nồng độ dịch α- CD thớch hợp cho quỏ trỡnh kết tinh.
Thớ nghiệm được tiến hành như sau:
Cỏc mẫu là dịch α- CD đó qua tẩy màu và làm sạch, được cụ đặc theo cỏc
nồng độ khỏc nhau từ 20°Bx đến 70°Bx với cựng một thể tớch là 200 ml. Sau
đú, tiến hành kết tinh cỏc mẫu ở điều kiện lạnh (5°C) trong thời gian 3 ngày.
Cuối cựng, tiến hành lọc dịch sau kết tinh để thu tinh thể α- CD, rồi đem sấy khụ tới độ ẩm cốđịnh là 10% và định lượng tinh thể α- CD thu được.
Bảng 3.9. Xỏc định nồng độ dịch thớch hợp cho quỏ trỡnh kết tinh
Nồng độ dịch (°Bx) Lượng α- CD (g/ 200ml) Hiệu suất (%) Nhận xột 30 0,00 0 Khụng kết tinh 35 0,00 0 Khụng kết tinh 40 1,14 20,52 Cú ớt tinh thể 45 1,87 33,66 Cú khỏ nhiều tinh thể 50 3,71 66,78 Cú nhiều tinh thể 55 3,76 67,68 Cú nhiều tinh thể 60 3,80 68,40 Cú nhiều tinh thể 65 0,00 0 Dịch đặc, tạo gel
Kết quả bảng trờn cho thấy:
- Với dịch cú nồng độ chất khụ thấp 30°Bx thỡ khụng thể kết tinh tạo tinh thể.
- Cũn với nồng độ cao 65°Bx thỡ dịch quỏ đặc, ở trạng thỏi gel nờn khú kết tinh.
Như vậy, với nồng độ 40ữ60°Bx là thớch hợp nhất cho quỏ trỡnh kết tinh
α- CD.
Trong khoảng nồng độ từ 40ữ60°Bx thỡ nồng độ dịch càng tăng thỡ lượng tinh thể thu được càng nhiều; hiệu suất kết tinh tăng từ 20,52% đến 68,4%.
Nhưng, từ 50°Bx đến 60°Bx lượng tinh thể và hiệu suất tăng lờn là khụng
đỏng kể.
Vỡ vậy, nồng độ dịch thớch hợp nhất cho quỏ trỡnh kết tinh là 50°Bx.