S.carlsbergensis bằng môi trường Hansen
Môi trường Hansen được pha như mục 2.3.2.1 rồi tiến hành các thí nghiệm 1, 2, 3 để xác định các điều kiện thích hợp cho hoạt hóa S.carlsbergensis bằng môi trường Hansen.
• Thí nghiệm 1: xác định thời gian nuôi cấy thích hợp
Có thể nói thời gian là một trong những yếu tố môi trường có ảnh hưởng lớn đến quá trình sinh trưởng và phát triển của vi sinh vật. Xác định được ở thời gian nào mà phát triển tốt nhất là vấn đề mà tôi quan tâm nghiên cứu, từđó thu hồi lượng sinh khối nhiều nhất.
S.carlsbergensis được nuôi cấy lắc 220 vòng/phút, tại nhiệt độ phòng, pH của môi trường nuôi là 6. Để xác định thời gian thích hợp cho sinh trưởng bằng cách đo giá trị mật độ quang OD620nmở các thời điểm sau: 24h, 28h, 32h, 36h, 40h.
• Thí nghiệm 2: xác định pH môi trường nuôi cấy thích hợp
pH môi trường có ý nghĩa quyết định đến tốc độ sinh trưởng, phát triển của hầu hết các vi sinh vật nói chung và S.carlsbergensis đang nuôi cấy nói riêng. Sự ảnh hưởng đó trực tiếp tác động tới khả năng sinh trưởng của chủng. Chính vì vậy việc tiến hành thí nghiệm tìm ra một pH môi trường nuôi thích hợp cho sự sinh trưởng là cần thiết, đồng thời duy trì giá trị pH đó trong suốt thời gian sinh trưởng của tế bào là rất quan trọng.
Ở nhóm nấm men, với các giống men rượu và men bia Saccharomyces pH ban đầu thích hợp cho tăng sinh là khoảng 4.2 ÷ 6.2. Nấm men S.carlsbergensis được nuôi cấy lắc 220 vòng/phút, tại nhiệt độ phòng trong thời gian nuôi cấy nghiên cứu ở thí nghiệm 1, môi trường nuôi cấy được điều chỉnh pH là: 4 – 4.5 – 5 – 5.5 – 6 – 6.5. Xác định pH môi trường nuôi thích hợp cho sinh trưởng bằng cách xác định giá trị mật độ quang.
• Thí nghiệm 3: xác định nhiệt độ nuôi cấy thích hợp
S.carlsbergensis được nuôi cấy lắc 220 vòng/phút, ở các nhiệt độ 200C, 240C, 280C, 320C, 360C với thời gian và pH môi trường nuôi xác định ở các thí nghiệm 1,
2. Xác định nhiệt độ thích hợp cho sinh trưởng bằng cách xác định giá trị mật độ quang.