Theo kết quả nghiên cứu của các tác giả Indra D.Bhatt và Uppenandra Dhar [32]; Phạm Xuân Tùng và Phạm Thị Lan [25] ; Văn Thị Như Ngọc [18] cho thấy cây
dâu tây Mỹ Đá phát triển thích hợp trên mơi trường MS.
Do vậy tơi chọn mơi trường MS là mơi trường cơ bản cho nghiên cứu trong
luận văn.
Thành phần cơ bản của mơi trường MS (Murashige-Skoog, 1962) như sau:[15]
a. Khống đa lượng (g/l)
- Kali nitrat (KNO3) 19,0 - Amon nitrat (NH4NO3) 16,5 - Canxi clorua (CaCl2. 2H2O) 4,4 - Magiê sulfat (MgSO4. 7H2O 3,7 - Kali monophosphat (KH2PO4) 1,7
b. Khống vi lượng (mg/l)
- Boric axit (H3BO3) 6,2 - Mangan sulfat (MnSO4 . 4H2O) 22,3 - Kẽm sulfat (ZnSO4. 7H2O) 8,6 - Kali iot (KI) 0,83 - Natri molypdat (Na2MoO4. 2H2O) 0,25 - Đồng sulfat (CuSO4. 5H2O) 0,025 - Coban sulfat (CoCl2. 6H2O) 0,25 - Na2- EDTA 37,3 - Sắt sulfat (FeSO4. 7H2O) 27,8 c. Vitamin (mg/l) - Thiamin- HCl (B1) 0,1 - Myo- inositol 100 - Glycine 2 - Nicotinic acid 0,5 - Piridoxin – HCl (B6) 0,5
Cũng theo nghiên cứu của các tác giả trên thì mơi trường dùng cho nhân chồi
dâu tây sử dụng loại cytokinin BA thích hợp hơn Kin, cũng như sử dụng phối hợp
BA và Kin. Sử dụng BA riêng lẻ ở nồng độ 0,3 mg/l cho hệ số nhân chồi cao nhất
với chất lượng chồi khá tốt.
Trong giai đoạn hình thành rễ, tác giả Indra D. Bhatt và Uppeandra [36] cĩ kết luận rằng rễ của loài dâu tây Fragaria x ananasa ra rễ tốt nhất khi sử dụng NAA
với liều lượng thấp (0,1mg/l), nhưng theo nghiên cứu của tác giả Văn Thị Như
Ngọc [18] với cây dâu tây Mỹ Đá thì auxin NAA khơng phù hợp và mơi trường
thích hợp nhất là 1/2MS +0,2mg/l IBA + 0,75g/l than hoạt tính.
Do đĩ tơi chọn mơi trường nhân chồi là mơi trường MS + 20g/l đường
sucrose + 0,3mg/l BA, được làm đặc bằng agar 8g/l hoặc alginate với nồng độ
nghiên cứu.
Mơi trường ra rễ là mơi trường khống MS/2 + vitamin Morel +20g/l đường
sucrose + chất kích thích sinh trưởng IBA 0,2mg/l và 0,75g/l than hoạt tính, đặc làm
đặc bằng agar 8 g/l hoặc alginate với nồng độ nghiên cứu.
pH mơi trường được điều chỉnh đến 5,8 bằng dung dịch KOH 0,1N hoặc HCl
0,1N trước khi đem đi hấp khử trùng ở 1210C; 1,3 atm. Mơi trường được lưu giữ ở điều kiện thường trong 7-10 ngày để kiểm tra khả năng nhiễm trước khi cấy.