1.1 .Tổng quan về selen
1.2. Các phương pháp xác định selen
1.2.3.3. Phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao ghép nối với hệ quang phổ
thụ nguyên tử sử dụng kĩ thuật hydrua hóa (HPLC-HG-AAS)
Nguyên tắc : các dạng selen được tách trên cột trao đổi ion của thiết bị HPLC sau đó được dẫn trực tiếp vào bộ hydrua hóa của thiết bị AAS. Ở đây selen được chuyển thành hơi H2Se (bởi H2 được sinh ra từ phản ứng của NaBH4 trong môi trường axit HCl). Hơi này được dẫn sang bộ ngun tử hóa mẫu bằng khí Ar, chúng được ngun tử hóa tạo thành những đám hơi nguyên tử tự do. Một chùm ánh sáng đơn sắc chiếu qua đám hơi nguyên tử tự do này, tiến hành đo cường độ dòng của chùm sáng chiếu qua ta thu được phổ hấp thụ của nguyên tố (hình 1.3). Bằng phương pháp này, L.Kozak và CCS đã xác định được dạng Se (VI) và Se (IV) với giới hạn phát hiện LOD cho cả hai dạng là 10 ng/ml[37].
Hình 1.3. Sơ đồ hệ ghép nối HPLC-HG-AAS
1.2.3.4. Phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao ghép nối với hệ quang phổ phát xạ nguyên tử sử dụng kĩ thuật hydrua hóa (HPLC-HG-AFS)
Phương pháp này dựa trên khả năng tách các dạng Se của cột sắc kí lỏng HPLC được ghép nối với hệ thống hydrua hóa và detetector huỳnh quang nguyên tử. Các dạng Se sau khi tách trên thiết bị HPLC được dẫn vào hệ thống hydrua hóa bằng một bơm nhu động. Tại vòng phản ứng các dạng Se này được hydro mới sinh (do phản ứng giữa NaBH4 và HCl) khử thành hơi H2Se và hơi này được dịng khí Ar cuốn sang ngọn lửa plasma. Ở đây hơi Se được nguyên tử hóa thành đám hơi nguyên tử tự do
và bị kích thích lên mức năng lượng cao hơn. Khi trở về mức năng lượng bền chúng phát ra những bức xạ đặc trưng của mỗi nguyên tố và tạo thành phổ phát xạ nguyên tử[60].
Bằng phương pháp này, I. Polyi và CCS đã phân tích được 4 dạng Se là selenocystine (SeCys), selenomethionine (SeMet), selenoethionine (SeEt) và Se (IV) với giới hạn phát hiện lần lượt là 18, 70, 96 và 16 µg/l[30].
1.2.3.5. Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao ghép nối plasma cao tần cảm ứng - phổ khối (HPLC-ICP-MS)