Theo hình 3.7 cho thấy trọng lượng chuột nhắt của cả 3 lô vắc xin BCG khỏe mạnh, lên cân sau 7 ngày theo dõi. Các lô vắc xin BCG 488-10-20; 489- 10-20, 490-10-20 đều đạt yêu cầu về an toàn chung theo tiêu chuẩn WHO/TRS 979, 2013 và DĐVN V, 2017.
Qua 13 chỉ tiêu chất lượng được kiểm tra, cả 3 lô vắc xin BCG 488-10- 20, 489-10-20 và 490-10-20 sản xuất thử nghiệm trên ống 2ml có định vị bẻ được với độ dày vòng sơn cổ 0,9±0,1mm, lực bẻ 93,30N là phù hợp với dây chuyền công nghệ sản xuất và đạt tiêu chuẩn chất lượng đăng ký (Dược điển Việt Nam V, 2017 và WHO TRS 979, 2013).
Ống có định vị bẻ đƣợc Ống dùng vật liệu tạo vết khứa
5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49 51 53 55 57 59 TB+2SD TB TB-2SD Số lô đvs/mg 6 5.5 5 4.5 4 3.5 3 2.5 2 1.5 1 1 3
3.2.2. Giám sát chất lượng vắc xin BCG sản xuất tr n ống 2ml có ịnh vị bẻ ược
Lơ vắc xin BCG 488-10-20 là lô vắc xin đầu tiên chứa trong ống 2ml có định vị bẻ được khơng dùng vật liệu tạo vết khứa. Đến tháng 12/2021, IVAC đã sản xuất được 60 lơ vắc xin BCG trên ống có định vị bẻ được, tương đương 9.600.000 liều. Kết quả kiểm định chất lượng tại IVAC và Viện kiểm định quốc gia đạt tiêu chuẩn đăng ký, đủ điều kiện xuất xưởng.
Chất lượng của vắc xin BCG sản xuất trên ống 2ml có định vị bẻ được giám sát thông qua theo dõi các chỉ tiêu chất lượng trên biểu đồ Shewhat chat có so sánh với số liệu kiểm định của các lô vắc xin BCG sản xuất trước đó (trên ống khơng có định vị bẻ được). Kết quả so sánh trên 60 lô vắc xin BCG mỗi loại được trình bày dưới đây:
3.2.2.1. Chất lượng về độ sống vắc xin BCG
Hình 3.8. Kết quả ộ sống của vắc xin BCG 2 loại ống chứa vắc xin
Theo hình 3.8 độ sống của vắc xin BCG được sản xuất trên 2 loại ống có định vị bẻ được và ống sử dụng vật liệu tạo vết khứa có kết quả ổn định và nằm trong khoảng TB ± 2SD, độ sống dao động từ 2,5 x106đvs/mg đến 4,5x106
đvs/mg. Kết quả phân tích từ hàm T-test cho thấy P= 0,06. Sự khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê về độ sống của vắc xin BCG trên 2 loại ống này.
Ống có định vị bẻ đƣợc Ống dùng vật liệu tạo vết khứa
Số lô 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49 51 53 55 57 59 TB-2SD TB TB+2SD 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 %
Từ phân tích trên thể hiện quy trình sản xuất vắc xin BCG ổn định. Vắc xin chứa trong ống có định vị bẻ được so với ống sử dụng vật liệu tạo vết khứa có kết quả độ sống tương đương nhau.
3.2.2.2. Chất lượng về độ ổn định nhiệt vắc xin BCG
Kết quả ổn định nhiệt của 60 lơ vắc xin BCG được sản xuất trên ống có định vị bẻ được và 60 lô vắc xin dùng vật liệu tạo vết khứa, có độ ổn định nhiệt trung bình là 39,55% và 40,30%. Đồng thời kiểm định Pair sample T- test trong SPSS cho kết quả phân tích thống kê P = 0,47 với độ tin cậy 95%. Từ các dữ liệu trên cho thấy sự khác biệt về ổn định nhiệt của 2 loại ống khơng có ý nghĩa thống kê.
Hình 3.9. Kết quả ổn ịnh nhiệt của 2 loại ống chứa vắc xin
3.2.2.3. Chất lượng độ phân tán vắc xin BCG
Đánh giá kết quả độ phân tán của 60 lô trên ống dùng vật liệu tạo vết khứa (lô 428 đến 487) và 60 lơ trên ống có định vị bẻ được (lơ 488 đến lô 547) Kết quả thể hiện trong hình 3.10.
1.600 1.500 TB +2SD 1.400 TB 1.300 1.200 TB -2SD 1.100 1.000 Số lơ 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49 51 53 55 57 59 Ống dùng vật liệu tạo vết khứa Ống có định vị bẻ đƣợc
Hình 3.10. Kết quả ộ phân tán của 2 loại ống chứa vắc xin
Độ phân tán của vắc xin BCG trên ống có định vị bẻ được và ống dùng vật liệu tạo vết khứa có kết quả tương đương nhau, độ phân tán trung bình của vắc xin BCG trên ống dùng vật liệu tạo khứa là 1,316 và vắc xin BCG trong ống có định vị bẻ được là 1,336. Tất cả các lô đều ổn định và nằm trong giới hạn TB ± 2SD (từ 1,22 đến 1,43).
3.2.2.4. Chất lượng về độ chân không vắc xin BCG
Vắc xin BCG sau khi phân ống và đơng khơ sẽ được hàn kín bằng máy hàn chân khơng KUMABE ES 1500 (Nhật Bản). Kiểm tra chân không là kiểm tra độ kín của các ống sau khi hàn, trước khi đưa vào đóng gói và thành phẩm sau khi đóng gói. Độ kín của ống phải được duy trì đến hết vịng đời của sản phẩm.
Độ chân không vắc xin BCG được kiểm tra trên tất cả các lơ, kết quả được phân tích trên 60 lơ vắc xin được chứa trong ống 2ml có định vị bẻ được so với ống dùng vật liệu khứa để bẻ và được kiểm tra bằng máy Tesla coil (Nhật Bản).
% 3 2.8 2.6 TB+2SD 2.4 TB 2.2 TB-2SD 2 1.8 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49 51 53 55 57 59 Số lơ Ống dùng vật liệu khứa Ống có định vị bẻ đƣợc
Bảng 3.9. Kết quả kiểm tra chân khơng vắc xin BCG sau óng gói
Loại ống Lơ sản xuất (n=60)
Kết quả kiểm tra chân không vắc xin BCG thành phẩm Tiêu chuẩn Ống dùng vật liệu tạo vết khứa 428-487 Đạt 100% ống đạt chân không, các ống được kiểm tra phát ra ánh sáng tím đến trắng xanh khi kiểm tra bằng máy Tesla coil.
Ống có định vị bẻ
được 488-547 Đạt
Kết quả kiểm tra chân không tất cả các lô trên 2 loại ống chứa vắc xin đều đạt tiêu chuẩn 100%. Tất cả các ống được kiểm tra phát ra ánh sáng tím đến trắng xanh khi kiểm tra bằng máy Tesla coil.
Độ chân khơng của 2 loại ống có kết quả tương đương nhau.
3.2.2.5. Chất lượng độ ẩm tồn dư vắc xin BCG
Theo hình 3.11 ta thấy: độ ẩm của 60 lô vắc xin BCG trên ống 2ml dùng vật liệu tạo vết khứa tương đồng với kết quả của 60 lơ vắc xin BCG đơng khơ trên ống có định vị bẻ được. Kết quả này ổn định và nằm trong tiêu chuẩn ≤ 3%. Sự khác biệt của độ ẩm tồn dư trên 2 loại ống này khơng có ý nghĩa thống kê với P = 0,168 khi phân tích kiểm định T-test với độ tin cậy 95%.
Kết quả so sánh các chỉ tiêu chất lượng của 60 lô vắc xin BCG sản xuất trên ống 2ml có định vị khơng khác biệt so với 60 lô vắc xin BCG sản xuất trước đó (khơng có định vị bẻ được).
3.3. NGHIÊN CỨU TÍNH ỔN ĐỊNH CỦA VẮC XIN BCG TRONG ỐNG 2ML CÓ ĐỊNH VỊ BẺ ĐƯỢC 2ML CÓ ĐỊNH VỊ BẺ ĐƯỢC
Nghiên cứu tính ổn định của vắc xin để xác định tỉ lệ thay đổi độ sống (công hiệu) được cho là liên quan đến chất lượng của sản phẩm. Tính ổn định của vắc xin BCG được theo dõi trên 3 lô, mỗi lô tiến hành kiểm tra tại 3 thời điểm 6 tháng , 12 tháng và 18 tháng. Tại mỗi thời điểm, chúng tôi lặp lại mẫu 3 lần trên một lơ. Kết quả trung bình tại mỗi thời điểm được lần lượt so sánh với kết quả sau đơng khơ.
3.3.1. Tính ổn ịnh ộ sống (cơng hiệu) của vắc xin BCG theo thời gian Bảng 3.10. Độ sống của vắc xin BCG theo thời gian
Thời gian Độ sống vắc xin BCG (x10
6 đvs/mg)
Lô: 488-10-20 Lô: 489-10-20 Lô: 490-10-20
Sau đông khô 4,22 3,96 3,52
06 tháng 4,10 3,90 3,43
12 tháng 3,81 3,63 3,21
18 tháng 3,65 3,29 2,99
Tiêu chuẩn 1 - 6
Theo bảng 3.10, vắc xin BCG ở nhiệt độ bảo quản (2-8oC), sau 18 tháng độ sống của các lô vắc xin BCG 488-10-20, 489-10-20 và 490-10-20
Sau đông khô06 tháng12 tháng18 thángThời gian 488-10-20 489-10-20 490-10-20 % 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 lần lượt là: 3,65 x106 đvs/mg, 3,29 x106 đvs/mg và 2,99 x106 đvs/mg, đạt tiêu chuẩn theo DĐVN V, 2017.
Tuy vậy, so với độ sống sau đông khô tất cả các lô vắc xin đều có giảm nhẹ độ sống theo thời gian bảo quản. Tỷ lệ giảm độ sống của 3 lô vắc xin BCG 488-10-20, 489-10-20 và 490-10-20 được thể hiện ở hình 3.12.
Hình 3.12. Tỷ lệ giảm ộ sống vắc xin BCG theo thời gian
Kết quả độ sống của vắc xin BCG đến thời điểm 12 tháng cho thấy độ sống vắc xin BCG giảm 9-10%, phù hợp với vắc xin BCG đông khô [37].
Đến thời điểm 18 tháng, độ sống các lô giảm trung bình thấp nhất là 13,43% ở lơ 488-10-20 và nhiều nhất ở lô 489-10-20 là 17,0%. Nghiên cứu này cho kết quả tương tự với nghiên cứu tính ổn định vắc xin BCG của tác giả Huỳnh Thị Thanh Xuân ở ống dùng vật liệu tạo vết khứa để bẻ. Độ sống của vắc xin BCG giảm hằng năm khoảng 10% [24;40].
3.3.3. Tính ổn ịnh nhiệt của vắc xin BCG theo thời gian
Tính ổn định nhiệt của 3 lơ vắc xin BCG 488-10-20, 489-10-20 và 490- 10-20 tại các thời điểm kiểm tra được thể hiện ở hình 3.13.
% 55 50 45 40 35 30 25 488-10-20 489-10-20 490-10-20 Thời gian 20
Sau đơng khơ 06 tháng 12 tháng 18 tháng
Hình 3.13. Kết quả ộ ổn ịnh nhiệt vắc xin BCG theo thời gian
Tính ổn định nhiệt của vắc xin BCG tăng dần khi độ sống vắc xin BCG giảm theo thời gian. Lô vắc xin BCG độ ổn định nhiệt trung bình tăng từ 39,28% sau đơng khơ lên 46,51 % sau 18 tháng. Kết quả cho thấy, độ ổn định nhiệt của vắc xin BCG cao hơn nhiều so với tiêu chuẩn là ≥ 20%.
3.3.4. Tính ổn ịnh v ti u chuẩn ộ ẩm ộ tồn dư
Bảng 3.11. Độ ẩm tồn dư của vắc xin BCG theo thời gian
Thời gian
Độ ẩm tồn dư vắc xin BCG theo thời gian (%)
488-10-20 489-10-20 490-10-20
Sau đông khô 2,09 2,35 2,41
06 tháng 2,21 2,57 2,41
12 tháng 2,41 2,49 2,17
18 tháng 2,28 2,32 2,29
Trung bình 2,25 2,43 2,32
Nghiên cứu cho thấy, độ ẩm tồn dư cao làm ảnh hưởng đến cảm quan và độ ổn định về độ sống cũng giảm mạnh trong quá trình bảo quản (38).
Độ ẩm tồn dư của vắc xin BCG được sản xuất trên ống 2ml có định vị bẻ được đến 18 tháng có kết quả trung bình là 2,25%, 2,43% và 2,32% tương ứng với lô 488-10-20, 489-10-20 và 490-10-20 và đều đạt tiêu chuẩn ≤ 3%
theo dược điển Việt Nam V, 2017. Độ ẩm tồn dư sau 18 tháng khơng có sự thay đổi so với kết quả ban đầu.
3.3.5. Tính ổn ịnh v ti u chuẩn chân khơng
Đối với vắc xin BCG được sản xuất trong ống có định vị bẻ được, phải theo dõi độ ổn định của ống trong suốt vòng đời của sản phẩm, và được đánh giá độ kín của ống bằng phương pháp kiểm tra chân không.
Thực hiện kiểm tra chân khơng trên tồn bộ số ống 2ml có định vị bẻ được của lô vắc xin BCG sau hàn ống tại các thời điểm sau 6 tháng, 12 tháng và 18 tháng bảo quản ở nhiệt độ 2-8oC.
Bảng 3.12. Kết quả kiểm tra chân không theo thời gian
Thời gian
Tỷ lệ loại bỏ chân không (%)
Lô: 488-10-20 Lô: 489-10-20 Lô: 490-10-20 Tiêu chuẩn Sau hàn ống (%) 4,07 3,48 3,56 ≤ 5% Sau 6 tháng (%) 0 0 0 0 Sau 12 tháng (%) 0 0 0 0 Sau 18 tháng (%) 0 0 0 0
Bảng 3.12 cho thấy, kết quả kiểm tra chân không của vắc xin BCG sản xuất trên ống 2 ml có định vị bẻ được sau 18 tháng bảo quản ở nhiệt độ 2 đến 8oC không phát hiện thêm ống nào khơng đạt chân khơng.
3.3.6. Tính ổn ịnh v các chỉ ti u tốc ộ tạo huy n dịch ồng nhất, cảm quan
Bảng 3.13. Tốc ộ tạo huy n dịch ồng nhất của vắc xin BCG theo thời gian
Thời gian
Tốc độ tạo huyền dịch đồng nhất (giây) 488-10-20 489-10-20 490-10-20
Sau hàn ống 44 42 43
Sau 6 tháng 45 44 45
Sau 12 tháng 44 46 44
Sau 18 tháng 44 45 43
Tiêu chuẩn (giây) ≤ 60
* Kết quả kiểm tra tốc độ tạo huyền dịch đồng nhất sau 6,12, 18 tháng bảo quản ở 2 đến 8oC của 3 lô vắc xin BCG đơng khơ nghiên cứu trên ống 2 ml có định vị bẻ được ổn định và đạt tiêu chuẩn.
* Kết quả kiểm tra dạng vật lý (cảm quan): tất cả các ống vắc xin BCG đơng khơ trên ống 2ml có định vị bẻ được sau 6, 12, 18 tháng đạt tiêu chuẩn: bột trắng, bong, không teo, không chứa tạp chất theo DĐVN V, 2017.
Tóm tắt:
Độ sống vắc xin BCG sau 18 tháng, giảm nhiều nhất là 17% và ít nhất là 13,43% so với thời điểm sau đông khô. Đạt yêu cầu theo tiêu chuẩn xuất xưởng về độ sống là 1– 6 x 106đvs/mg và cũng tương đồng với kết quả nghiên cứu trước đó ở ống 2ml dùng vật liệu tạo vết khứa.
Tính ổn định nhiệt của vắc xin BCG theo thời gian 18 tháng trung bình là 46,51% so với tiêu chuẩn xuất xưởng ≥ 20%.
Kết quả nghiên cứu tính ổn định về dạng vật lý, độ ẩm tồn dư, tốc độ tạo huyền dịch đồng nhất, tỷ lệ loại bỏ chân không cho thấy gần như không thay đổi sau 18 tháng bảo quản.
CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
4.1. KẾT LUẬN
4.1.1. Đã xác định được các thông số kỹ thuật cho ống thủy tinh 2 ml có định vị bẻ được hãng Schott, (theo bản vẽ số: 70000000300/00. Quality Certificate No: 0414/CA-QA/XI/15, mã số: 10000380905) với độ dày vòng sơn cổ 0,9±0,1 và lực bẻ 93,30 Newton. Phù hợp với trang thiết bị hiện có tại cơ sở sản xuất (IVAC).
4.1.2. Sản xuất (3lô) vắc xin BCG đông khô trên ống 2ml định vị bẻ được đạt chất lượng trên tất cả 13 tiêu chuẩn xuất xưởng phù hợp khuyến cáo của WHO, TRS 979 và tham chiếu tiêu chuẩn DĐVN V, 2017
Phân tích xu hướng các chỉ tiêu chất lượng vắc xin BCG. Tất cả 60 lô vắc xin (tương đương 9.600.000 liều) sản xuất từ 02/2020 đến 12/2021, trên ống 2ml có định vị bẻ được có kết quả về độ sống, ổn định nhiệt, mật độ quang, độ ẩm tồn dư, cảm quan, an tồn đặc hiệu, chân khơng, tốc độ tạo huyền dịch đồng nhất … tương đồng với chất lượng các lô vắc xin được sản xuất trên ống 2ml dùng vật liệu tạo vạch khứa cổ ống sản xuất từ 10/2018 đến 01/2020.
4.1.3. Ba lô vắc xin BCG được sản xuất trên ống 2ml có định vị bẻ được bảo quản ở điều kiện 2-8oC sau 18 tháng đạt 6 chỉ tiêu đánh giá về độ sống, ổn định nhiệt, độ ẩm tồn dư, độ chân không, dạng vật lý và tốc độ tạo huyền dịch đồng nhất, có chất lượng ổn định ở tất cả chỉ tiêu đánh giá. Độ sống giảm 13-17% so với độ sống sau đông khô (giảm theo quy luật).
Tỉ lệ ổn định nhiệt tăng nhẹ, các chỉ tiêu khác: độ ẩm tồn dư, tốc độ tạo huyền dịch đồng nhất, tỷ lệ loại bỏ chân không gần như không thay đổi theo thời gian.
Đã nghi n cứu và sản xuất ược vắc xin BCG tr n ống 2ml có
4.2. KIẾN NGHỊ