2. SÀNG LỌC ĐỘT BIẾN TRÊN GEN β-GLOBIN BẰNG KỸ THUẬT
3.1 Đặc điểm Hb các đột biến trong nghiên cứu
Bảng 3.6 mơ tả trung bình thành phần Hb các trƣờng hợp đột biến trong nghiên cứu của chúng tôi.
Bảng 3.6. Trung bình thành phần Hb các trƣờng hợp đột biến trong
nghiên cứu HbA1 (%) HbA2 (%) HbF (%) β-thalassemia (n=101) Cd 17 (n=44) 72,36±30,5 4 4,33±1,72 20,36±4,15 Cd 41/42 (n=55) 76,17±27,6 5 4,03±1,75 19,22±3,77 Cd 95 (n=2) 93,85±2,33 6,15±2,33 - β-thalassemia/Cd 26 (HbE) (n=74) Cd 17 (n=32) 25,73±5,27 2,92±1,72 29,29±18,37 Cd 41/42 (n=40) 21,83±3,41 1,25±1,21 33,10±15,65 Cd 95 (n=2) 33,55±0,55 - 15,75±15,75 Chẩn đoán β-thalassemia (n=44) 54,97±38,2 6 2,98±0,80 22,20±3,62 Khơng có 4 đột biến đƣợc khảo sát trong nghiên cứu (n=139)
89,62±13,5
9 3,80±0,26 3,08±1,82 Kết quả cho thấy, HbA1 đều bị giảm ở tất cả các trƣờng hợp. Trong nhóm β-thalassemia, giá trị HbA1 ở 44 mẫu có đột biến Cd 17 là 72,36±30,54; ở 55 mẫu có đột biến Cd 41/42 là 76,17±27,65 và 2 mẫu đột biến Cd 95 là 93,85±2,33. Do các mẫu trong nghiên cứu đều là các trƣờng
hợp bệnh thalassemia, nên trong nhóm β-thalassemia, sẽ bao gồm các trƣờng hợp kết hợp với 1 đột biến khác ngoài 4 đột biến trong nghiên cứu, hoặc kết hợp đột biến α-thalassemia. Nếu trƣờng hợp có kết hợp với đột biến khác dẫn tới β-thalassemia thể nặng hoặc thể trung gian, HbA1 giảm xuống. Ví dụ trong nghiên cứu của Mondal và cs. (2016), các trƣờng hợp bệnh này, HbA1 giảm xuống là 38,8±21,2 [37]. Đối với các trƣờng hợp kết hợp đột biến β- thalassemia và α-thalassemia, HbA1 có thể nằm trong khoảng 92-95% [26]. Theo kết quả chẩn đốn sinh hóa của Viện Huyết học – Truyền máu Trung ƣơng, trong 44 mẫu đột biến Cd 17 có 8 mẫu đƣợc chẩn đoán là α- thalassemia, 21 mẫu đƣợc chẩn đoán là thalassemia và 15 mẫu khơng có chẩn đốn là thalassemia. Trong 55 mẫu có đột biến Cd 41/42, chỉ có 1 mẫu có chẩn đốn là β-thalassemia, 10 mẫu có chẩn đốn là α-thalassemia, 20 mẫu có chẩn đốn là thalassemia, 25 mẫu không có chẩn đốn là thalassemia. Hai mẫu có đột biến Cd 95 đều khơng có chẩn đốn sinh hóa là thalassemia.
Giá trị HbA1 ở 32 mẫu có đột biến Cd 17 và Cd 26 là 25,73±5,27, ở 40 mẫu có đột biến Cd 41/42 và Cd 26 là 21,83±3,41, ở 2 mẫu có đột biến Cd 95 và Cd 26 là 33,55±0,55. Nhiều nghiên cứu cũng cho thấy trƣờng hợp có Cd 26 (HbE) kết hợp với đột biến khác gây bệnh β-thalassemia thì HbA1 giảm xuống rất thấp. Ví dụ nhƣ, nghiên cứu của Mondal và cs. (2016) trên 1348 trƣờng hợp β-thalassemia/Cd 26 tại Ấn Độ có trung bình HbA1 là 18,1±12,3 [37]. Hoặc nghiên cứu của Lim và cs. (2014), HbA1 trên 30 trƣờng hợp bệnh tại Malaysia giảm xuống còn 8,86±25,49 (trong khoảng 1,10-59,9%) [33]. Thậm chí khơng có HbA1 trong nghiên cứu của Thedsawad và cs. (2012) trên 49 trƣờng hợp bệnh ở Thái Lan [60].
Phân tích chỉ số HbA2 cho các trƣờng hợp đột biến β-thalassemia, chúng tôi nhận thấy HbA2 ở 44 bệnh nhân dị hợp Cd 17 là 4,33±1,72, ở 55 bệnh nhân dị hợp Cd 41/42 là 4,03±1,75, và ở 2 bệnh nhân dị hợp Cd 95 là
6,15±2,33. Giá trị HbA2 trong nghiên cứu của chúng tôi phù hợp với kết quả của Thedsawad và cs. (2012): HbA2 ở 27 trƣờng hợp đột biến Cd 17 là 5,9±0,5 và ở 77 trƣờng hợp đột biến Cd 41/42 là 6,0±0,6 [60]. Nghiên cứu của Mondal (2016) cho thấy trung bình HbA2 của 1981 trƣờng hợp β- thalassemia thể nặng và trung gian tại Ấn Độ là 4,1±1,7 [37]. Tuy nhiên, ở 74 trƣờng hợp β-thalassemia/Cd 26 trong nghiên cứu của chúng tơi thì giá trị HbA2 giảm xuống. HbA2 ở 32 mẫu Cd 26 kết hợp Cd 17 là 2,92±1,72; 40 mẫu Cd 26 kết hợp Cd 41/42 là 1,25±1,21. Hai mẫu Cd 26 kết hợp Cd 95 khơng có thơng tin về HbA2. Một số nghiên cứu khác nhƣ của Uddin (2012) và Mondal (2016), các trƣờng hợp β-thalassemia/Cd 26 khơng có HbA2 trên điện di Hb [37,63].
Bảng 3.6 cho thấy chỉ số HbF tăng cao ở các trƣờng hợp đột biến Cd 17 và Cd 41/42, lần lƣợt là 20,36±4,15 và 19,22±3,77. Nguyên nhân là do các trƣờng hợp này có 1 đột biến sẽ kết hợp với 1 đột biến khác ngoài 4 đột biến trong nghiên cứu gây bệnh β-thalassemia thể nặng hoặc thể trung gian. Nhiều nghiên cứu cho thấy HbF nằm trong khoảng từ 10-100% ở trƣờng hợp β- thalassemia thể nặng hoặc thể trung gian. Ví dụ nhƣ trong nghiên cứu của Patel và cs. (2008) trên 32 trƣờng hợp đột biến β-thalassemia thể nặng, HbF nằm trong khoảng 14-85,6% [46]. Nghiên cứu của Khan và cs. (2016), HbF ở 3 trƣờng hợp đột biến β-thalassemia thể trung gian là 43,47±0,40; ở 36 trƣờng hợp β-thalassemia thể nặng là 92,35±4,83 [29].
Trong nghiên cứu của chúng tơi, 2 trƣờng hợp có đột biến Cd 95 khơng có thơng tin về HbF. Chúng tôi nhận thấy, đối với 2 mẫu này, HbA1 chỉ giảm xuống là 93,85±2,33, cao hơn so với các trƣờng hợp đột biến Cd 17 và Cd 41/42, nhƣng HbA2 tăng lên tới 6,15±2,33. Có thể 2 trƣờng hợp này mang 1 đột biến Cd 95 và kết hợp với α-thalassemia. Trong các trƣờng hợp mang gen bệnh β-thalassemia kết hợp với α-thalassemia, HbA1 có thể nằm trong
khoảng 92-95% và HbA2 tăng (>3,5%) [26]. Ví dụ nhƣ trong nghiên cứu của Li và cs. (2006) trên 10 trƣờng hợp có đột biến β-thalassemia và α- thalassemia, HbA1 có thể nằm trong khoảng 93-95%, HbA2 nằm trong khoảng 4,9-5,7%; HbF trong khoảng 0,5-1,4% [32].
Chúng tôi cũng nhận thấy, 74 trƣờng hợp β-thalassemia/Cd 26 có giá trị HbF tăng cao. HbF ở 32 trƣờng hợp có đột biến Cd 17 và Cd 26 là 29,29±18,37, ở 40 trƣờng hợp có đột biến Cd 41/42 và Cd 26 là 33,10±15,65, ở 2 trƣờng hợp có đột biến Cd 95 và Cd 26 là 15,75±15,75. Kết quả của chúng tơi hồn tồn phù hợp với một số nghiên cứu khác trên thế giới. Nghiên cứu của Premawardhena và cs. (2005) trên 109 bệnh nhân β-thalassemia/Cd 26 ở Sri Lanka có HbF nằm trong khoảng từ 3-60% [47]. Kết quả nghiên cứu của Thedsawad và cs. (2012) cũng cho thấy HbF cao ở 16 mẫu có đột biến Cd 26 kết hợp với Cd 17 là 37,2±15 và 28 mẫu có đột biến Cd 26 kết hợp với Cd 41/42 là 37,6±14,3 [60]. Lim và cs. (2014) chỉ ra ở 30 trƣờng hợp β- thalassemia/Cd 26 có trung bình HbF là 27,81±26,25 (trong khoảng 5,90- 49,10 %) [33].
Chúng tơi cũng nhận thấy trung bình các thành phần Hb tƣơng tự ở 44 trƣờng hợp đƣợc chẩn đốn sinh hóa là β-thalassemia bởi Viện Huyết học – Truyền máu Trung ƣơng. HbA1 giảm xuống chỉ còn 54,97±38,26, HbF tăng lên 22,20±3,62, HbA2 là 2,98±0,80 nằm trong giới hạn bình thƣờng. Ba giá trị này cho thấy hemoglobin các loại đột biến trong nghiên cứu phù hợp với kết quả chẩn đốn sinh hóa.
Nhóm khơng có đột biến trong nghiên cứu có 139 trƣờng hợp, gồm các trƣờng hợp có đột biến β-thalassemia, đột biến α-thalassemia hoặc β- thalassemia kết hợp α-thalassemia. Trong nhóm này, HbA1 giảm xuống 89,62±13,59; HbA2 tăng lên 3,80±0,26; nhƣng HbF là 3,08±1,82 nằm trong giới hạn bình thƣờng. Theo kết quả chẩn đốn sinh hóa, trong 139 mẫu này,
chỉ có 6 mẫu đƣợc chẩn đốn là β-thalassemia, 8 mẫu đƣợc chẩn đốn là α- thalassemia, 55 mẫu có chẩn đốn là thalassemia, 70 mẫu có chẩn đốn khác.
Nhƣ vậy, tùy theo loại đột biến gây bệnh β-thalassemia mà thành phần Hb sẽ có thay đổi. Kết quả của chúng tơi thu đƣợc phù hợp với đặc điểm Hb các trƣờng hợp đột biến ở một số nghiên cứu khác trong và ngoài nƣớc.