CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CHẾ TẠO NANOASTAXANTHIN
3.1.1 Ảnh hưởng của chất hoạt động bề mặt tới quá trình chế tạo nano astaxanthin nano astaxanthin
Ảnh hưởng của tỷ lệ chất hoạt động bề mặt cremophor RH40/hoạt chất astaxanthin tới sự hình thành hạt nano astaxanthin đã được khảo sát. Hình 3.1 là kết quả đo phân bố kích thước hạt của các mẫu nano astaxanthin chế tạo được. 0 50 100 150 200 250 300 350 400 0 2 4 6 8 10 12 D is tr ib u ti o n ( % ) Particle diameter (nm) A1 A2 A3
Hình 3.1. Giản đồ phân bố kích thước hạt của nano astaxanthin theo các tỷ lệ
khác nhau giữa astaxanthin và chất hoạt động bề mặt cremorphor RH40 Các mẫu A1, A2, A3 với tỷ lệ hàm lượng astaxanthin/cremophor RH40 là 1/1 (A1), 1/2 (A2), và 1/3 (A3) cho kết quả đường kính hạt trung bình lần lượt là 115 nm, 90 nm và 85 nm. Nhận thấy, khi giảm tỷ lệ hàm lượng astaxanthin/RH40 thì đường kính hạt trung bình của các mẫu giảm, đặc biệt khi giảm tỷ lệ 1/1 xuống 1/2 tức hàm lượng chất hoạt động bề mặt tăng gấp
đơi so với hoạt chất thì kích thước hạt giảm xuống đáng kể, từ 115 nm xuống 90 nm. Tiếp tục giảm tỷ lệ hàm lượng astaxanthin/cremophor RH40 từ 1/2 xuống 1/3 thì xu hướng kích thước hạt nano giảm khơng đáng kể. Theo một số nghiên cứu, hàm lượng chất hoạt động bề mặt khi đưa vào công thức chế tạo hạt nano cần phù hợp để tránh những tác dụng phụ của sản phẩm cuối cùng như tăng mỡ máu hay rối loạn chuyển hóa lipit. Ngồi ra, giản đồ phân bố kích thước hạt cho thấy mẫu A2 có sự phân bố hẹp và kích thước hạt trung bình dưới 100 nm. Như vậy, kết quả cho thấy vai trò trong việc tạo hạt nano astaxanthin của chất hoạt động bề mặt cremophor RH40 và tỷ lệ astaxanthin/chất hoạt động bề mặt là 1/2 được lựa chọn cho công thức nano astaxanthin.
Để đánh giá hiệu quả của các chất hoạt động bề mặt khác nhau tới quá trình chế tạo hạt nano astaxanthin, chúng tôi thay thế RH40 bằng tween 80 với tỷ lệ astaxanthin/tween 80 là 1/2 (A4) là tỷ lệ đã đạt được kích thước hạt nano tốt dưới 100 nm. 0 50 100 150 200 250 300 350 0 2 4 6 8 10 12 Di s tr ibu ti on ( %) Particle diameter (nm) A2 A4
Hình 3.2. Giản đồ phân bố kích thước hạt của nano astaxanthin sử dụng chất
A1
100nm 100nm
100nm 100nm
A2
A3 A4
Hình 3.2 là kết quả giản đồ phân bố kích thước hạt của nano astaxanthin khi sử dụng chất hoạt động bề mặt cremophor RH40 và tween 80. Các tiểu phân trong mẫu A2, A4 có đường kính trung bình lần lượt là 90 nm và 96 nm. Khơng có sự khác biệt đáng kể giữa 2 mẫu này. Tuy nhiên, mẫu A4 có nhiều hạt tiểu phân lớn hơn, một số hạt có đường kính lên tới gần 200 nm. Mặt khác, cremophor RH40 có độc tính thấp hơn tween 80. Do đó, cremophor RH40 được lựa chọn sử dụng làm chất hoạt động bề mặt cho quá trình chế tạo nano astaxanthin.
3.1.2. Hình thái của các mẫu nano astaxanthin
Hình thái của các mẫu bột nano astaxanthin được đánh giá qua ảnh TEM. Kết quả ảnh TEM của các mẫu A1, A2, A3 và A4 được thể hiện lần lượt trong Hình 3.3.
Ảnh TEM cho thấy, các hạt nano astaxanthin trong các mẫu A1, A2, A3 và A4 đều có dạng hình cầu và đặc biệt khơng có hiện tượng kết đám với nhau. Ảnh TEM của mẫu A2 cho các hạt có kích thước nhỏ (khoảng 90 nm) và có sự phân bố đồng đều nhất. Kết quả này hoàn toàn tương đồng với kết quả đo phân bố kích thước hạt trong mục 3.1.1. Mẫu A2 tiếp tục được lựa chọn để nghiên cứu và đánh giá các hoạt tính sinh học của nano astaxanthin.
3.1.3. Đánh giá khả năng phân tán trong nước của mẫu bột nano astaxanthin astaxanthin
Mẫu bột nano astaxanthin (mẫu A2) trước khi nghiên cứu đánh giá một số hoạt tính sinh học thì sản phẩm được khảo sát sơ bộ khả năng phân tán trong nước. Các mẫu bột astaxanthin và nano astaxanthin sau khi phân tán trong nước được lưu trữ ở nhiệt độ phịng. Sau đó quan sát hiện tượng dung dịch sau 01 ngày. Bảng 3.1 là kết quả tổng hợp quá trình khảo sát sự phân tán trong nước của astaxanthin tinh khiết và mẫu nano astaxanthin (mẫu A2).
Bảng 3.1. Kết quả đánh giá khả năng phân tán trong nước của astaxanthin
tinh khiết và mẫu nano astaxanthin
Mẫu Khả năng phân tán trong nước
Quan sát đáy lọ thủy tinh sau 01 ngày
Bột astaxanthin tinh khiết
Rất kém (gần như
không tan trong nước) Lắng Nano astaxanthin
(5% astaxanthin) Rất tốt
Rất trong, khơng có hiện tượng lắng
Astaxanthin Nano
Astaxanthin
Hình 3.4. So sánh khả năng phân tán trong nước của astaxanthin tinh khiết