STT Chỉ thị phân tử Khoảng cách di truyền (~cM)
1 LB3 2,1
2 TOM236 5,2
3 SSR69 7,3
4 SSR383 6,3
5 SCU602F3R3 3,1
4.3. KẾT QUẢ ỨNG DỤNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ LB3 XÁC ĐỊNH KIỂU
GEN Ph3 CỦA CÁC TỔ HỢP LAI CÀ CHUA MANG GEN Ph3
Sử dụng chỉ thị phân tử LB3 để xác định kiểu gen Ph3 quy định tính kháng bệnh sương mai trong các tổ hợp lai cà chua nghiên cứu. Thực hiện phản ứng PCR với 5 mẫu DNA của 5 giống/ tổ hợp lai, điện di sản phẩm PCR trên gel agarose 1,5%. Kết quả điện di được thể hiện ở hình 4.8.
M 1 2 3 4 5
Hình 4.8. Ảnh điện di chỉ thị LB3 của tổ hợp lai cà chua khảo nghiệm
(M-thang chuẩn 100bp, 1-V1, 2-V2, 3-V3, 4-V4, 5-V5)
Kết quả điện di hình 4.8 cho thấy: So với giống đối chứng V1 (Savior) không mang gen Ph3, trong số 5 tổ hợp lai được khảo sát chỉ có duy nhất 1 giếng điện di số 2 của tổ hợp lai V2 (08TP85-2-3-10-1-1-1-6-3 × (08TP76 × 08TP65)5- 3-7-3-3-1-1) chỉ xuất hiện một băng vạch duy nhất có kích thước 249 bp tương đương với băng vạch DNA mang gen kháng Ph3. Đây là tổ hợp lai mang gen
Ph3 đồng hợp tử. Điều này cũng phù hợp với thực tế bởi cặp bố mẹ của tổ hợp lai V2 là 08TP85-2-3-10-1-1-1-6-3 (Ph3/Ph3) và (08TP76 × 08TP65)5-3-7-3-3- 1-1 (Ph3/Ph3) đều mang gen Ph3 ở trạng thái đồng hợp tử. Bên cạnh đó, kết quả điện di của các tổ hợp lai còn lại bao gồm V3 (08TP85-2-3-10-1-1-1-7-2 ×
AVTO-9803-5), V4 (08TP85-2-3-5-1-1-1-10 × 11AV-10-3), V5 (08TP85-2-3-5- 1-6-2-4 × 08TP86B-4-5-8-6-5-1) đều xuất hiện hai băng vạch với kích thước lần lượt 249 bp và 482 bp, chứng tỏ 3 tổ hợp lai này đều mang gen Ph3 ở trạng thái dị hợp tử. Điều đó khẳng định tính chính xác của chỉ thị LB3 trong chọn tạo giống cà chua kháng bệnh sương mai.
Kết quả xác định kiểu gen Ph3 của các tổ hợp lai cà chua được thể hiện qua bảng 4.4.