Các chất kháng khuẩn sử dụng trong các sản phẩm vệ sinh răng miệng thường có thể tích lũy trên mảng bám răng. Trong nhiều trường hợp như fluor, nồng độ tích lũy đạt tới 0,5 mM [42]. Nồng độ này thừa đủ để ức chế sự sinh acid của vi khuẩn, vì thế nó có tác dụng lâu dài ngay cả khi các sản phẩm vệ sinh răng miệng không còn được sử dụng nữa. Đây cũng là một chỉ số quan trọng để đánh giá tác dụng của một chất kháng khuẩn sâu răng tiềm năng. Kết quả nghiên cứu của chúng tôi (Bảng 4) đã cho thấy -mangostin có khả năng tích lũy trên bio film tới nồng đô ̣ 4,5 g/biofilmsau 68 giờ nuôi cấy qua 5 lần xử lý ngắn trong 1 phút với -mangostin150 M.
Bảng 4.Khả năng tích lũy của α-mangostin trên biofilm của vi khuẩn S. mutans
Biofilm Diện tích peak -mangostin (g/biofilm)
150 M -mangostin 29206 ± 3612,628 4,536 ± 0,01
3.4.1. Bƣớ c đầu đánh giá tác du ̣ng ch ống sâu răng của dung dịch nƣớc súc miệng có chứa α-mangostin
Dựa trên những kết quả nghiên cứu thu được ,chúng tôi đã tiến hành thử nghiệm chế ta ̣o nước súc miê ̣ng có chứa -mangostin ở nồng đô ̣ 150 M kết hợp mô ̣t số chất hoa ̣t đô ̣ng bề mă ̣t khác , gồm các methol,tinh dầu bạc hà, NaF nhằm đánh giá khả năng ứng dụng của chất này làm nước súc miệng phòng chống sâu răng (Hình 3.14). Tác dụng của dung dịch nước súc miệng này đượ c đánh giá trên mô hình biofilm và so sánh với tác dụng của nước súc miệng Listerin thương mại về các chỉ tiêu : i) Khả năng ức chế sự sinh acid ; ii) khả năng ức chế sự hình thành
biofilm của S. mutans.
Hình 3.14. Chế phẩm nƣớc súc miê ̣ng chƣ́a α-mangostin tƣ̀ vỏ quả măng cụt
3.4.1.1. Khả năng ức chế sự sinh acid
Khả năng ức chế sự sinh a cid của vi khuẩn S. mutans được đánh giá thông qua viê ̣c xác đi ̣nh khả năng ức chế sự giảm pH môi trường của các tế bào S. mutans
trên biofilm đã được xử lý với các dung di ̣ch nước súc miê ̣ng (NSM). Kết quả trình bày ở bảng 5 cho thấy dung di ̣ch NSM ta ̣o đươ ̣c ức chế rõ rê ̣t sự sinh a cid của vi khuẩn S. mutans trên biofilm . Giá trị pH cuối cùng thu được với NSM
chứa -mangostin và Listerin lần lươ ̣t là 5,31 và 5,60, trong khi ở mẫu đối chứng (không xử lý NSM ) là 3,99. Như vâ ̣y, khả năng ức chế sự sinh a cid của S. mutans là gần tương đương với tác dụng của dung dịch NSM thương mại
Listerin.
Bảng 5.Khả năng ức chế sự sinh a cidcủa S. mutans trên biofilm củ a các dung di ̣ch nƣớc súc miê ̣ng
Mẫu nghiên cƣ́u Giá trị pH môi trƣờng (sau 240 phút)
Đối chứng 3,99
NSM 5,31
Listerin 5,60
3.4.1.2. Khả năng ức chế sự hình thành biofilm (mảng bám răng)
Nhằm tìm hiểu khả năng h ạn chế sự tạo mảng bám răng của dung di ̣ch NSM chứa -mangostintạo được trên mô hình biofilm nhân t ạo, chúng tôi đã tiến hành xử lý các biofilm của S. mutans vớ i các dung di ̣ch NSM , sau đó đo sinh khối các biofilm thu được sau 5 ngày nuôi cấy . Kết quả thu được ở bảng 6 cho thấy sinh khối biofi lm trung bình của các mẫu được xử lý với NSM chứa - mangostin và NSM Listerin giảm đi tới hơn 50% so với đối chứng . Trọng lượng sinh khối khô của mỗi biofilm lần lượt là 7,1 và 8,5 mg/biofilm so với đối chứng là 19,5 mg/biofilm. NSM chứa -mangostin dườ ng như có tác dụng ức chế sự hình thành sinh khối biofim rõ rệt hơn Listerin . Như vậy , NSM chứa - mangostin chế ta ̣o đươ ̣c có tiềm năng ức chế sự hình thành mảng bám răng .
Bảng 6. Ảnh hƣởng của NSM chứaα-mangostin lên sƣ̣ tích lũy sinh khối biofilm của vi khuẩn S. mutans.Số liệu sau dấu ± chỉ các giá trị độ lệch chuẩn SD với n=3. Biofilm được hình thành trên các lam kính thủy tinh (3 x 12 cm)
Mẫu xử lý Trọng lƣợng khô biofilm (mg/biofilm) Đối chứng NSM -mangostin NSM Listerin 19,5 2,80 7,1 1,10 8,5 0,81
Chƣơng 4. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ --- ---
1. Đã đưa ra được qui trình tinh sạchα-mangostin đơn giản t ừ vỏ quả măng cụt (Garcinia mangostanaL.) gồm 2 bướ c chính là : i) chiết phân đoạn với n - hexane và ii) sắc ký trên cột silica gel vớ i hê ̣ dung môi n-hexane : accetone theo tỉ lê ̣ 3:1). Chất thu được có đô ̣ sạch tương đương với chất chuẩn đa ̣t >83%.
2.α-mangostinở nồng độ 150 M ức chế quá trình sinh acid và sinh tổng hợp polysaccharide ngoa ̣i bào của S. mutans trên biofilm.
3. α-mangostin ở nồng độ 150 M ức chế hoa ̣t đô ̣ các enzyme liên quan trực tiếp đến quá trình sinh và chịu acid của vi khuẩn S. mutans trên màng tế bào làF-ATPase và phospho transferase system (PTS) với tỉ lệ ức chế đạt >70% và 50% theo thứ tự, và các enzyme liên quan đến quá trình sinh tổng hợp biofilm là GTFB (>83% ức chế) và GTFC (>72% ức chế).
4.α-mangostin có khả năng tích lũy trên biofilm với hàm lượng đạt 4,5 µg/biofilm.
5. Bướ c đầu đã chế ta ̣o và chứng minh đươ ̣c nước súc miê ̣ng có chứa - mangostin có tác dụng kháng vi khuẩn sâu răng S. mutans trên mô hình biofilm nhân ta ̣o .
ĐỀ NGHỊ
1. Cải tiến công thức để nâng cao hơn nữa hiệu quả của NSM chứa α- mangostin.
(adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});