2.4. Phân lập một số hợp chất trong cây xạ đen.
Từ cao ethyl acetate được chạy gradien, sắc kí cột trên silicagel pha thường với hệ giải li D/M thu được 6 phân đoạn ký hiệu từ Ed 1.1 đến Ed 1.6. Sau khi thu được 6 phân đoạn nhỏ đem tiến hành khảo sát trên sắc ký bản mỏng và tiến hành phân lập trên sắc ký cột.
MeOH Bột xạ đen khô
Ehretia asperula Zoll. & Mor
Ehretia asperula Zoll. & Mor
Cặn MeOH (320g)
Hòa tan với 2 lít nước Chiết với n-Hexane tỉ lệ 1:1
Cất loại dung môi
Cặn n-hexane Dịch chiết nước
Chiết với ethyl acetate tỉ lệ 1:1
Dịch chiết nước Cặn ethyl acetate
(34.47g) Cất loại dung môi
2.4.1. Phân lập hợp chất Ed 3.2 và Ed 5.5
Tiến hành sắc ký cột phân đoạn Ed 1.2 silicagel pha thường hệ dung môi D/M với tỉ lệ 5/1 thu được 3 phân đoạn nhỏ Ed 2.1; Ed 2.2; Ed 2.3. Sử dụng cột YMC cho phân đoạn Ed 2.3 với hệ dung môi là M/W tỉ lệ 1/2 thu được 37,5mg chất sạch Ed 2.3. Từ phân đoạn Ed 2.1(488mg) chạy sắc ký cột silicagel pha thường hệ dung môi H/D/M tỉ lệ 5/15/1 thu được phân đoạn Ed 2.4 (80mg). Do phân đoạn Ed 2.4 vẫn còn nhiều vết nên lại tiếp tục chạy sắc ký cột silicagel pha thường hệ dung môi D/A tỉ lệ 5/1 thu được 17mg Ed 5.1, quan sát trên sắc ký bản mỏng pha đảo thấy Ed 5.1 vẫn còn nhiều vết chất cho nên lại tiến hành chạy sắc ký cột silicagel pha đảo (YMC) với hệ dung môi MeOH/H2O tỉ lệ 1/1,5 thu được 7mg chất sạch Ed 5.5.
Quá trình phân lập hợp chất Ed 3.2 và Ed 5.5 được tiến hành qua sơ đồ