CHƯƠNG 2 : THỰC NGHIỆM
2.3. Chiết phân đoạn
Sử dụng phương pháp ngâm dầm, trích kiệt bằng methanol để chiết các hợp chất ra khỏi lá xạ đen, qua trình cụ thể được thực hiện như sau:
Lá xạ đen đem phơi khô sau đó nghiền nhỏ thành bột (5,8kg), tiến hành ngâm bột xạ đen trong bình thủy tinh với dung dịch methanol trong vòng 3 ngày, sau đó lọc loại bỏ cặn, dịch chiết đem cất loại dung môi thu được cao tổng MeOH, quá trình này lập lại thêm 3 lần để lấy tối ưu lượng chất có trong lá xạ đen. Từ cao tổng MeOH tiến hành chiết phân đoạn với các hai loại dung môi là n-Hexane và ethyl acetate, quá trình được thực hiện cụ thể như sau. Hòa tan cao MeOH với hai lít nước chia đều vào 2 bình chiết có thể tích 2 lít sau đó bổ sung thêm vào mỗi bình chiết 1 lít n- Hexane lắc đều trong 15-20 phút rồi để cho hai dung dịch tách thành 2 lớp, sau khi tách thành 2 lớp tiến hành chiết lấy phần n-Hexane cất loại dung môi thu được cao n-Hexane, quá trình này được thực hiện liên tiếp 3 lần. Sau khi chiết lấy phần n-Hexane thì phần hỗn hợp nước lại tiếp tục được bổ sung thêm 2 lít EtOAc và cũng lắc đều trong 15-20 phút, quá trình chiết với EtOAc có khả năng tạo nhũ cao hơn so với n-Hexane cho nên thời gian tách lớp của chúng cũng lâu hơn. Sau khi tách lớp đem chiết lấy phần dịch EtOAc, cất loại dung môi thu được cao EtOAc. Cũng như với quá trình làm với dung dịch n-Hexane thì quá trình này cũng thực hiện chiết liên tiếp 3 lần, tổng lượng cao thu được là 34,47g. Dưới đây là sơ đồ chiết phân đoạn lá xạ đen:
Hình 2.3. Sơ đồ chiết phân đoạn, phân lập cao xạ đen