2. Đối t−ợng
2.4.8. Kỹ thuật làm các xét nghiệm đông máu
Mẫu nghiệm là 5ml máu tĩnh mạch, lấy vào ống nhựa có chống đông natri citrate 3,8% tỷ lệ 1/10, để lắng, lấy huyết t−ơng làm các xét nghiệm: thời gian Howell, tỷ lệ phức hệ prothrombin, APTT, nghiệm pháp Ethanol, nghiệm pháp tiêu euglobulin, bán định l−ợng FDP.
3-4ml máu tĩnh mạch, lấy vào 2 ống nghiệm không chống đông đ−ợc tráng NaCl 0,9% để làm các xét nghiệm thời gian máu đông và co cục máu đông.
1.5ml máu có chống đông để làm xét nghiệm sợi huyết theo ph−ơng pháp biure tại Phòng xét nghiệm sinh hoá Bệnh viện Bạch Mai.
+ Thời gian máu chảy: ph−ơng pháp Duke
+ Thời gian máu đông: ph−ơng pháp Lee - White + Đếm số l−ợng tiểu cầu: Bằng máy đếm tế bào + Co cụ máu đông:
- Sử dụng 2 ống máu khi làm thời gian máu đông, để trong thùng cách thuỷ 370C, theo dõi hiện t−ợng co cục máu.
- Kết quả đọc sau 2 giờ: cục máu không co, co không hoàn toàn, co hoàn toàn, cục đông tan.
+ Thời gian Howell hay thời gian phục hồi canxi của huyết t−ơng giàu tiểu cầu.
* Đánh giá đông máu tổng quát theo con đ−ờng nội sinh.
* Kỹ thuật thực hiện theo quy trình hiện đang áp dụng tại phòng xét nghiệm đông máu Viên HHTM.
* Đánh giá kết quả: bình th−ờng đông sau 1'30" - 2'15" + Tỷ lệ phức hệ prothrombin
* Đánh giá các yếu tố theo đ−ờng ngoại sinh II, VII, IX, X.
* Kỹ thuật thực hiện theo quy trình hiện đang áp dụng tại Phòng xét nghiệm đông máu - Viện HHTM.
* Đánh giá kết quả: Kết quả đọc trên bảng kết quả mẫu, chênh lệch cho phép giữa các ống của cùng bệnh nhân là 0,5-1 giây. Tỷ lệ phức hệ prothrombin bình th−ờng khi ≥ 70%.
+ Thời gian prothrombin từng phần hoạt hoá (APTT).
* Đánh giá con đ−ờng đông máu nội sinh, loại bỏ phụ thuộc vào tiểu cầu bằng cách cho thêm cephalin (đóng vai trò nh− yếu tố 3 tiểu cầu) và kaolin (thống nhất hoạt độ) vào thuốc thử.
* Kỹ thuật thực hiện theo quy trình hiện đang áp dụng tại Phòng xét nghiệm đông máu - Viện HHTM.
* Đánh giá kết quả:
- Kết quả chênh lệch cho phép giữa các ống của cùng bệnh nhân là 1 giây. - Khi kết quả kéo dài hơn > 15% so với chứng thì đ−ợc gọi là bệnh lý. + Nghiệm pháp Ethanol
* Chứng minh sự có mặt của các phức hệ hoà tan trong đông máu nội mạch rải rác.
* Đánh giá kết quả:
Nếu có sự hình thành gel hoặc đông là kết quả d−ơng tính. Nếu không có tủa vẫn trong là âm tính.
+ Nghiệm pháp tiêu euglobulin
* Toan hoá huyết t−ơng để tách euglobulin, loại bỏ tất cả các thành phần ức chế tiêu cục đông sau đó cho euglobulin trở lại, theo dõi quá trình tiêu euglobulin để đánh giá hệ thống hoạt hoá plasminogen.
* Kỹ thuật thực hiện theo quy trình hiện đang áp dụng tại Phòng xét nghiệm đông máu - Viện HHTM.
* Đánh giá kết quả:
- Tan hoàn toàn: tr−ớc 15 phút - Tiêu sợi huyết tối cấp 15 - 30 phút - Tiêu sợi huyết nặng 30 - 45 phút - Tiêu sợi huyết vừa 45 - 60 phút - Tiêu sợi huyết nhẹ > 60 phút - Bình th−ờng
+ Bán định l−ợng FDP
* Chứng minh sự có mặt của các sản phẩm thoái giáng fibrinogen và fibrin trong huyết t−ơng.
* Thuốc thử: Dùng thuốc thử theo nguyên lý ng−ng kết latex của hãng Biomérieur.