CHƯƠNG 2 NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.4.QUÁ TRÌNH CHIẾT SOXHLET HẠT CHÙM NGÂY
2.4.1. Tách dầu từ hạt chùm ngây
Cân khoảng 10g hạt chùm ngây xay thành bột đã được xử lý cho vào túi vải (lưu ý túi vải màu trắng có độ co dãn, khơng làm thất thốt mẫu, phải được giặt sạch và nấu trong nước cất khoảng 1h-2h), sau đó cho vào bộ chiết soxhlet 250ml. Cho vào bộ chiết soxhlet 100ml thể tích dung mơi n-hexan. Sau khi chiết trong 8h lấy bã ra và để khô trong 24 giờ và chuẩn bị cho tách lấy protein.
2.4.2. Tách protein từ bã đã tách dầu
Tiến hành lần lượt các nghiên cứu ảnh hưởng của các yếu tố đến quá trình tách như sau
a. Ảnh hưởng của tỉ lệ bã trên thể tích nước
Điều kiện tiến hành: thể tích nước = 100 ml, thời gian tách: 60 phút,
khuấy mạnh ở nhiệt độ phòng, khối lượng bã thay đổi: 1g; 2g; 3g; 4g; 5g. Lọc để tách chất rắn. Sau khi tách thì cơ cạn để tính lượng rắn thu được.
Chọn điều kiện tỷ lệ khối lượng bã/100 ml H2O tốt nhất để tiến hành các thí nghiệm tiếp theo.
b. Nghiên cứu ảnh hưởng của thời gian chiết tách
mạnh ở nhiệt độ phòng.
Thay đổi thời gian chiết tách: 30 phút, 60 phút, 90 phút, 120 phút, 150 phút, 180 phút.
Sau khi tách thì cơ cạn, cân khối lượng rắn trên cân phân tích từ đó tìm ra nhiệt độ tối ưu.
c. Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ NaCl đến khả năng chiết tách protein từ bã chùm ngây
Điều kiện tiến hành: Sau khi khảo sát tỉ lệ bã trên thể tích NaCl và thời
gian chiết tách ta tiến hành khảo sát ảnh hưởng của nồng độ của NaCl đến khả năng chiết tách. Thể tích NaCl = 100 ml, khối lượng: tối ưu, khuấy mạnh, thời gian chiết tách: tối ưu, nồng độ NaCl thay đổi: 0,0; 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1 mol/L. Sau khi khuấy xong ta tách và cô cạn, cân khối lượng rắn trên cân phân tích sau đó tìm ra nồng độ tối ưu.
d. Nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ đến khả năng chiết tách
protein từ bã chùm ngây
Điều kiện tiến hành: thể tích NaCl = 100 ml, khối lượng: tối ưu, thời gian chiết tách: tối ưu, nồng độ NaCl: tối ưu, nhiệt độ thay đổi: 40, 50, 60, 70, 80 (oC). Tiến hành khuấy trong các điều kiện chiết tách tối ưu đã khảo sát ở trên. Sau khi lọc thu được lượng rắn, cô cạn và cân khối lượng rắn từ đó tìm ra nhiệt độ tối ưu.
Sau khi có các điều kiện tối ưu ta tiến hành khuấy bã chùm ngây đã qua chiết soxhlet trong điều kiện đó. Tiếp theo tiến hành lọc huyền phù sau khi khuấy trộn qua giấy lọc, dịch lọc được đựng trong các bình tam giác có kí hiệu sẵn.