C c nghiên cứu hoạt tính sinh học dựa trên thành phần hóa học cho thấy c c dịch chiết có hoạt tính chống oxi hóa rất cao. Trong dịch chiết metanol của cây bồ công anh, khối lƣợng cao chiết theo tính toán trong dịch chiết metanol cũng lớn nhất (cao tổng) so với các dung môi còn lại. Chính vì vậy, t c giả lấy cao
chiết metanol của cây bồ công anh để thử hoạt tính chống oxi hóa, kiểm định tại Viện Hóa học các hợp chất thiên nhiên - Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam. Kết quả đƣợc nêu trong Bảng 3.9 và Bảng 3.10. Dịch chiết metanol của cây bồ công anh đƣợc thử nghiệm hoạt tính - sàng lọc hoạt tính ức chế sản sinh nitric oxide (NO) trên tế bào RAW264.7 và hoạt tính gây độc tế bào ung thƣ gan Hep3B.
Bảng 3.9. Kết quả sàng lọc oạt t n ức chế sản sinh nitric oxide (NO) trên tế bào RAW264.7 của mẫu
Tên mẫu Nồng độ % Ức chế Sai số % Tế bào sống Sai số
Control 100.00 0.17 103.08 1.36 LPS 0.00 0.50 100.00 1.00 BCA 30 µg/mL 39.23 1.75 93.90 1.15 100 µg/mL 69.45 1.27 86.64 1.18 Cardamonin * 0.3 µM 34.08 0.34 93.93 1.32 3 µM 87.78 0.77 86.25 0.59
* Cardamonin: đƣợc sử dụng làm chất chuẩn dƣơng
Nhận xét:
Kết quả Bảng 3.9 cho thấy trong mẫu cao chiết bồ công anh có:
- Hoạt tính ức chế sự sản sinh NO tốt ở nồng độ thử nghiệm 100µg/mL. - Không gây độc cho tế bào.
Bảng 3.10. Kết quả sàng lọc hoạt t n ây độc tế bào ung t ư an Hep3B của mẫu
Mẫu N.độ (µg/mL) TB sống sót (CS%) Hep3B % TB sống Sai số Control 100.00 2.73 BCA 30 75.40 0.25 100 62.62 2.31 Camptothecin* 0.1 73.79 0.34 10 39.40 2.21 *Camptothecin: đƣợc sử dụng làm chất chuẩn Nhận xét:
Kết quả Bảng 3.10 cho thấy ở 2 nồng độ thử nghiệm 30 µg/mL và 100 µg/mL, mẫu cao chiết bồ công anh có khả năng gây độc tế bào ung thƣ gan Hep3B ở mức độ trung bình.
Kết luận:
Ở nồng độ 100µg/mL, mẫu cao chiết bồ công anh biểu hiện khả năng ức chế sự sản sinh NO tốt (69.45 ± 1.27) và khả năng gây độc tế bào ung thƣ gan ngƣời Hep3B ở mức độ trung bình.
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN
Trong quá trình nghiên cứu, đề tài đã đạt đƣợc c c kết quả nhƣ sau: 1. Đã x c định đƣợc c c chỉ số hóa lý
Trong cây bồ công anh: Độ ẩm là 7.197%, hàm lƣợng tro 4.955% và hàm lƣợng kim loại nặng Cu, Cd, Pb, Hg, As đều nằm trong khoảng cho phép theo tiêu chuẩn Dƣợc liệu Việt Nam.
2. Đã định danh đƣợc thành phần hóa học trong c c dịch chiết n-hexan, diclometan và etyl axetat của cây bồ công anh đƣợc thu h i tại Đà Nẵng bằng phƣơng ph p sắc kí khí ghép khối phổ. Cụ thể là đã x c định đƣợc 23 cấu tử trong 3 dịch chiết. Trong đó, dịch chiết n-hexan x c định đƣợc nhiều cấu tử nhất với 15 cấu tử. Trong số các cấu tử x c định đƣợc trong các dịch chiết thì có 2 cấu tử trùng lặp trong 2 dung môi DCM và EtOAc là Decane, 5,6- bis (2,2- dimethylpropylidence) và 1-Allyl-1-but-3-enyl-1-silacyclobutane nhƣng kh c nhau về hàm lƣợng.
3. Đã phân lập đƣợc 1 chất là Glycerol 1- palmitate. Đây là một chất có khả năng có phản ứng trao đổi chất đối với chất gây độc cho gan và chất gây ung thƣ. Việc tìm ra Glycerol 1-palmitate đã giải thích khả năng chữa bệnh của bồ công anh về cải thiện, tăng cƣờng chức năng gan mật, giúp chuyển hóa các chất béo trong gan, giải độc gan. Bên cạnh đó, bồ công anh còn có chứa các thuộc tính có thể tiêu diệt các tế bào ung thƣ, điều này đã giải thích đƣợc nguyên nhân bồ công anh có ảnh hƣởng lớn trên các tế bào ác tính và có khả năng kh ng hóa trị liệu mà không làm tổn hại đến các tế bào khỏe mạnh.
Glycerol-1-palmitate còn đƣợc tìm thấy trong chất béo và dầu; Glycerol-1- palmitate có thể đƣợc sử dụng nhƣ một chất để x c định và phân biệt các enzym thủy phân. Ngoài ra, Glycerol-1-palmitate có thể đƣợc sử dụng ở nồng độ lên đến 12% trong c c sản phẩm mỹ phẩm.
4. Đã thử hoạt tính sinh học của cao chiết
Kết quả thử nghiệm ở nồng độ 100µg/mL, mẫu cao chiết bồ công anh biểu hiện khả năng ức chế sự sản sinh NO tốt (69.45 ± 1.27) và khả năng gây độc tế bào ung thƣ gan ngƣời Hep3B ở mức độ trung bình.
KIẾN NGHỊ
Tiếp tục phân lập x c định cấu trúc các hợp chất có trong c c dịch chiết và thử hoạt tính sinh học, đặc biệt là khả năng kh ng khuẩn, kh ng ung thƣ của c c hợp chất phân lập đƣợc nhằm góp phần làm tăng gi trị sử dụng cũng nhƣ chữa bệnh của cây bồ công anh.
DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO
Tiếng Việt
[1] Nguyễn Thị Dân An (2015), Khảo sát thành phần hóa học và hoạt tính chống oxi hóa của cao hexan lá bình bát dây coccinia grandis (L.)
J.Voight họ Cucurrbitaceae, Khóa luận tốt nghiệp, Trƣờng Đại học Sƣ
phạm Thành phố Hồ Chí Minh.
[2] Huỳnh Ngọc Bích (2014), Nghiên cứu phân lập, xác định cấu trúc của axit hydroxycitric và các muối hydroxycitrat, Luận văn thạc sĩ khoa học chuyên ngành hóa hữu cơ, khoa Hóa,Trƣờng Đại học Sƣ phạm – Đại học Đà Nẵng.
[3] Hoàng Minh Châu, Từ Văn Mặc, Từ Vọng Nghi (2002), Cơ sở oá ọc p ân tích, Nhà xuất bản Khoa học và kỹ thuật, Hà Nội. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
[4] Nguyễn Văn Đàn (2005), C uy n đ một số ợp c ất t n n n, NXB Đại học Quốc gia TP. Hồ Chí Minh.
[5] Phạm Công Đoàn, Nguyễn Ngọc Hạnh, Phùng Văn Trung và Phan Nhật Minh (2008), “Kết quả bƣớc đầu khảo s t thành phầnhóa học cây bồ công anh(Taraxacum OfficinaleWigg)”, Tạp c K oa ọc (2008) - Trườn Đạ ọc Cần T ơ, tr. 227-231.
[6] Hội đồng Dƣợc điển Việt Nam (2009), Dược đ n V ệt Nam IV, Nhà xuất bản Y học, Hà Nội.
[7] Cao Hoàng (2009), N n cứu p ân lập, xác địn cấu trúcvà k ảo sát oạt t n s n ọc của các ợp c ất p enol c từ cây Alp n a p nnanens s
T.L.Wuet senjen, Luận văn thạc sĩ khoa học chuyên ngành hóa hữu cơ,
khoa Hóa,Trƣờng Đại học Khoa học Tự Nhiên – Đại học Quốc gia Hà Nội.
[7] Lê Khả Kế, Vũ Văn Chuyên, Võ Văn Chi và c c cộng sự (1975), Cây cỏ
t ườn t ấy ở V ệt Nam, tập V, NXB Khoa học và Kỹ thuật Hà Nội,
[8] Phan Quốc Kinh (2011), Giáo trình các hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học, Nhà xuất bản Giáo dục Việt Nam.
[9] Phạm Thị Lê (2008), Nghiên cứu chiết tác , xác định thành phần hóa học trong một số dịch chiết của cây bòng bong (L.Flexuosum và L.Japonicum) ở Đ ện Bàn, Luận văn thạc sĩ khoa học, Đại học Đà Nẵng.
[10] Đỗ Tất Lợi (2004), N ữn cây t uốc và vị t uốc V ệt Nam, NXB Khoa học kỹ thuật Hà Nội.
[11] Nguyễn Kim Phi Phụng (2007), P ươn p áp cô lập hợp chất hữu cơ, Nhà xuất bản Đại học Quốc Gia TPHCM, TPHCM.
[12] Hồ Viết Quý (2005), Các p ươn p áp p ân t c côn c tron óa ọc ện đạ , NXB Đại học Sƣ phạm.
[13] Lê Thanh Tâm (2010), Nghiên cứu hoạt tính chốn ox óa và độc tính tế bào của một số hợp chất lignan và stilbene, Luận văn thạc sĩ khoa học chuyên ngành Hóa phân tích, trƣờng Đại học Khoa học tự nhiên, Đại học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh.
[14] Hoàng Châu Thanh Thảo(2016),Nghiên cứu chiết tác và xác định thành phần hóa học trong một sốdịch chiết của lá cây rẻ quạt, Luận văn thạc sĩ khoa học chuyên ngành hóa hữu cơ, khoa Hóa,Trƣờng Đại học Sƣ phạm – Đại học Đà Nẵng.
[15] Võ Thị Thanh Thủy (2016), N n cứu c ết tác , xác định thành phần hóa học trong tinh dầu và một số dịch chiết của cây ngò om, Luận văn thạc sĩ khoa học chuyên ngành hóa hữu cơ, khoa Hóa,Trƣờng Đại học Sƣ phạm – Đại học Đà Nẵng.
[16] Nguyễn Đình Triệu (2005), Các p ươn p áp p ân t c vật lý và óa lý,
NXB Khoa học Kĩ thuật Hà Nội.
[17] Bùi Quang Tuấn (2015), Nghiên cứu chiết tác và xác định thành phần hóa học của một số dịch chiết thân, rễ cây sốn đời ở Quảng Ngãi, Luận văn thạc sĩ khoa học chuyên ngành hóa hữu cơ, khoa Hóa,Trƣờng Đại học Sƣ phạm – Đại học Đà Nẵng.
[18] Nguyễn Trƣơng Thiện Vũ (2017), Nghiên cứu chiết tác và xác định thành phần hóa học trong một số dịch chiết rễ, lá cây bồ công anh ở Đà Nẵng, Luận văn thạc sĩ khoa học chuyên ngành hóa hữu cơ, khoa Hóa,Trƣờng Đại học Sƣ phạm – Đại học Đà Nẵng.
[19] Bùi Xuân Vững (2013), Giáo trình Phân tích công c , Tài liệu dùng cho cao học, Khoa Hóa, Trƣờng Đại học Đà Nẵng.
Tiếng Anh
[20] Adbul Kadir M. N. Jassim, Safanah Ahmed Farhan (2012), “Identification of Dandelion Taraxacum officinale Leaves Components and Study Its Extracts Effect on Different Microorgannisms”, Journal of Al-Nahrain University, pp. 7-14.
[21] Belén García-Carrasco, Raquel Fernandez-Dacosta, Alberto Dávalos, José M. Ordovás and Arantxa Rodriguez-Casado (2015), “In vitro Hypolipidemic and Antioxidant Effects of Leaf and RootExtracts of Taraxacum Officinale”, Medical sciences.
[22] Brand-Williams, W., Cuvelier, M. E. and Berset C. (1995), Use of a Free Radical Method to Evaluate Antioxidant Activity, Lebensm.-Wiss. u.- Technol.
[23] Chau Van Minh, Phan Van Kiem, Le Mai Huong, Young Ho Kim (2004),
“Cytotoxic constituents of diadema setosum”, Archives of Pharmacal ResearchVolume 27, pp. 734 - 737.
[24] Dirsch, V.M., H. Stuppner, and A.M. Vollmar (1998), “The Griess assay: suitable for a bio-guided fractionation of anti-inflammatory plant extracts”, Planta Med, 64(5), pp. 423-6.
[25] Hatziieremia (2006), “The effects of cardamonin on lipopolysaccharide- induced inflammatory protein production and MAP kinase and NFκB signalling pathways in monocytes/macrophages”, British Journal of Pharmacology, 149(2), pp. 188-198.
[26] Jeong-Hun Park, Jeoung-Hwa Shin, Swapan Kumar Roy & Hyeon-Yong Park (2014), “Evaluation of Cytotoxicity, Total Phenolic Content and Antioxidant Innate Reveal Efficient Medications in Native Lactuca indica”, Journal of Agricultural Science; Vol. 6, No. 10, pp. 135-146. [27] Kais Kassim Ghaima*, Noor Makie Hashim, Safaa Abdalrasool Ali (2013), (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
“Antibacterial and antioxidant activities of ethyl acetate extract of nettle (Urtica dioica) and dandelion (Taraxacum officinale)”, Journal of Applied Pharmaceutical Science Vol. 3 (05), pp. 096-099.
[28] Ken’ichi Ichihara and Yumeto Fukubayashi (2010), “Preparation of fatty acid methyl esters for gas-liquid chromatography”, Journal of Lipid Research Volume 51, pp. 635-637.
[29] Ki Hyun Kim, Young Ho Kim, and Kang Ro Lee (2010), “Isolation of Hepatoprotective Phenylpropanoid from Lactuca indica”
Natural Product Sciences 16, pp. 6-9.
[30] Nathan (1992), “Nitric oxide as a secretory product of mammalian cells”,
Faseb j, 6(12), pp. 3051-64.
[31] Mosmann, Tim (1983). "Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays". Journal of Immunological Methods, 65 (1-2), pp. 55–63.
[32] Serdarevich B, Carroll KK (1966), “Synthesis and characterization of 1- and 2-monoglycerides of anteiso fatty acids”, Journal of Lipid Research Volume 7, pp. 277-284.
[33] Soon Ng (2000), “Quantitative analysis of partial acylglycerols and free fatty acids in palm oil by 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy”, Journal of the American Oil Chemists' Society, pp. 749–755.
[34] Zongxi Sun, Ruiqiang Su, Jianwei Qiao, Zhiquan Zhao, and Xinsheng Wang (2014), “Flavonoids Extraction from Taraxacum officinale(Dandelion): Optimisation Using Response SurfaceMethodology and Antioxidant Activity”, Hindawi Publishing Corporation Journal of Chemistry Volume 2014.
Websites [35] http://www.cayboconganh.vn/tin-tuc/gioi-thieu-cay-bo-cong-anh-vietnam- 39.html [36] https://www.cayboconganh.vn/tin-tuc/re-cay-bo-cong-anh-duoc-nhat-ban- nghien-cuu-tu-nam-1999-44.html [37] https://www.caythaoduoc.com/tin-tuc/lieu-re-cay-bo-cong-anh-co-the-pha- huy-te-bao-ung-thu-trong-48h-11.html [38] http://duocson.com/120n/bai-thuoc-tu-cay-bo-cong-anh-viet-nam.html [39] http://tuoitre.vn/tin/song-khoe/20091224/ich-loi-cua-bo-cong- anh/354865.html [40] https://en.wikipedia.org/wiki/Hydroxymethylfurfural [41] https://en.wikipedia.org/wiki/Syringol [42] https://en.wikipedia.org/wiki/Stearic_acid [43] https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/2_3- dihydroxypropyl_hexadecanoate#section=Top [44] https://vi.wikipedia.org/wiki/H%E1%BB%8D_C%C3%BAc [45] http://yhocbandia.vn/duoc-chat-steroid-thao-duoc.html [46] https://www.tandfonline.com/doi/abs/10.1080/00139307509435829 [47] https://www.trc-canada.com/product-detail/?CatNum=P157250