Song song với thử nghiệm kiểm tra khả năng sử dụng các loại đường, chúng tôi tiến hành thử nghiệm kiểm tra khả năng sử dụng lysin của các chúng vi khuẩn để khẳng định các chúng vi khuẩn phân lập được có phải là Salmonella hay không. Các chủng vi khuẩn này được nuôi cấy ở 37oC trong môi trường cơ bản chứa 5% lysin. Khả năng sử dụng lysin được đánh giá qua sự đổi màu của môi trường nuôi. Nếu các chủng vi khuẩn có sản sinh decarboxylase thì enzyme này sẽ xúc tác cắt bỏ nhóm carboxyl (-COOH), giải phóng CO2, làm thay đổi màu môi trường chứa chỉ thị phenol đỏ. Từ Hình 3.6 và Bảng 3.3 cho thấy sau 24 giờ, 48 giờ và 72 giờ nuôi cấy trong 8 chủng làm thí nghiệm có 5 chủng là S1, S2, S3, S4, S5
làm thay đổi màu của môi trường và 3 chủng S8, S11, S12 không làm thay đổi màu của môi trường.
Đối với các chủng S8, S11 và S12 đặc điểm khuẩn lạc và các đặc tính sinh hóa đã kiểm tra đều cho kết quả giống với loài Salmonella nhưng khi kiểm tra khả năng sử dụng lysin thì trái ngược. Không chỉ vì chúng không sử dụng lysin mà có thể kết luận ngay rằng chúng không thuộc phải là Salmonella, có thể các quá trình chuyển hóa các chất trong tế bào đã bị thiếu hụt hay bị khuyết con đường chuyển hóa lysin. Để xác nhận chính xác chúng tôi tiếp tục nuôi cấy, tách DNA và khuếch đại đoạn gen invA.
GVHD: TS. Phạm Thu Thủy SVTH: Võ Thị Hà
Hình 3.6. Khả năng sử dụng lysin của các chủng vi khuẩn
( 1 – S1, 2 – S2, 3 – S3, 4 – S4, 5 – S5, 6 – Đối chứng âm)
Bảng 3.3. Kết quả kiểm tra khả năng sử dụng lysin của các chủng vi khuẩn
Salmonella
Tên chủng vi khuẩn S1 S2 S3 S4 S5 S8 S11 S12
Kết quả kiểm tra khả năng sử dụng lysin
+ + + + + - - -