CHƢƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.4. Xác định môi trƣờng nâng cao chất lƣợng chồi cho Keo lai
BV586 (HSNC đạt 4,8) tuy nhiên chiều cao chồi thu lại chỉ đạt 3,5 cm (trong khi chỉ số này đạt 3,6cm khi nuôi cấy trong môi trƣờng bổ sung BAP nồng độ 1,5mg/l). Do đó, môi trƣờng MS2 có bổ sung BAP nồng độ 1,5mg/l đƣợc chọn làm môi trƣờng nuôi cấy chung cho cả 3 dòng Keo lai nghiên cứu. Kết quả này cũng tƣơng tự nhƣ trong các nghiên cứu trƣớc đây về nhân giống các dòng Keo lai, Keo lá tràm mới đƣợc chọn lọc [4, 46, 47,48] chính tỏ với Keo lai nói chung môi trƣờng có bổ sung BAP nồng độ 1,5mg/l hoặc 2 mg/l là tƣơng đối phù hợp cho quá trình nhân chồi.
Hình 3.3. Các cụm chồi Keo lai được nuôi cấy trong các công thức môi trường nhân chồi khác nhau
3.4. XÁC ĐỊNH MÔI TRƢỜNG NÂNG CAO CHẤT LƢỢNG CHỒI CHO KEO LAI KEO LAI
Đối với Keo lai nói chung và Keo lai nói riêng, để chuẩn bị cho quá trình ra rễ cần phải nâng cao chất lƣợng chồi. Mục đích của giai đoạn này là tăng số lƣợng chồi có đủ tiêu chuẩn cho quá trình ra rễ, thông thƣờng môi trƣờng nuôi cấy sẽ đƣợc bổ sung thêm auxin ở các nồng độ khác nhau tuỳ thuộc vào đối tƣợng nghiên cứu.
Trong nhóm Auxin, NAA thƣờng đƣợc bổ sung thêm vào môi trƣờng nuôi cấy để tăng chất lƣợng chồi thu đƣợc đặc biệt cho Keo lai tự nhiên [1]. NAA có tác dụng làm tăng khả năng hô hấp của mô, tăng hoạt tính Enzim và ảnh hƣởng mạnh đến trao đổi Nitơ (N) và tiếp nhận các-bon trong môi trƣờng. Ở nồng độ thích hợp. NAA còn có vai trò kích thích sinh trƣởng tế bào và kích thích tạo rễ.
Môi trƣờng MS2 có bổ sung BAP nồng độ 1,5mg/l đã đƣợc xác định cho quá trình nhân nhanh số lƣợng chồi cho Keo lai. Tuy nhiên, khi sử dụng môi trƣờng này, tỷ lệ chồi hữu hiệu thu đƣợc cho quá trình ra rễ là chƣa cao, do đó để nâng cao chất lƣợng các chồi tạo đƣợc chuẩn bị cho ra rễ môi trƣờng này còn đƣợc bổ sung thêm NAA ở các nồng độ 0,25; 0,5; 0,75; 1,0; 1,25 và 1,5 gm/l. Số liệu thu thập sau 30 ngày nuôi cấy đƣợc trình bày tại Bảng 3.
Bảng 3.5. Ảnh hưởng của tổ hợp BAP và NAA tới khả năng tạo cụm chồi Keo lai sau 25 ngày nuôi cấy
MS2 + BAP 1,5mg/l + NAA (mg/l) Ký hiệu Dòng BV376 Dòng BV586 Dòng BB055 HSNC Chiều dài chồi (cm) HSNC Chiều dài chồi (cm) HSNC Chiều dài chồi (cm) 0,25 N1 3,8±1,2 4,1±1,1 4,7±1,4 4,2±1,2 4,5±2,1 4,5±1,3 0,5 N2 5,5±2,3 5,8±1,9 5,1±2,1 5,2±1,5 4,9±1,2 5,5±1,4 0,75 N3 5,3±2,5 5,6±1,8 4,7±1,3 4,8±1,1 4,7±1,3 5,2±1,5 1,0 N4 4,7±2,2 4,4±2,5 4,4±1,7 4,7±1,4 4,2±1,6 4,9±2,1 1,25 N5 4,5±1,4 4,2±1,9 4,3±1,3 4,2±1,1 6,1±2,1 4,6±1,6 1,5 N6 4,8±1,7 3,9±1,2 4,0±1,2 4,1±1,5 5,8±1,6 4,3±1,7 0 ĐC 4,5±1,3 3,9±1,3 4,6±1,4 3,6±1,2 4,4±1,3 4,4±1,2 Ftính=6,81 > Ftra bảng = 3,67 /t/=2,76>t0,5 = 1,96
Kết quả thí nghiệm cho thấy, khi bổ sung thêm NAA vào môi trƣờng nuôi cấy không chỉ có chỉ tiêu hệ số nhân chồi thu đƣợc cao hơn so với khi sử dụng BAP riêng lẻ mà chất lƣợng các chồi thu đƣợc (số đốt lá, màu sắc và hình thái chồi) cũng nhƣ chiều cao chồi cũng tăng lên đáng kể (Bảng 3.5).
Công thức môi trƣờng MS1* + BAP 1,5mg/l + NAA 0,5mg/l cho hệ số nhân chồi chỉ từ 4,9 đến 5,8 tuỳ thuộc vào từng đối tƣợng nghiên cứu đồng thời số chồi thu đƣợc có chất lƣợng tốt, tƣơng đối đồng đều (thể hiện ở mức độ sai dị thấp hơn so với công thức đối chứng), số chồi có chiều cao từ 3cm trở nên đạt khoảng 60% của tổng số chồi thu đƣợc, có nghĩa là cứ 10 chồi tạo đƣợc thì có trung bình 6 chồi đủ chất lƣợng cho quá trình ra rễ. Nếu trong môi trƣờng không bổ sung NAA số chồi đủ chất lƣợng cho quá trình ra rễ chỉ đạt 30 đến 40%, thì rõ ràng việc bổ sung này có ý nghĩa rất lớn cho quá trình nhân nhanh cuả các dòng Keo lai thí nghiệm.
Hình 3.4. Các chồi Keo lai dòng BV568 sau 25 ngày nuôi cấy trong các công thức thí nghiệm khác nhau.