Đây là giai đoạn chuyển dần cây con trong ống nghiệm ra nhà kính rồi ra ngoài trời. Cây mô đƣợc chuyển từ môi trƣờng dị dƣỡng sang môi trƣờng tự dƣỡng, nên phải tập cho cây quen dần với môi trƣờng tự nhiên, tránh sự thay đổi đột ngột làm cây có thể bị sốc hoặc chết. Khi cây con đã cứng cáp và đạt những tiêu chuẩn nhất định về chiều cao, số lá và số rễ thì đƣa ra ngoài giá thể. Giá thể tiếp nhận cây in vitro phải đảm bảo tơi, xốp, thoáng nƣớc và sạch bệnh. Phải giữ ẩm cho cây mới đƣa từ bình nuôi ra, cần duy trì độ ẩm >50% để cây con không mất nƣớc và làm giàn che để tránh ánh sáng quá mạnh. Sau 2-3 ngày đƣa ra ngoài cây mô sẽ sinh trƣởng ổn định, chăm sóc cây mô tƣơng tự chế độ chăm sóc cây hom hoặc cây từ hạt.
Đối với nuôi cấy mô, chất kích thích ra rễ IBA, IAA và NAA ở các nồng độ khác nhau (để bổ sung cho môi trƣờng MS) đã đƣợc thử nghiệm với các đối tƣợng cây lâm nghiệp [4], kết quả cho thấy khi dùng IBA ở nồng độ 2 mg/l đối với ra rễ chồi trong ống nghiệm, còn ra rễ trực tiếp bằng cách ngâm và chấm dung dịch ra rễ sử sụng nồng độ 3 ppm đã cho tỷ lệ ra rễ cao (80- 92%) ở các dòng Keo lai BV10, BV29, BV32 và BV33. Nồng độ cho tỷ lệ ra rễ cao ở dòng BV16 (65%) và BV5 (50%) là 1ppm của IBA. Đồng thời đƣa cây nuôi cấy mô ra rễ trực tiếp (bằng cách chấm thuốc bột TTG1) với giá thể cát sông thực hiện thành công cho cây Lát hoa, Keo lai [4,21,23, 33,34].
Tuy vậy, kết quả xử lý ra rễ cho cây mô bằng thuốc bột TTG1 1,0% trên môi trƣờng cát sông do Lê Đình Khả cùng kỹ sƣ lâm nghiệp Malaysia thực hiện tại tập đoàn sản xuất gỗ dán Ta Ann ở Sarawak (Malaysia) vào ngày 1 tháng 12 năm 1999 và kiểm tra vào ngày 6 tháng 1 năm 2000 đã thấy các dòng BV5, BV10, BV16, BV32 và BV33 đều có tỷ lệ ra rễ 100%, dòng BV29 có tỷ lệ ra rễ thấp nhất cũng đạt 86,7% đến ngày 24 tháng 1 (gần 2 tháng sau khi cấy giâm) vẫn giữ đƣợc tỷ lệ sống là 81- 100% (với tỷ lệ chung là
sử dụng ở dạng thuốc bột TTG1 1% là chất kích thích có hiệu quả ra rễ cao nhất đối với các dòng keo lai đã đƣợc đánh giá và lựa chọn [35].
Đây là giai đoạn chuyển dần cây con từ ống nghiệm ra nhà kính rồi ra ngoài trời. Cây mô đƣợc chuyển từ môi trƣờng dị dƣỡng sang môi trƣờng tự dƣỡng nên phải tập cho cây quen dần với môi trƣờng tự nhiên, tránh sự thay đổi đột ngột làm cho cây có thể bị sốc hoặc bị chết. Khi cây con đã cứng cáp và đạt đƣợc tiêu chuẩn về chiều cao, số lá và số rễ thì đƣa ra ngoài giá thể. Giá thể tiếp nhận cây nuôi cấy mô phải đảm bảo tơi, xốp, thoáng nƣớc và sạch bệnh. Phải giữ ẩm cho cây khi mới đƣa cây từ bình nuôi ra, cần duy trì độ ẩm trên 50% để cây con không mất nƣớc và làm giàn che để tránh ánh sáng quá mạnh. Sau 2-3 tuần đƣa ra ngoài cây mô sẽ sinh trƣởng ổn định, chăm sóc cây mô tƣơng tự chế độ chăm sóc cây hom hoặc cây từ hạt.
Tóm lại, quá trình nhân giống in vitro có thể đƣợc chia thành các giai
đoạn nhƣ trên nhƣng kết quả của mỗi giai đoạn không tách biệt nhau mà có sự kế thừa của giai đoạn trƣớc. Trong các giai đoạn trên thì giai đoạn chuẩn bị môi trƣờng là đặc biệt quan trọng, giai đoạn này ảnh hƣởng xuyên suốt và quyết định sự thành công hay thất bại của quá trình nhân giống.