hợp với Cordyceps militaris bản địa.
a) Ảnh hưởng của nguồn C
Đ xác định được nguồn Cacbon tối ưu cho sự sinh trưởng và phát tri n của quả th , chúng tôi đã tiến hành th nghiệm trên 3 loại môi trường với hàm lượng Glucose thay đổi: 20g, 25g, 30g. Sau đó chọn ra môi trường tối ưu nhất.
Chuẩn bị 30 hộp cho mỗi loại môi trường với thành ph n các chất được phối trộn theo bảng 2.1 dưới đây.
Các lọ được bao k n, đem kh tr ng trong nồi hấp ở nhiệt độ 1000
C trong thời gian 3h. Sau khi kh tr ng môi trường được làm nguội tự nhiên rồi mới cấy giống.
S dụng phương thức cấy đa đi m giống sản xuất ở cả 3 loại môi trường. Quan sát so sánh và ghi lại kết quả v tốc độ sinh trưởng hệ sợi và thời gian hình thành quả th ở cả 2 loại môi trường đ xác định môi trường tối ưu.
Đánh giá đặc đi m hình thái quả th , tiến hành đo k ch thước quả th và số lượng quả th /hộp ở mỗi công thức.
Bảng 2.2. Công thức phối trộn3 loại môi trƣờng nuôi cấy sợi nấm C.militaris
Môi trƣờng C1 Môi trƣờng C2 Môi trƣờng C2
Gạo lứt khô: 18g Gạo lứt khô: 18g Gạo lứt khô: 18g
Glucose: 20 gam Glucose: 25 gam Glucose: 30 gam 20ml gồm nước dừa, nước
chiết malt.
20ml gồm nước dừa, nước chiết malt.
20ml gồm nước dừa, nước chiết malt.
Nhộng tươi: 10 g nghi n nhỏ Nhộng tươi: 10g nghi n nhỏ Nhộng tươi: 10g nghi n nhỏ 2ml hỗn hợp vi lượng gồm: KH2PO4 0,5g/l, cao nấm men 1g/l, Pepton 3g/l 2ml hỗn hợp vi lượng gồm: KH2PO4 0,5g/l, cao nấm men 1g/l, Pepton 3g/l 2ml hỗn hợp vi lượng gồm: KH2PO4 0,5g/l, cao nấm men 1g/l, Pepton 3g/l
b) Ảnh hưởng của nguồn nito
Trong th nghiệm này nhóm nghiên cứu s dụng hàm lượng Glucose đã được nghiên cứu ở trên. Đ xác định được nguồn Ni tơ tối ưu cho sự sinh trưởng và phát tri n của quả th , chúng tôi đã tiến hành th nghiệm trên 3 loại môi trường với hàm lượng Nhộng tằm thay đổi: 5g, 10g, 15g.
Bảng 2.3. Công thức phối trộn 3 loại môi trƣờng nuôi cấy sợi nấm C.militaris
Môi trƣờng N1 Môi trƣờng N2 Môi trƣờng N3
Gạo lứt khô: 18g Gạo lứt khô: 18g Gạo lứt khô: 18g
Nhộng tươi: 5 g nghi n nhỏ Nhộng tươi: 10g nghi n nhỏ Nhộng tươi: 15g nghi n nhỏ 20ml gồm nước dừa,
nước chiết malt.
20ml gồm nước dừa, nước chiết malt.
20ml gồm nước dừa, nước chiết malt.
2ml hỗn hợp vi lượng gồm: KH2PO4 0,5g/l, cao nấm men 1g/l, Pepton 3g/l 2ml hỗn hợp vi lượng gồm: KH2PO4 0,5g/l, cao nấm men 1g/l, Pepton 3g/l 2ml hỗn hợp vi lượng gồm: KH2PO4 0,5g/l, cao nấm men 1g/l, Pepton 3g/l
Tiến hành th nghiệm:
Chuẩn bị 30 hộp cho mỗi loại môi trường với thành ph n các chất được phối trộn theo bảng trên đây.
Các lọ được bao k n, đem kh tr ng trong nồi hấp ở nhiệt độ 1000C trong thời gian 3h. Sau khi kh tr ng môi trường được làm nguội tự nhiên rồi mới cấy giống.
S dụng phương thức cấy đa đi m giống sản xuất ở cả 3 loại môi trường. Quan sát so sánh và ghi lại kết quả v tốc độ sinh trưởng hệ sợi và thời gian hình thành quả th ở cả 2 loại môi trường đ xác định môi trường tối ưu nhất.
Đánh giá đặc đi m hình thái quả th , tiến hành đo k ch thước quả th và số lượng quả th /hộp ở mỗi công thức.
c) Nghiên cứu ảnh hƣởng của cƣờng độ ánh sáng lên quá trình sinh trƣởng và phát triển của quả thể.
Chuẩn bị 90 lọ th nghiệm với c ng loại môi trường tối ưu đã được cấy giống, chia thành 3 lô (mỗi lô 30 lọ) tương ứng dụng đ th nghiệm với 3 đi m cường độ chiếu sáng được lựa chọn.
Chuẩn bị thiết bị chiếu sáng với hệ thống đ n có th đi u chỉnh đ có được 3 đi m cường độ chiếu sáng th nghiệm là 500Lux, 700Lux, 1000Lux.
Quan sát và ghi lại kết quả sự sinh trưởng và phát tri n của quả th
C.militarisnhằm xác định cường độ chiếu sáng th ch hợp cho quá trình sinh trưởng và phát tri n của quả th nấm.
Đánh giá đặc đi m hình thái quả th , tiến hành đo k ch thước quả th và số lượng quả th /hộp ở mỗi công thức.
d) Nghiên cứu ảnh hƣởng của thời gian chiếu sáng đến quá trình sinh trƣởng và phát triển của quả thể nấm
Bố tr 90 lọ th nghiệm c ng với loại môi trường tối ưu đã được cấy giống, chia thành 3 lô (mỗi lô 30 lọ) tương ứng d ng đ th nghiệm với 3 đi u kiện chiếu sáng được lựa chọn l n lượt là 7 giờ, 12 giờ, 24 giờ.
Quan sát và ghi lại kết quả sự sinh trưởng và phát tri n của quả th nấm
C.militaris nhằm xác định thời gian chiếu sáng tối ưu cho quá trình sinh trưởng và phát tri n của quả th .
Đánh giá đặc đi m hình thái quả th , tiến hành đo k ch thước quả th và số lượng quả th /hộp ở mỗi công thức.
e) Nghiên cứu ảnh hƣởng của độ ẩm lên quá trình sinh trƣởng và phát triển quả thể C.militaris
Bố tr 90 hộp th nghiệm c ng với loại môi trường tối ưu đã được cấy giống, chia thành 3 lô (mỗi lô 30 lọ) tương ứng dung đ th nghiệm với 3 đi m ẩm độ môi trường được lựa chọn l n lượt là 70%, 80%, 90%.
Quan sát và ghi lại kết quả sự sinh trưởng và phát tri n của quả th nấm
C.militaris nhằm xác định khoảng độ ẩm tối ưu cho quá trình sinh trưởng và phát tri n của quả th .
Đánh giá đặc đi m hình thái quả th , tiến hành đo k ch thước quả th và số lượng quả th /hộp ở mỗi công thức.
f) Nghiên cứu ảnh hƣởng của nhiệt độ lên quá trình sinh trƣởng và phát triển của quả thể C.militaris
Đi u kiện nhiệt độ tối ưu cho sự sinh trưởng và phát tri n của ĐTHT trong tự nhiên là khoảng 22-230C. Vì vậy chúng tôi thiết kế th nghiệm trong môi trường có nhiệt độ nằm trong khoảng 20 -250C với 3 đi m nhiệt độ là 200
C, 220C, 240C. Quan sát và ghi lại sự sinh trưởng và phát tri n của quả th nấm C.militaris
nhằm tìm ra các khoảng nhiệt độ tối ưu trong nuôi trồng.
Đánh giá đặc đi m hình thái quả th , tiến hành đo k ch thước quả th và số lượng quả th /hộp ở mỗi công thức.