- Mô tả các bƣớc thực hiện xét nghiệm phản ứng hòa hợp.
- Thống nhất qui trình xét nghiệm phản ứng hòa hợp cho các nhân viên, cán bộ
trong khoa Xét nghiệm – Trung tâm Y tế huyện Tiên Yên.
2. Phạm vi áp dụng
- Đƣợc thực hiện tại phòng Huyết học – khoa Xét Nghiệm–Trung tâm Y tế huyện Tiên Yên.
- Thực hiện khi có chỉ định xét nghiệm phản ứng hòa hợp của bác sĩ.
3. Trách nhiệm
- Thực hiện: Kỹ thuật viên đƣợc giao thực hiện quy trình này. - Giám sát: Cán bộ phụ trách phòng và cán bộ quản lý chất lƣợng.
4. Định nghĩa, thuật ngữ và chữ viết tắt
4.1. Định nghĩa
- Phản ứng hòa hợp: phản ứng chéo giữa hồng cầu ngƣời cho và huyết thanh ngƣời nhận, giữa hồng cầu ngƣời nhận và huyết thanh ngƣời cho(tùy theo chế phẩm máu)nhằm xác định sự hòa hợp giữa ngƣời cho và ngƣời nhận.
4.2. Thuật ngữ, chữ viết tắt - HC: hồng cầu. - HT: huyết thanh. - KN: kháng nguyên. - KT: kháng thể. 5. Nguyên lý
Là phản ứng ngƣng kết, để tìm sự hoà hợp về nhóm máu ngƣời cho và ngƣời nhận.
6. Trang thiết bị, vật tƣ 6.1. Thiết bị - Máy ly tâm - Kính hiển vi - Tủ lạnh - Tủ ấm. 6.2. Vật tư 6.2.1 Dụng cụ: - Ống nghiệm. - Gíá để ống nghiệm. - Kéo. - Gạch men. - Lam kính.
35 - Pipet. - Bút ghi kính. 6.2.1 Hóa chất: - Nƣớc muối sinh lý. - Anti A,B,AB,D. - HCM: A,B. - Anti globulin. 6.3. Mẫu bệnh phẩm
- Lấy bệnh phẩm theo đúng quy trình trong cuốn Sổ tay lấy mẫu.
7. Kiểm tra chất lƣợng
- Không áp dụng.
8. An toàn
- Mặc quần áo bảo hộ, đội mũ, đeo khẩu trang, mang găng tay cao su trong suốt
quá trình thực hiện xét nghiệm mẫu bệnh phẩm.
- Tuân thủ đúng các nội quy, yêu cầu trong phòng xét nghiệm Huyết học.
- Áp dụng các biện pháp an toàn chung khi xử lý mẫu và thực hiện xét nghiệm theo
quy trình về an toàn xét nghiệm.
9. Nội dung thực hiện
9.1. Chuẩn bị
- Lấy máu hoặc chế phẩm máu theo thông tin ghi trên phiếu xin phát máu(han ngắn
lấy trƣớc).
- Ly tâm máu ngƣời nhận 3000 vòng/phút trong 5 phút.
9.2. Tiến hành
9.2.1 Truyền máu toàn phần. - Ly tâm máu ngƣời cho.
- Pha hồng cầu 5% của ngƣời nhận và ngƣời cho bằng nƣớc muối sinh lý.
- Mỗi đơn vị máu toàn phần sẽ làm 4 ống: chéo I, II, 1, 2. Ghi tên bệnh nhân và tên ngƣời cho(số dây túi máu) vào ống.
- Phản ứng hòa hợp trong môi trƣờng nƣớc muối ở 220C:
+ Nhỏ vào ống I 2 giọt huyết thanh ngƣời nhận + 1 giọt hồng cầu 5% ngƣời cho. + Nhỏ vào ống II 2 giọt huyết thanh ngƣời cho+ 1 giọt hồng cầu 5% ngƣời nhận.
+ Ủ ống I và II 45 phút ở 220C.
+ Ly tâm 1000 vòng phút/ 1 phút
- Phản ứng hòa hợp có sử dụng kháng globulin ngƣời:
+ Nhỏ vào ống 1 2 giọt huyết thanh ngƣời nhận + 1 giọt hồng cầu 5% ngƣời cho. + Nhỏ vào ống 2 2 giọt huyết thanh ngƣời cho+ 1 giọt hồng cầu 5% ngƣời nhận.
+ Ủ 45 phút ở 370C.
+ Rửa hồng cầu bằng nƣớc muối sinh lý
+ Nhỏ 1 giọt huyết thanh Coombs vào mỗi ống + Ly tâm 1000 vòng phút/ 1 phút
- Định lại nhóm máu ngƣời cho và ngƣời nhận trên đá men.
- Lấy ống chéo I,II,1,2 ra nhỏ thêm mỗi ống 5 giọt nƣớc muối sinh lý.
- Dùng pipet hút mỗi ống chéo 1 giọt dung dịch ra lam kính dàn mỏng và ghi tên ngƣời nhận và đánh số tƣơng úng với ống chéo sau đó soi trên kính hiển vi vật kính 10.
9.2.2 Truyền khối hồng cầu. - Ly tâm máu ngƣời cho.
36
- Pha hồng cầu 5% của ngƣời cho bằng nƣớc muối sinh lý.
- Mỗi đơn vị khối hồng cầu sẽ làm 2 ống: chéo I, 1. Ghi tên bệnh nhân và tên ngƣời cho(số dây túi máu) vào ống.
- Phản ứng hòa hợp trong môi trƣờng nƣớc muối ở 220C:
+ Nhỏ vào ống I 2 giọt huyết thanh ngƣời nhận + 1 giọt hồng cầu 5% ngƣời cho.
+ Ủ ống I 45 phút ở 220C.
- Ly tâm ống I 1000 vòng/phút x 1 phút.
- Phản ứng hòa hợp có sử dụng kháng globulin ngƣời:
+ Nhỏ vào ống 1 2 giọt huyết thanh ngƣời nhận + 1 giọt hồng cầu 5% ngƣời cho.
+ Ủ ống 1 45 phút ở 370C.
+ Rửa hồng cầu bằng nƣớc muối sinh lý + Nhỏ 1 giọt huyết thanh Coombs vào ống + Ly tâm 1000 vòng phút/ 1 phút
- Định lại nhóm máu ngƣời cho và ngƣời nhận trên đá men.
- Lấy ống chéo I, 1 ra nhỏ thêm mỗi ống 5 giọt nƣớc muối sinh lý.
- Dùng pipet hút mỗi ống chéo 1 giọt dung dịch ra lam kính dàn mỏng và ghi tên ngƣời nhận và đánh số tƣơng úng với ống chéo sau đó soi trên kính hiển vi vật kính 10.
9.2.3 Truyền huyết tƣơng,tiểu cầu. - Ly tâm máu ngƣời cho.
- Pha hồng cầu 5% của ngƣời nhận bằng nƣớc muối sinh lý.
- Mỗi đơn vị khối tiểu cầu(huyết tƣơng) sẽ làm 2 ống: chéo II, 2. Ghi tên bệnh nhân và tên ngƣời cho(số dây túi máu) vào ống.
- Phản ứng hòa hợp trong môi trƣờng nƣớc muối ở 220C:
+ Nhỏ vào ống II 2 giọt huyết thanh ngƣời nhận + 1 giọt hồng cầu 5% ngƣời cho.
+ Ủ ống I 45 phút ở 220C.
- Ly tâm ống II 1000 vòng/phút x 1 phút.
- Phản ứng hòa hợp có sử dụng kháng globulin ngƣời:
+ Nhỏ vào ống 2 2 giọt huyết thanh ngƣời nhận + 1 giọt hồng cầu 5% ngƣời cho.
+ Ủ 45 phút ở 370C.
+ Rửa hồng cầu bằng nƣớc muối sinh lý + Nhỏ 1 giọt huyết thanh Coombs vào ống + Ly tâm 1000 vòng phút/ 1 phút
- Định lại nhóm máu ngƣời cho và ngƣời nhận trên đá men.
- Lấy ống chéo II, 2 ra nhỏ thêm mỗi ống 5 giọt nƣớc muối sinh lý.
- Dùng pipet hút mỗi ống chéo 1 giọt dung dịch ra lam kính dàn mỏng và ghi tên ngƣời nhận và đánh số tƣơng úng với ống chéo sau đó soi trên kính hiển vi vật kính 10.
10. Diễn giải và báo cáo kết quả
- Dƣơng tính(khi có hiện tƣợng ngƣng kết): tiến hành chọn lại máu cho bệnh nhân và thử lại từ đầu.
- Âm tính(không có hiện tƣợng ngƣng kết): trả kết quả theo quy trình trong xét nghiệm.
11. Lƣu ý
Trong trƣờng hợp tối cần thiết, phải truyền máu mà không có thời gian làm xét nghiệm, cần phải làm nhƣ sau :
37
- Phát túi máu cùng nhóm với bệnh nhân (nếu trƣớc đo bệnh nhân đã làm xét nghiệm nhóm máu) hoặc phát túi máu nhóm O đồng thời nhóm máu Rh âm nếu không biết nhóm máu bệnh nhân, sau đó làm phản ứng chéo ngay lập tức.
- Sau khi hoàn thành phản ứng chéo, nếu thấy không tƣơng hợp báo ngay với bác sỹ đang điều trị bệnh nhân.
12. Lƣu trữ hồ sơ
-Sổ lƣu kết quả xét nghiệm.
13. Tài liệu liên quan
- Quy trình lấy mẫu bệnh phẩm xét nghiệm tổng phân tích tế bào máu (trong cuốn sổ tay lấy mẫu).
- Quy trình xử lý chất thải y tế của Bệnh Viện ĐKKV Tiên Yên đƣợc xây dựng theo Quyết định số 43/2007/QĐ-BYT, ngày 30/11/2007 của Bộ trƣởng Bộ Y tế về việc ban hành Quy chế Quản lý chất thải y tế.
- QT lƣu mẫu bệnh phẩm.
14. Tài liệu tham khảo
- Quyết định 5530/QĐ-BYT về quy trình thực hành chuẩn trong quản lý chất lƣợng xét nghiệm.
XÉT NGHIỆM RF