- Mô tả các bƣớc thực hiện xét nghiệm xét nghiệm Dengue IgM/IgG bằng phƣơng
pháp test nhanh.
- Thống nhất qui trình xét nghiệm Dengue IgM/IgG bằng test nhanh cho các nhân
viên, cán bộ trong khoa Xét nghiệm – Trung tâm Y tế huyện Tiên Yên.
2. Phạm vi áp dụng
- Đƣợc thực hiện tại phòng Huyết học – khoa Xét Nghiệm–Trung tâm Y tế huyện Tiên Yên
- Thực hiện khi có chỉ định xét nghiệm Dengue IgM/IgG bằng phƣơng pháp test nhanh của bác sĩ.
3. Trách nhiệm
- Thực hiện: Kỹ thuật viên đƣợc giao thực hiện quy trình này. - Giám sát: Cán bộ phụ trách phòng và cán bộ quản lý chất lƣợng.
4. Định nghĩa, thuật ngữ và chữ viết tắt
4.1. Định nghĩa
- Sốt xuất huyết là một bệnh do các virus Dengue. Việc chẩn đoán sớm sốt xuất
huyết Dengue thƣờng phải dựa vào các xét nghiệm kháng thể Dengue IgM và IgG. Kháng thể Dengue IgM thƣờng xuất hiện muộn vào ngày thứ 3-4 và Dengue IgG thƣờng xuất hiện vào ngày thứ 14 sau khi nhiễm Dengue nguyên phát
4.2. Thuật ngữ, chữ viết tắt
- KTV: Kỹ thuật viên.
5. Nguyên lý
- Sử dụng phƣơng pháp sắc ký miễn dịch:
- Vùng cộng hợp đƣợc phủ sẵn kháng nguyên Dengue tái tổ hợp và IgG thỏ.
- Trong quá trình xét nghiệm mẫu bệnh phẩm đƣợc nhỏ vào vùng nhận mẫu của test thử , di chuyển theo test thử nhờ mao dẫn .
- IgG kháng dengue nếu có trong mẫu bệnh phẩm sẽ gặp và phản ứng với cộng hợp các kháng nguyên Dengue và IgG thỏ tại vùng cộng hợp.
43
- Hóa hợp tạo tạo thành tiếp tục di chuyển gặp và phản ứng với kháng thể chuột kháng IgG ngƣời tại vùng kết quả G làm xuất hiện một vạch màu đỏ tại đây gọi là vạch kết quả G thông báo kết quả là IgG dengue dƣơng tính.
- IgM kháng dengue nếu có trong mẫu bệnh phẩm sẽ gặp và phản ứng với cộng hợp các kháng nguyên Dengue và IgG thỏ tại vùng cộng hợp.
- Hóa hợp tạo tạo thành tiếp tục di chuyển gặp và phản ứng với kháng thể chuột kháng IgM ngƣời tại vùng kết quả M làm xuất hiện một vạch màu đỏ tại đây Gọi là vạch kết quả M thông báo kết quả là IgM dengue dƣơng tính.
6. Trang thiết bị, vật tƣ 6.1. Thiết bị - Máy ly tâm. - Tủ lạnh. 6.2. Vật tư 6.2.1 Dụng cụ: -Giá để ống nghiệm. -Pipet tự động,đầu côn. 6.2.1 Hóa chất:
- Kit thử: Onsite Dengue IgG/IgM Combo Rapid Test.
6.3. Mẫu bệnh phẩm
- Lấy bệnh phẩm theo đúng quy trình trong cuốn sổ tay lấy mẫu.
7. Kiểm tra chất lƣợng
- Không áp dụng.
8. An toàn
- Mặc quần áo bảo hộ, đội mũ, đeo khẩu trang, mang găng tay cao su trong suốt
quá trình thực hiện xét nghiệm mẫu bệnh phẩm.
- Tuân thủ đúng các nội quy, yêu cầu trong phòng xét nghiệm Huyết học.
- Áp dụng các biện pháp an toàn chung khi xử lý mẫu và thực hiện xét nghiệm theo
quy trình về an toàn xét nghiệm.
9. Nội dung thực hiện
- Ly tâm mẫu xét nghiệm 3000 vòng/phút trong 3 phút.
- Lấy test thử của kit ra khỏi vỏ nhôm và thực hiện theo hƣớng dẫn sử dụng đi kèm test.
- Đọc kết quả trong vòng 5-25 phút.
10. Diễn giải và báo cáo kết quả
- Để đánh giá chất lƣợng của thanh xét nghiệm. Sau khi tiến hành phản ứng vùng chứng của thanh xét nghiệm phải xuất hiện vạch đỏ, nếu không xuất hiện vạch đỏ phải hủy kết quả và tiến hành lại từ đầu.
- Dƣơng tính IgG: khi thanh thử xuất hiện 2 vạch đỏ ở vùng chứng “C” và vùng kết quả “G” thông báo trong mẫu phẩm chỉ có IgG kháng Dengue chứng tỏ bệnh nhân bị nhiễm Dengue thứ phát muộn,hoặc Dengue nguyên phát sớm hoặc trƣớc kia đã từng bị nhiễm Dengue.
44
- Dƣơng tính IgM: khi thanh thử xuất hiện 2 vạch đỏ ở vùng chứng “C” và vùng
kết quả “M” thông báo trong mẫu phẩm chỉ có IgM kháng Dengue chứng tỏ bệnh
nhân bị nhiễm Dengue nguyên phát.
- Dƣơng tính IgM & IgG: Xuất hiện cả 3 vạch đỏ ở vùng chứng “C” và vùng kết
quả “M” , vùng kết quả “G” thông báo có cả IgM,IgG kháng Dengue trong mẫu
phẩm chứng tỏ bệnh nhân bị nhiễm Dengue thứ phát hoặc Dengue thứ phát sớm. - Kết quả âm tính: khi thanh thử chỉ xuất hiện vạch đỏ ở vùng chứng “C”.
-Trả kết quả theo quy trình trong xét nghiệm.
11. Lƣu ý
- Chỉ lấy test thử ra khỏi túi khi sẵn sàng sử dụng.
- Không sử dụng kit đã hết hạn sử dụng.
- Test thử,bệnh phẩm phải để ở nhiệt độ phòng trƣớc khi làm xét nghiệm. - Đọc kết quả trong vòng 25 phút.Trên 25 phút kết quả không còn chính xác.
- Kết quả có thể âm tính giả khi nồng độ kháng thể virus Dengue thấp hơn độ nhạy của kit thử hoặc kháng thể không có trong mẫu(ở trong những giai đoạn nhất định của bệnh).Vì vậy kết quả âm tính không loại trừ khả năng phơi nhiễm hoặc lây nhiễm virus Dengue.
- Kit thử không đƣợc sử dụng là phƣơng pháp duy nhất để chuẩn đoán lây nhiễm virus Dengue.Mọi kết quả dƣơng tính phải đƣợc khảng định lại bằng các phƣơng pháp xét nghiệm khác.
12. Lƣu trữ hồ sơ
-Sổ lƣu kết quả xét nghiệm.
13. Tài liệu liên quan
- Quy trình lấy mẫu bệnh phẩm xét nghiệm tổng phân tích tế bào máu (trong cuốn sổ tay lấy mẫu).
- Quy trình xử lý chất thải y tế của Bệnh Viện ĐKKV Tiên Yên đƣợc xây dựng theo Quyết định số 43/2007/QĐ-BYT, ngày 30/11/2007 của Bộ trƣởng Bộ Y tế về việc ban hành Quy chế Quản lý chất thải y tế.
- QT lƣu mẫu bệnh phẩm.
14. Tài liệu tham khảo
- Quyết định 5530/QĐ-BYT về quy trình thực hành chuẩn trong quản lý chất lƣợng xét nghiệm.
- Hƣớng dẫn sử dụng Onsite Dengue IgG/IgM Combo Rapid Test.
XÉT NGHIỆM HbsAg(test nhanh)