Hợp chất 7 được phân lập dưới dạng bột, không màu. Tương tự như hợp chất
5 và 6 trên phổ 1H (hình 4.1.7a) và 13C-NMR (hình 4.1.7b) của hợp chất 7 cho thấy các tín hiệu của 02 carbon không liên kết trực tiếp với hydro, có liên kết trực tiếp với oxy, 01 carbon bậc 4 tại C 20,92 (C-13) có độ chuyển dịch hóa học về phía trường cao hơn so với những carbon bậc 4 thông thường cho thấy khả năng carbon bậc 4 này thuộc vòng cyclopropane.
Hình 4.1.7a. Phổ 1
H-NMR của hợp chất 7
Sự có mặt của 04 nhóm methyl bậc 3, 04 nhóm methine trong đó có tín hiệu rất đặc trưng của 02 methine thuộc vòng cyclopropane, 04 nhóm methylene. Với 15 carbon và các tín hiệu proton tương ứng với tín hiệu proton của hợp chất 5, 6 cho thấy hợp chất 7 cũng thuộc dạng dạng sesquiterpene, với các đặc trưng của các tín hiệu proton, tín hiệu carbon và sự hiện diện của nhóm hydroxyl, nhóm geminal
carbon methyl tại các vị trí lần lượt là C 20,92 (C-13), 16,51 (C-14) và 28,73 (C- 15). Các tín hiệu này rất đặc trưng cho vòng cyclopropane có mặt ở các hợp chất 5
và hợp chất 6 cho thấy hợp chất 7 có dạng dạng 4,10-aromadendrane-diol [6][ 8] tương tự như hợp chất 5, 6.
Hình 4.1.7b. Phổ 13
C-NMR của hợp chất 7
Hình 4.1.7c. Phổ HSQC của hợp chất 7
Các tương tác 1
H-13C thu được từ việc phân tích phổ HSQC (hình 4.1.7c) của hợp chất 7 bao gồm các tín hiệu cộng hưởng của proton H 1,10 (H3-14) với C
với C 24,88 (C-11), giữa H 1,21 (H3-12) với C 30,59 (C-15), cho thấy sự hiện diện của 04 nhóm methyl singlet, không có sự trùng lấp của hai nhóm geminal methyl như đối với trường hợp hợp chất 5.
Tiếp tục phân tích tiếp các tương tác 1H-13C thu được từ việc phân tích phổ HSQC (hình 4.1.7c) của hợp chất 7, các số liệu thu được trình bày trong bảng 4.7
Bảng 4.7. Số liệu phổ NMR của hợp chất 7 C aC Cb,c Hb,d dạng pic (J = Hz) HMBC (1H 13 C) 1 56,4 55,85 1,74 m 2 24,3 24,15 1,58 m/1,64 m 3 41,4 41,22 1,53 m/1,68 m 4 80,3 80,34 - 5 47,2 47,38 1,72 m 6 30,1 29,48 0,38 dd (10,0; 10,5) 7 26,9 26,89 0,58 m 8 19,2 19,18 1,37 m/1,65 m 9 42,8 42,74 1,52 m/1,68 m 10 71,8 71,83 - 11 25,1 24,88 1,25 s 3, 4, 5 12 30,5 30,59 1,21 s 1, 9, 10 13 20,9 20,92 - 14 16,4 16,51 1,10 s 6, 7, 13, 15 15 28,7 28,73 1,03 s 6, 7, 13, 14
aCcủa hợp chất aromadendrane-4,10-diol [6], bĐo trong CDCl3, c125 MHz, d500 MHz.
Phân tích phổ HMBC (hình 4.1.7d) của hợp chất 7 cho các tương tác HMBC giữa proton H3-12 (H 1,21) với C-1 (C 55,85), C-9 (C 42,74), C-10 (C 71,83); Tương tác giữa proton H3-11 (H 1,25) với C-3 (C 41,22), C-4 (C 80,34), C-5 (C
47,38); Tương tác giữa proton H3-14 (H 1,10) với C-13 (C 20,92), C-6 (C 29,48), C-7 (C 26,89). Các phân tích HMBC nêu trên và các phân tích HMBC chi tiết tại bảng 4.1.7d cho thấy hợp chất 7 có các nhóm hydroxyl tại C-4, C-10, vòng
cyclopropane và 02 nhóm methine tại vị trí C-1 và C-5 tương tự như hợp chất 5, 6.
So sánh các số liệu về độ chuyển dịch hóa học của các hợp chất 5, 6 và 7 cho thấy các hợp chất này cùng có bộ khung và cấu trúc phẳng. Sự khác nhau chủ yếu của hợp chất 7 so với hợp chất 5 và hợp chất 6 ở vị trí C-10 và độ chuyển dịch hóa học của proton tại H-1 và H2-9. Cụ thể, độ chuyển dịch hóa học 13Cđối với hydroxyl của hợp chất 7 là C-10 (C 71,83) trong khi đó hydroxyl C-10 (C 75,49) đối với hợp chất 6 và hydroxyl C-10 (C 75,04) của hợp chất 5.
Hình 4.1.7d. Phổ HMBC của hợp chất 7
Đối với trường hợp hợp chất 6 cả 02 nhóm alcohol bậc 3 liên kết với hydroxyl C-4, C-10 ở cùng phía với H-1, độ chuyển dịch hóa học của proton tại H-1
(H 2,16) đối với hợp chất 6. Trường hợp hợp chất 5 duy nhất nhóm alcohol bậc 3 liên kết với hydroxyl C-10 cùng phía với H-1, độ chuyển dịch hóa học của proton tại H-1 (H 1,87) đối với hợp chất 5. Trong trường hợp của hợp chất 7, độ chuyển dịch hóa học của proton tại H-1 (H 1,74) và sự thay đổi độ chuyển dịch hóa học của proton tại H2-9 so với cùng vị trí trên hợp chất 5 và 6. Với sự thay đổi so với cùng
vị trí tại các hợp chất nêu trên, có thể nhận thấy proton H-1 ở khác phía hoàn toàn so với các nhóm alcohol bậc 3 trên các hydroxyl ở hợp chất 7. Trong khi đó kết quả so sánh độ chuyển dịch hóa họccủa hợp chất 7 ở các vị trí tương ứng với giá trị độ chuyển dịch hóa học của hợp chất aromadendrane-4,10-diol [6] ở các vị trí tương ứng, kết quả cho thấy sự phù hợp. Vậy hợp chất 7 được xác định là aromadendrane- 4, 10-diol (hình 4.1.7e).
Hình 4.1.7e. Các tương tác HMBC chính và cấu trúc hóa học của hợp chất 7
IV.1.8. Hợp chất 8: Alloaromadendrane-4,10-diol
Hợp chất 8 được phân lập dưới dạng bột, không màu. Tương tự như hợp chất
5, 6, 7, trên phổ 1H (hình 4.1.8a) và 13C-NMR (hình 4.1.8b) của hợp chất 8 cho thấy các tín hiệu của 02 carbon không liên kết trực tiếp với hydron, có liên kết trực tiếp với oxy, 01 carbon bậc 4 tại C 18,78 (C-13) có độ chuyển dịch hóa học về phía trường cao hơn so với những carbon bậc 4 thông thường cho thấy khả năng carbon bậc 4 này thuộc vòng cyclopropan, 04 nhóm methylene, 04 nhóm methine, 04 nhóm methyl singlet.
Phân tích độ chuyển dịch hóa học của proton H-6 với H 0,01 (1H, dd, j= 9,5; 9,0 Hz) và proton H-7 với H 0,62 (1H, m) cho thấy hai proton này không thể ở dạng trans, với hằng số tương tác tại H-6 tương ứng là 9,5; 9,0 Hz có thể suy luận proton H-6 và H-7 ở dạng cis để hình thành lên cis-cyclopropane tương tự như đối với trường hợp của hợp chất 5. Nhận định này được chứng minh khi so sánh độ chuyển dịch hóa học của 13Cđối với hai methyl carbon ở dạng geminal đính trực tiếp vào 01 carbon bậc 4 thuộc vòng cyclopropane, các giá trị C 16,25 (C-14) và C
tương ứng của carbon trên cis-cyclopropane [6], đồng thời khác so với các giá trị tương ứng của trans-cyclopropan [21]
Hình 4.1.8a. Phổ 1H-NMR của hợp chất 8
Hình 4.1.8c. Phổ HSQC của hợp chất 8
Tiếp tục phân tích tiếp các tương tác 1H-13C thu được từ việc phân tích phổ HSQC (hình 4.1.8c) của hợp chất 8, các số liệu thu được trình bày trong bảng 4.8.
Bảng 4.8. Số liệu phổ NMR của hợp chất 8 C aC Cb,c H b,d dạng pic (J = Hz) HMBC (1H 13 C) 1 54,0 54,06 2,49 m 2 25,1 25,19 1,61 m/1,72 m 3 37,4 37,50 1,65 m/1,85 m 4 82,1 82,15 - 5 47,8 47,81 1,74 m 6 25,3 25,37 0,01 dd (9,0; 9,5) 7 28,8 28,83 0,62 m 8 18,7 18,68 1,42 m/1,64 m 9 37,9 38,02 1,60 m/1,69 m 10 74,3 74,34 - 11 25,6 25,65 1,34 s 3, 4, 5 12 32,2 32,18 1,20 s 1, 9, 10 13 18,6 18,78 - 14 16,4 16,25 1,04 s 6, 7, 13, 15 15 28,5 28,59 1,03 s 6, 7, 13, 14
Hình 4.1.8d. Phổ HMBC của hợp chất 8
Phân tích phổ HMBC (hình 4.1.8d) của hợp chất 8 cho các tương tác HMBC giữa proton H3-12 (H 1,20) với C-1 (C 54,06), C-9 (C 38,02), C-10 (C 74,34); Tương tác giữa proton H3-11 (H 1,34) với C-3 (C 37,50), C-4 (C 82,15), C-5 (C
47,81); Tương tác giữa proton H3-14 (H 1,04) với C-13 (C 18,78), C-6 (C 25,37), C-7 (C 28,83). Các phân tích HMBC nêu trên, các phân tích HMBC chi tiết tại bảng 4.8 cho thấy hợp chất 8 có các nhóm hydroxyl tại C-4, C-10, vòng cyclopropan và 02 nhóm methine tại vị trí C-1 và C-5 tương tự như hợp chất 5, 6, 7.
Từ các phân tích nêu trên có thể nhận thấy hợp chất 8 được hình thành giữa sự kết nối của vòng cis-cyclopropane, vòng cycloheptane và vòng cyclopentane tại các vị trí C-1, C-5, C-6 và C-7. Sự kết nối giữa vòng cycloheptanevà vòng cyclopentane tại vị trí C-1 và C-5 có thể ở hai dạng cis và trans. Trong đó dạng cis
hình thành lên dạng allo-aromadendrane và dạng trans hình thành aromadendrane. Tiếp tục phân tích độ chuyển dịch hóa học của proton H-6 với H 0,01 (1H, dd, j= 9,5; 9,0 Hz) và proton H-5 với H 1,74 (1H, m), với hằng số tương tác của proton H- 6 và H-5 cho thấy hai proton có góc lệch >900, và hai proton này ở hai vị trí đối
ngược nhau (Trong trường hợp hai proton này cùng phía, góc lệch trong khoảng 600 sẽ không hình thành được hằng số tương tác lớn trên proton H-6 theo tính toán lý thuyết của phương trình Karplus) [12].
Tính toán được hằng số tương tác giữa proton H-5 và H-1 sẽ xác định được kiểu cis hoặc trans của hai proton này và kết hợp với phổ NOESY. Tuy nhiên, hai proton này bị overlap và do đó không thể tính toán được hằng số tương tác, do lượng chất ít không đủ đo phổ NOESY. Cho nên, tiến hành việc so sánh số liệu độ chuyển dịch hóa học của hợp chất 8 với các số liệu tương ứng của hợp chất 5, 6 và 7
cho thấy sự khác biệt, nhất là nhóm hydroxyl C-4 với giá trị lần lượt là C 82,15 đối với hợp chất 8, C 80,34 đối với hợp chất 7, C 80,23 đối với hợp chất 6 và C 80,39 đối với hợp chất 5. Rõ ràng sự khác biệt này không phải do ảnh hưởng của cấu hình của nhóm alcohol bậc 3 liên kết với hydroxyl C-4 hoặc nhóm methyl bậc 3 liên kết với hydroxyl C-4, sự thay đổi dạng /-OH ở vị trí này không làm thay đổi độ chuyển dịch hóa học của hydroxyl C-4 trên các hợp chất 5, 6 và 7. Như vậy, sự khác biệt này cho phép nhận định khung của hợp chất 8 không ở dạng aromadendrane như đối với hợp chất 5, 6, 7.. Tuy nhiên, với sự xuất hiện của các nhóm thế và độ chuyển dịch hóa học có thể nhận định hợp chất 8 sẽ kết nối vòng cyclopentan và cyclohexane ở vị trí C-1, C-5 theo kiểu cis [12], kết nối giữa vòng cycloheptane và vòng cyclopentane tại vị trí C-1 và C-5 ở dạng này sẽ hình thành dạng khung alloaromadendrane [12]. So sánh độ chuyển dịch hóa học 13
C của hợp chất 8 ở các vị trí tương ứng là với giá trị độ chuyển dịch hóa học 13C của hợp chất alloaromadendrane-4, 10-diol [12] [15] ở các vị trí tương ứng, kết quả cho thấy hợp chất 8 chính là alloaromadendrane-4,10-diol (hình 4.1.8e)
Cấu trúc các hợp chất phân lập được từ san hô mềm Sinuralia erecta
3, 5-dihydroxyeudesma-4(15),11-diene (1) (Chất mới)
4(15)-Eudesmene-1β,6α-diol (2)
6-hydroxy-eudesm-4(15)-ene-1-one (3) 4β,15-epoxyeudesmene-1,6α-diol (4)
aromadendrane-4,10-diol ( 5 ) aromadendrane-4,10-diol ( 6 )