Quá trình được thực hiện ở nhiệt độ phòng. Tốc độ bơm dịch vào cột sắc ký lần lượt là 2ml/phút, 3ml/phút, 4ml/phút 5ml/phút, 6ml/phút, 7ml/phút, 8ml/phút. Sau khi xử lý trao đổi ion tất cả các mẫu được đem đun nóng dung dịch để loại ammoniac. Sau đó dùng HCl hạ pH của dung dịch xuống 4,9 – 5. Tiến hành cô đặc chân không thu nhận dịch chứa protein đã tinh sạch.
Chỉ tiêu đánh giá là giá trị OD của sản phẩm khi so mầu ở bước sóng 280nm và nhận xét cảm quan. Kết quả được trình bày trên bảng 4.15.
Bảng 4.15. Ảnh hưởng của tốc độ chảy
TT Tốc độ chảy (ml/phút) OD280 Đánh giá cảm quan
1 2 0.064 Màu sáng, dịch trong, thơm đặc trưng. 2 3 0.065 Màu sáng, dịch trong, thơm đặc trưng.
3 4 0.065 Màu sáng dịch trong, thơm đặc trưng.
4 5 0.077 Màu hơi vàng, dịch trong 5 6 0.085 Màu vàng, dịch trong, không thơm. 7 7 0.094 Màu vàng, dịch trong, không thơm.
Kết quả cho thấy tốc độ bơm dịch vào cột tỷ lệ nghịch với chất lượng sản phẩm, tốc độ bơm càng lớn, sản phẩm thu được có độ tinh sạch càng kém. Mặc dù vậy tốc độ bơm lại có ảnh hưởng đến hiệu suất tinh sạch, bơm chậm cho sản phẩm sạch nhưng thời gian tinh sạch lâu, hiệu quả kinh tế kém. Dựa trên sự cân nhắc về mức đáp ứng độ tinh sạch và hiệu quả kinh tế, chúng tôi chọn tốc độ 4ml/phút là tốc độ bơm dịch thích hợp nhất.
4.2.2.2. Ảnh hưởng của nồng độ protein đến hiệu quả tinh sạch bằng trao đổi ion ion
Yếu tố cuối cùng ảnh hưởng đến hiệu quả tinh sạch dịch protein là nồng độ dịch protein đem tinh sạch. Từ các điều kiện như trên ta tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ dịch protein đến hiệu quả tinh sạch bằng trao đổi ion với các
46
nồng độ đem nghiên cứu lần luợt là 0.5; 1; 1.5; 2, 2.5. Dịch thu được ta cũng đem đo OD để xác định độ đục, màu và mùi. Kết quả được trình bày qua bảng 4.16.
Bảng 4.16. Ảnh hưởng của nồng độ dịch protein đến hiệu quả tinh sạch
Nồng độ dịch protein (Bx) OD (280nm) Màu
0.5 0.008 Dịch trong suốt, màu trắng sáng. 1 0.011 Dịch trong suốt, màu trăng. 1.5 0.018 Dịch trong, màu vàng sáng. 2 0.020 Dịch trong, màu vàng sáng. 2.5 0.021 Dịch hơi đục, màu vàng sáng. 3,0 0.021 Dịch hơi đục, màu vàng sáng. Cũng giống như tốc độ bơm, ở đây nồng độ dịch protein đem tinh sạch cũng tỷ lệ nghịch với hiệu quả tinh sạch, nồng độ dịch protein đem tinh sạch càng lớn thì dịch thu được càng có độ đục cao. Do đó điều kiện nồng độ dịch protein tốt nhất đem tinh sạch là Bx = 2,0.