Phần 3 Vật liệu và phương pháp nghiên cứu
3.3. Phương pháp nghiên cứu
3.3.3. Xác định độ mẫn cảm của các chủng vi khuẩn và tập đoànvi khuẩn phân
phân lập được từ dịch tử cung lợn với thuốc kháng sinh.
- Dùng tampon vô khuẩn nhúng vào nhuyễn dịch rồi lấy lên ép nhẹ và xoay nhẹ que gòn trên thành ống nghiệm. Động tác này sẽ loại bỏ được lượng huyễn dịch vi khuẩn thừa khỏi que gòn.
- Ria vi khuẩn lên mặt thạch. Chờ thạch khô trong vòng 3 - 5 phút.
- Dùng pank vô trùng đặt các mảnh giấy kháng sinh tiếp xúc đều với mặt thạch. Các mảnh giấy tẩm kháng sinh đặt cách nhau không dưới 24 mm. Sau khi đặt các mảnh giấy vào đĩa thạch được khoảng 15 phút, đặt đĩa thạch vào tủ ấm
37oC, sau 16 - 18 giờ lấy ra đọc kết quả.
- Sau khi ủ 16 - 18 giờ, vi khuẩn sẽ mọc thành những khóm mịn tiếp hợp nhau và vòng vô khuẩn là một vòng tròn đồng nhất.
- Đo đường kính vòng vô khuẩn bằng thước có đơn vị là mm, bằng cách áp thước lên mặt sau của đáy hộp thạch. Nếu cạnh của vòng ức chế không rõ nét thì phải đo chỗ hẹp nhất và chỗ rộng nhất rồi lấy giá trị trung bình. Đường kính của vòng vô khuẩn đựơc tính ra mm. Nếu khuẩn lạc mọc trong vòng ức chế rõ ràng thì phải nuôi cấy, phân lập và thử lại.
- Đánh giá kết quả dựa theo theo tiêu chuẩn của Hội đồng Quốc gia Hoa Kỳ (1999).
Bảng 3.1. Bảng đánh giá đường kính vòng vô khuẩn theo tiêu chuẩn của Hội đồng Quốc gia Hoa Kỳ (1999)
Tên kháng sinh
Kháng sinh trong 1 mảnh
giấy (g)
Đường kính vòng vô khuẩn Kháng thuốc (mm) Mẫn cảm TB (mm) Rất mẫn cảm (mm) Enrofloxacin 20 16 17-22 23 Norfloxacin 10 12 13 - 17 17 Ciprofloxacin 15 13 15 - 20 23 Amoxycillin 20 13 14 - 16 17 Gentamicin 10 12 13 - 14 15 Ampicillin 10 11 12 - 13 14 Polymycin B 300IU 08 9 - 11 12 Ofloxacin 5 11 11 - 13 13 Penecillin 10UI 11 12-21 22
- Kết quả kháng sinh đồ được ứng dụng trong điều trị như sau:
+ Khi vi khuẩn ở mức rất mẫn cảm và mẫn cảm trung bình với thuốc, chúng ta sử dụng thuốc ở liều điều trị trung bình.
+ Khi vi khuẩn mẫn cảm yếu thì sử dụng thuốc điều trị ở liều tối đa của từng loại thuốc, hoặc bơm thẳng vào vị trí đang bị bệnh trong cơ thể.
+ Vi khuẩn kháng thuốc tuyệt đối không dùng thuốc bị kháng để điều trị bệnh.