Phần 2 Tổng quan tài liệu
2.2. Virus viêm gan vịt
2.2.4. Đặc tính ni cấy
Virus viêm gan vịt là loại kí sinh nội bào tuyệt đối (Nguyễn Đường, 1990). Để gây bệnh, cần sử dụng huyễn dịch các cơ quan của vịt con chết do bệnh viêm gan vịt (gan, phổi, thận…) đã được xử lí bằng kháng sinh. Có thể cấy chuyển virus viêm gan vịt trên động vật cảm thụ, trên phôi trứng và trên môi trường tế bào.
2.2.4.1. Nuôi cấy trên phôi trứng
Virus viêm gan vịt có thể phát triển được trên cả phơi gà và phôi vịt. Để gây bệnh, người ta dùng huyễn dịch các cơ quan của vịt con đã chết do bệnh viêm gan vịt (gan, phổi, thận…) đã được xử lý bằng kháng sinh rồi gây bệnh chủ yếu vào màng nhung niệu. Tiêm bệnh phẩm vào màng nhung niệu, vào túi noãn hồng cũng có hiệu quả như tiêm vào niệu nang (Reuss U, 1959).
- Trên phôi vịt:
Tiêm virus viêm gan vịt vào xoang niệu mô của phôi vịt 10 - 14 ngày tuổi, 24 - 72 giờ sau khi gây nhiễm phơi chết với bệnh tích: phơi cịi cọc, xuất huyết dưới da đặc biệt ở vùng đầu, bụng, chân, phơi phù, gan sưng có màu đỏ hoặc hơi vàng, có thể có điểm hoại tử. Ở những phơi chết muộn nước xoang niệu mơ có mà xanh nhạt, bệnh tích rõ hơn. Ở phơi vịt bị nhiễm virus viêm gan thường thấy nước ối có màu xanh và gan bị xanh - đen, những bệnh tích này ít thấy ở phơi gà (Nguyễn Đức Lưu và cs, 2001).
- Trên phôi ngỗng:
Virus viêm gan vịt cũng có khả năng nhân lên trên phơi ngỗng. Phơi chết sau khi cấy virus vào xoang niệu mô 2 - 3 ngày (Fabricant and Levine, 2002).
- Trên phôi gà:
Tiêm virus vào xoang niệu mô của phôi gà 9 - 10 ngày tuổi. Ở lần cấy chuyển virus đầu tiên, sau khi gây nhiễm 5 - 6 ngày cho tỷ lệ phôi chết 10 - 60%, phơi có bệnh tích cịi cọc, phù phơi, xuất huyết dưới da (Levine and Fabricant, 1950). Ở lần cấy chuyển thứ 20 - 26, virus khơng cịn khả năng gây bệnh cho vịt con mới nở, khi chuẩn độ virus đạt 1 - 3log10, lượng virus này thấp hơn khi cấy chuyển qua phôi vịt. Ở lần cấy chuyển thứ 63 cho tỷ lệ phôi chết 100%.
2.2.4.2. Nuôi cấy trên môi trường tổ chức tế bào
Năm 1963, Fitzgerald đã sử dụng tế bào thận của phôi vịt để nuôi cấy virus và ơng đã chứng minh rằng virus có thể phát triển và gây huỷ hoại tế bào sau 8 lần cấy truyền. Các tác giả cho rằng virus viêm gan vịt phát triển theo mơ hình đường cong trên mơi trường tế bào thận phơi vịt. Với virus cấy truyền lần thứ 25 trên tế bào thận phôi vịt khơng cịn khả năng gây huỷ hoại tế bào trên tế bào thận phôi gà. Năm 1968, Maiboroda và Kontrimacachus đã nuôi cấy và quan sát được sự phá hủy tế bào thận ở phôi ngỗng. Năm 1972, Maiboroda và cộng sự đã theo dõi sự phát triển của virus viêm gan vịt trên tế bào thận phôi vịt một lớp với kỹ thuật kháng thể huỳnh quang thấy virus gây biến đổi bệnh tích tế bào, hàm lượng virus cao nhất sau 2 ngày (Maiboroda, 1972). Kurilenco và Strelnikov cũng đưa ra kết quả tương tự ở tế bào thận lợn con (Woolcock and Fabricant, 1997).
2.2.4.3. Nuôi cấy trên động vật cảm thụ
Virus viêm gan vịt chỉ có thể phát triển tốt trên vịt con dưới 7 ngày tuổi. Sau 2 - 4 ngày nung bệnh, vịt có biểu hiện đặc trưng: con vật mệt mỏi nghiêm trọng, nằm một chỗ, đầu ngoẹo ra đằng sau hay về một bên, co giật toàn thân rồi chết. Khi mổ khám quan sát bệnh tích đặc trưng ở gan thấy: gan sưng nhũn, dễ bị nát khi ấn nhẹ, trên mặt gan có những điểm xuất huyết, đơi khi có những điểm hoại tử màu trắng xen kẽ.
Quan sát những biến đổi vi thể trên gan thấy tổ chức gan bị viêm tụ máu, tăng sinh ống mật, các mạch máu bị sưng, các tế bào gan bị tích mỡ. Một số
trường hợp trong nguyên sinh tế bào gan xuất hiện những thể bao hàm. Ngồi ra lách có thể hơi sưng.
2.2.4.4. Đặc tính kháng nguyên
Theo Asplin (1965), tính kháng nguyên của virus luôn thay đổi. Virus viêm gan vịt không làm ngưng kết hồng cầu gà, vịt, thỏ, cừu nên đã cho phép phân biệt với virus Newcastle. Huyết thanh của vịt nhiễm virus khỏi bệnh có khả năng trung hịa virus viêm gan vịt.