Thời gian bất hoạt (giờ)
Kết quả kiểm tra
IFA RT-PCR 2 + + 4 + + 6 + + 8 - + 10 - - 12 - - 16 - - 20 - - 24 - - 36 - - 40 - - 44 - - 48 - -
Kết quả cho thấy, huyễn dịch virus xử lý bằng BEI 0,2% trong vòng 6 giờ vẫn cho tín hiệu huỳnh quang đặc hiệu khi gây nhiễm trở lại trên môi trƣờng tế bào PK15. Các mẫu virus sau bất hoạt 8 giờ đều không quan sát đƣợc tín hiệu huỳnh quang đặc hiệu. Kiểm tra sự nhân lên của PCV2 trên môi trƣờng tế bào bằng phản ứng RT-PCR, chúng tôi thấy virus sau bất hoạt 8 giờ vẫn cho kết quả dƣơng tính. Sau thời gian bất hoạt 10 giờ các kết quả kiểm tra bằng IFA và RT- PCR đều âm tính, chứng tỏ virus đã bị bất hoạt hoàn toàn. Để khẳng định sự bất hoạt là hoàn toàn, chúng tôi tiếp đời 3 lần virus sau bất hoạt 24 giờ trên môi trƣờng tế bào PK15. Kiểm tra bằng IFA đều cho kết quả âm tính ở cả 3 lần tiếp đời. Nhƣ vậy, kết quả nghiên cứu bất hoạt cho thấy PCV2 bị bất hoạt bởi BEI 0,2%, thời gian bất hoạt tối thiểu là 10 giờ.
Trong quá trình nghiên cứu sản xuất vacxin vô hoạt PCV2 thử nghiệm, chúng tôi đã dùng IMS 1313 (Seppic) làm chất bổ trợ. Kháng nguyên là 03 chủng virus vô hoạt đƣợc trộn với tỉ lệ thể tích là 1:1:1 và có 105 TCID50/ml.
Vacxin vô hoạt PCV2 thử nghiệm đƣợc đặt tên là CircoVNUA (kết hợp giữa từ Circovirus và tên của cơ quan chủ trì đề tài: Vietnam National University of Agriculture).
4.1.5. Kết quả kiểm tra vô trùng của vacxin vô hoạt PVC2
Kiểm tra vô trùng vacxin vô hoạt PCV2 thử nghiệm theo phƣơng pháp thƣờng quy tại bộ môn Vi sinh vật – Truyền nhiễm, khoa Thú y và theo TCVN 8684 – 2011.
Để kiểm tra độ vô trùng của vacxin vô hoạt PCV2 có thể bơm vacxin vào môi trƣờng tế bào và các môi trƣờng nuôi cấy vi khuẩn thông thƣờng.
Kết quả kiểm tra vô trùng đƣợc thể hiện ở bảng 4.3.