Phần 2 Tổng quan tài liệu
2.1. Giới thiệu chung về porcine parvovirus
2.1.6. Phản ứng huyết thanh học để chẩn đoán PPV
Phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu (Hemagglutinin Inhibition test, HI) thường được sử dụng để xác định sự có mặt và định lượng kháng thể dịch thể kháng PPV. Kháng thể có thể phát hiện sớm ngay sau 5 ngày lợn bị phơi nhiễm virus sống, và có thể tồn tại hàng nhiều năm (Johnson, 1976). Huyết thanh được
sử dụng để thực hiện phản ứng HI thường được xử lý nhiệt 560C trong 30 phút và
cho hấp phụ hồng cầu để loại bỏ các yếu tố ngưng kết không đặc hiệu và xử lý với kaolin để loại bỏ hoặc giảm yếu tố ngăn trở ngưng kết không phải kháng thể (Mengeling, 1972; Morimoto, 1972). Đôi khi trypsin cũng được sử dụng để loại yếu tố ngăn trở ngưng kết không phải kháng thể (Cartwright, 1969).
Phản ứng trung hòa đôi khi cũng được sử dụng để xác định sự có mặt và định lượng kháng thể dịch thể kháng PPV. Trung hòa khả năng gây bệnh của virus sau đó được khẳng định bằng sự không xuất hiện hoặc giảm hoặc là thể bao hàm trong nhân hoặc giảm số lượng tế bào bắt màu huỳnh quang khi nuôi cấy trên môi trường tế bào hoặc giảm hiệu giá ngưng kết trong dịch nuôi cấy tế bào (Johnson, 1973, Joo, 1977, Mengeling, 1972). Phản ứng trung hòa virus được cho là có độ nhạy cao hơn so với phản ứng HI (Johnson R. H. and Collings D. F., 1969; Joo, 1977).
Ngoài ra, một số phản ứng khác như phản ứng kết tủa khuếch tán trong thạch, phản ứng kết hợp bổ thể (Ruckerbauer, 1978), phản ứng ELISA (Hohdatsu, 1988, Westenbrink, 1989) cũng được sử dụng để xác định kháng thể kháng PPV.
Thông thường các phản ứng huyết thanh học được lưu ý sử dụng trong chẩn đoán chỉ trong trường hợp mẫu bệnh phẩm là thai chết khô không lấy được. Do PPV phân bố rộng rãi nên sự có mặt của kháng thể trong mẫu huyết thanh có thể ít có ý nghĩa. Tuy nhiên, xác định tỷ lệ lượng kháng thể IgM và IgG có thể xác định được thời điểm nhiễm virus (Joo, 1977; Kim, 1974). Nếu xác định được kháng thể trong huyết thanh của thai và lợn sảy thai và lợn ngay sau khi sinh trước khi bú mẹ sẽ là bằng chứng cho thấy hiện tượng nhiễm trùng trong tử cung, do kháng thể dịch thể không truyền từ mẹ qua thai (Cartwright, 1970, Chaniago, 1978, Johnson R. H. and Collings D. F., 1969, Johnson, 1973). Trong trường hợp không lấy được huyết thanh, dịch thủy thũng từ thai hoặc nước ối có thể giữ
trong túi qua đêm giữ ở 40C để chứng minh sự có mặt của kháng thể (Cropper,
1976, Joo, 1977).