Độ pH ảnh hưởng đến tính thấm qua màng, hoạt động chuyển hóa vật chất trong tế bào, hoạt tính enzyme, sự hình thành ATP... Vì thế cần tiến hành xác định pH thích hợp của chủng vi khuẩn.
Sau khi lựa chọn được nồng độ muối và nhiệt độ nuôi cấy thích hợp của cả 2 chủng CH2.1 và TT8.5, chúng tôi tiến hành nuôi chủng 2 vi khuẩn ở những điều kiện thích hợp và đã được lựa chọn ở trên để nuôi cấy trong môi trường HA, với độ pH khác nhau lần lượt là: 6.5; 7; 7.5; 8; 8.5 để xác định pH thích hợp để nuôi cấy chủng vi khuẩn này và tiến hành các bước như mục 3.3.1. Kết quả được thể hiện như hình 4.8 và 4.9:
Từ đồ thị ta nhận thấy, chủng vi khuẩn khi nuôi ở điều kiện pH = 6.5 đạt giá trị OD cao nhất và bằng 4,5265, tiếp đến là pH = 7.0 giá trị OD bằng 4,0175, pH = 8 giá trị OD bằng 3,8036, pH = 7.5 giá trị OD bằng 3,2392, pH = 6 giá trị OD bằng 2,7964. Theo như nghiên cứu của Namwong et al. (2005) pH thích hợp của chủng vi khuẩn là pH = 7.0. Dựa vào đồ thị trên chúng tôi lựa chọn khoảng pH = 6-7 là điều
kiện thích hợp để nuôi cấy chủng vi khuẩn Exiguobacterium profundum CH2.1 và tốt nhất ở pH=6.5. Nhận thấy có sự khác nhau giữa hai kết quảcó thể do nguồn phân lập khác nhau hoặc do các điều kiện nuôi cấy khác nhau.
Kết quả xử lý thống kê cho thấy có sự khác nhau giữa các độ pH ở mức ý nghĩa α = 0.05. Giá trị OD tại pH = 6.5 đạt cao nhất.
Hình 4.8. Ảnh hưởng của pH đến khả năng sinh trưởng của chủng vi khuẩn
Exiguobacterium profundum CH2.1
Hình 4.9. Ảnh hưởng của pH đến khả năng sinh trưởng của chủng vi khuẩn
Virgibacillus campisalis.TT8.5 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 24 48 72 96 120 144 168 A b s620n m Thời gian (h) pH=7.5 pH=6.5 pH=6 pH=8 ph=7 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 24 48 72 96 120 144 168 A b s620n m Thời gian (h) pH=6.5 pH=7 pH=7.5 pH=8 ph=8.5
Qua đồ thị hình 4.9 chúng tôi thấy chủng vi khuẩn Virgibacillus campisalis.TT8.5 ở các pH khác nhau phát triển tương đối đồng đều. Trong cả 5
độ pH khác nhau chủng đều phát triển tốt.
Tuy nhiên ở pH=8 chúng tôi thấy chủng vẫn đạt giá trị mật độ quang cao hơn so với các pH còn lại 5,6285 tại thời điểm 120h. Hơn nữa tại pH này chủng vi khuẩn cũng phát triển rất ổn định từ 72h đến 144h.
Ở pH=8 chủng phát triển rất tốt ở các thời điểm đầu, giá trị mật độ quang luôn cao hơn so với các pH khác, nhưng đến hai thời điểm cuối chủng có dấu hiệu suy vong nhanh hơn so với các pH khác.
Kết quả xử lý thống kê cho thấy có sự khác biệt về mật độ tế bào của vi khuẩn giữa các pH môi trường và giữa các thời điểm nuôi cấy ở mức ý nghĩa α=0.05.
Từ đó chúng tôi lựa chọn khoảng pH= 7.5-8.5 là khoảng pH thích hợp nhất để nuôi cấy chủng vi khuẩn Virgibacillus campisalis. TT8.5 và tốt nhất ở pH=8. Kết quả này là hoàn toàn tương đồng với nghiên cứu của Lee et al. (2012) là
chủng vi khuẩn Virgibacillus campisalis có thể tăng trưởng trong điều kiện pH
6.0 – 9.0 và tối ưu nhất là pH 7.5 – 8.
Từ những kết quả đơn yếu tố ở trên, tiếp tục sử dụng để thực hiện nghiên cứu tiếp theo.