Địa điểm nghiên cứu
+ Điều tra ngoài đồng: tại huyện Tân Lạc và các vùng trồng cây ăn quả có múi Cao Phong, Kim Bôi, Lạc Thủy, Yên Thủy tỉnh Hòa Bình.
+ Nghiên cứu trong phòng: Phòng thí nghiệm Chi cục Trồng trọt và Bảo vệ thực vật Hòa Bình.
Thời gian nghiên cứu: Đề tài được tiến hành trong năm 2015.
3.2. ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ DỤNG CỤ NGHIÊN CỨU 3.2.1. Đối tượng nghiên cứu
- Các loài ruồi đục quả giống Bactocera tại vùng cây ăn quả có múi trong đó đi sâu nghiên cứu loài ruồi đục quả Phương Đông Bactrcera dorsalis
Hendel. hại cây bưởi.
3.2.2. Vật liệu nghiên cứu
- Cây trồng: Cây ăn quả có múi Citrus bao gồm cam, chanh, quýt, bưởi; các giống bưởi: bưởi đào Tân Lạc (giống địa phương), bưởi da xanh, bưởi diễn (được đưa vềđịa phương trồng).
- Thuốc bảo vệ thực vật: Regent 800WG; Bẫy Vizubon-D; Bả protein Ento - Pro 150DD.
- Chất dẫn dụ có hoạt tính sinh học cao: Methyl eugenol (ME) nhập ngoại.
3.2.3. Dụng cụ nghiên cứu.
- Thước dây, thước gỗđiều tra, băng giấy dính, băng dính, dao, kéo cắt cành; - Sổ ghi chép, bút viết, máy tính bỏ túi, túi nylon các cỡ, túi xách tay điều tra; - Ống tuýp, hộp petri và hoá chất cần thiết (cồn 70o, Formol 5%, lọ độc…); trong phòng thí nghiệm phục vụ giám định và bảo quản mẫu.
- Kính lúp soi nổi, kính lúp cầm tay, máy ảnh, đèn dẫn dụ ruồi đục quả, bình phun thuốc động cơ...
3.3. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU
- Nghiên cứu thành phần loài ruồi đục quả giống Bactrocera hại vùng trồng cây ăn quả có múi Hòa Bình.
- Nghiên cứu đặc điểm gây hại của loài ruồi đục quả Bactrocera dorsalis
Hendel trên cây bưởi.
- Nghiên cứu ảnh hưởng của các giống bưởi, các kỹ thuật canh tác chăm sóc đến sự gây hại của loài ruồi đục quảBactrocera dorsalis Hendel.
- Nghiên cứu một số biện pháp phòng chống ruồi đục quả Bactrocera dorsalis Hendel như: biện pháp bao quả; biện pháp phun bả protein Ento-pro 150DD.
3.4. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.4.1. Nghiên cứu tình hình sản xuất cây ăn quả có múi và cây bưởi huyện Tân Lạc, Hòa Bình Tân Lạc, Hòa Bình
* Phương pháp nghiên cứu: Điều tra, đánh giá tình hình sản xuất bưởi và các biện pháp phòng trừ các đối tượng sâu hại chính tại Tân Lạc, Hòa Bình.
* Phương pháp kế thừa: Kế thừa các tài liệu, số liệu liên quan về cây ăn quả có múi của các cơ quan, đơn vị quản lý, chuyên môn như các Phòng NN&PTNT các huyện, Sở Nông nghiệp & PTNT Hòa Bình, Cục Thống kê.
+ Áp dụng phương pháp điều tra nhanh nông thôn PRA có sự tham gia của người dân (Rapid Rural Apprusal).
+ Áp dụng phương pháp điều tra thu thập số liệu, phân tích đánh giá nông thôn theo phương pháp KIP (phỏng vấn người am hiểu công việc).
+ Xây dựng phiếu điều tra nông dân theo nội dung cần quan tâm, sau đó tiến hành phỏng vấn trực tiếp các hộ và điền vào mẫu phiếu điều tra, tiến hành thực hiện 30 phiếu điều tra một số hộ tại các xã trọng điểm trồng bưởi. Sau khi hoàn thành các phiếu điều tra, tiến hành tổng hợp, phân tích và đánh giá các kết quả thu được.
* Chỉ tiêu điều tra chính: Diện tích trồng bưởi, giống bưởi, tuổi cây, chân đất, kỹ thuật trồng và chăm sóc, mật độ trồng, cách trồng. Chếđộ bón phân, tưới nước: Các loại phân, lượng phân, thời gian và cách bón phân, tưới nước. Chếđộ tỉa cành, tạo tán,... Tình hình sâu hại: Các đối tượng sâu hại hay xuất hiện trong năm, loại nào gây hại nặng, thời gian phá hại, loại thuốc phun, số lần phun thuốc trong năm. Năng suất bình quân/cây, tổng sản lượng thu được.
3.4.2. Nghiên cứu thành phần loài ruồi đục quả bằng bẫy dẫn dụ ME (Methyl eugenol) (Methyl eugenol)
Sử dụng kiểu bẫy Steiner với chất dẫn dụ là Methyl eugenol (sau đây gọi tắt là bẫy ME). Chọn vườn cây ăn quả có múi (vườn cam, quýt, bưởi) là 3 cây trồng
chủ yếu tại tỉnh, diện tích vườn tối thiểu 1000 m2, mỗi vườn treo 2 bẫy ME. Treo bẫy dưới tán cây, tránh ánh sáng trực xạ, cách mặt đất 1,5-2m, cứ 2 tháng thay mồi một lần, định kỳ 7 ngày/lần đổ mẫu đểđếm và phân loại.
Đến kỳ thu mẫu, dùng bút lông gạt trưởng thành ruồi đục quả có trong bẫy vào giấy mềm, gói lại cho vào hộp giấy chữ nhật có kích thước cao 5cm x rộng 3,5 cm. Điền các thông tin (địa điểm, ngày đổ) lên vỏ hộp.
Mẫu thu được đem về phòng thí nghiệm Chi cục sấy khô phục vụ công tác giám định thành phần loài.
+ Tên loài ruồi đục quả thuộc giống Bactrocera (Tephritidae: Diptera) (tên Việt Nam và tên khoa học) theo phương pháp của Lawson et al., (2003) và dưới sự giúp đỡ của Viện BVTV và bộ môn Côn trùng
+ Tần suất xuất hiện (%) của loài ruồi đục quả giống Bactrocera trong các kỳđiều tra
+ Tỷ lệ (%) xuất hiện các loài ruồi đục quả Phương Đông thu được từ bẫy ME + Tỷ lệ (%) xuất hiện các loài ruồi đục quả thu được quả họ cây ăn quả có múi tại Tân Lạc, Hòa Bình.
Hình 3.1. Phương pháp đặt bẫy ME
thu thập ruồi đục quả trên CAQ Hình 3.2. Thu mvề phòng thí nghiẫu ruệm giám ồi đục quđịảnh đem
Người chụp: Bùi Thị Thu
3.4.3. Phương pháp nghiên cứu hình thái các pha phát dục của ruồi đục quảBactrocera dorsalis Hendel và ký chủ của chúng quảBactrocera dorsalis Hendel và ký chủ của chúng
Để theo dõi đặc điểm hình thái các pha phát dục của ruồi đục quảB.dorsalis
Bước 1: Thu hái những quả bưởi có triệu chứng bị ruồi đục quả hại đem về phòng thí nghiệm để thu nhộng.
Bước 2: Dùng panh gắp nhộng vào hộp có mùn cưa ẩm (mùn cưa đã được khử trùng bằng hấp vô trùng để tránh nấm gây bệnh), sau đó dùng mùn cưa làm ẩm bằng nước cất vô trùng phủ kín nhộng một lớp dày 1,5cm. Theo dõi và phân loại trưởng thành B. dorsalis vũ hóa từ nhộng.
Bước 3: Ghép 30 cá thể ruồi đục quả (tỷ lệ giới tính 1 đực : 1 cái = 15 cặp) vào lồng 50 x 50 x 50 cm. Nuôi trưởng thành bằng cách bôi mật ong pha loãng (theo tỷ lệ 1 mật ong : 2 nước) lên vải màn phía đỉnh lồng.
Bước 4: Tiến hành thu trứng bằng miếng aga (hình vuông các cạnh dài 3cm, dày 3cm) và rải trứng lên đĩa thức ăn, 30 trứng/đĩa; 0,3 gram thức ăn/trứng, đặt vào hộp nhựa vả đề đảm bảo tối hoàn toàn, điều kiện nhiệt độ phòng 26- 280C, ẩm độ 60-80%.
Bước 5: Khi thấy quả trứng đầu tiên nở thì ghi chép số liệu và theo dõi thường xuyên cho tới khi 30 trứng nở hoàn toàn. Thức ăn nuôi sâu non được chế biến tại phòng thí nghiệm, trong 100gram thức ăn có 86 gram thịt quả cây, 10gram torula yeast, 3 gram đường và 1 gram nipagin. Quả cây được xay nhỏ và dùng máy quấy trộn các thành phần nêu trên cho thật nhuyễn, để trong ngăn đá tủ lạnh sau 24h lấy cho rã đông. Khi thức ăn rã đông hoàn toàn mới đem sử dụng cho nuôi sâu non ruồi đục quả.
Bước 6: Theo dõi các tuổi của sâu non một lần/ngày và ghi chép
Hình 3.3. Thu hái quả bưởi bị hại về
phòng thí nghiệm Hình 3.4. Theo dõi sâu non các tu
ổi trong phòng thí nghiệm
Người chụp: Bùi Thị Thu
Trong quá trình đi điểu tra thực tế tại các khu vườn bố trí thí nghiệm cũng như các vườn trồng sản xuất của nông dân vùng trồng bưởi, chúng tôi theo dõi
triệu chứng gây hại của ruồi đục quả không chỉ trên cây ăn quả có múi mà trên các loại cây trồng khác như thanh long, ổi, khế. Chúng tôi ghi nhận lại làm khuyến cáo để bố trí cơ cấu cây trồng xen với vùng chuyên canh bưởi của Tân Lạc.
3.4.4. Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng của một số yếu tố đến sự phát sinh và gây hại của ruồi đục quả Phương Đông B.dorsalis sinh và gây hại của ruồi đục quả Phương Đông B.dorsalis
3.4.4.1 Tìm hiểu ảnh hưởng của các giống bưởi đến sự gây hại của ruồi đục quả Phương Đông B.dorsalis
- Chọn vườn đại diện, có cùng độ tuổi cây và chếđộ canh tác tương đương nhau, diện tích 1000m2 cho 3 giống bưởi khác nhau là giống bưởi Đào, bưởi Da xanh, bưởi Diễn.
- Treo 4 bẫy pheromon/vườn, có màu vàng, bên trong có tăm bông được tẩm thuốc dẫn dụ trộn thuốc trừ sâu. Treo cao cách mặt đất 1,5m hoặc xung quanh hàng rào, thời điểm treo từ cuối tháng 3 đến tháng 11 (từ lúc đậu quả, quả non - quả già đến chín sinh lý, thu hoạch).
- Chất dẫn dụ: VIZUBON - D (là hỗn hợp gồm 2 thành phần: 1. Naled (chiếm 25% thành phẩm) là hoạt chất trừ sâu có tác dụng vịđộc, tiếp xúc, xông hơi và thấm sâu; 2. Methyl eugenol (chiếm 75% thành phẩm) là chất dẫn dụ giới tính.
+ Mỗi mồi bả tẩm 3 ml hỗn hợp vào bông tăm. + Thời gian thay mồi bả: 15 ngày/lần.
+ Thời gian thu mẫu ruồi: 7 ngày/lần.
- Đến kỳ thu mẫu, dùng bút lông gạt trưởng thành ruồi có trong bẫy vào giấy mềm, gói lại cho vào hộp giấy chữ nhật có kích thước cao 5cm x rộng 3,5 cm. Điền các thông tin (địa điểm, ngày đổ) lên vỏ hộp.
- Theo dõi các chỉ tiêu:
+ Diễn biến số lượng ruồi B. dorsalis trên vườn bưởi với các giống khác nhau + Diễn biến tỷ lệ quả bị hại ở từng giai đoạn trên các giống bưởi khác nhau
Hình 3.5. Treo bẫy Vizubon - D thu hút trưởng thành ruồi đục quả trên các giống bưởi tại Tân Lạc, Hòa Bình năm 2015
Nguồn ảnh: Bùi Thị Thu
3.4.4.2 Tìm hiểu ảnh hưởng của biện pháp canh tác, chăm sóc sau thu hoạch đến sự gây hại của ruồi đục quả Phương Đông B.dorsalis
- Tại vùng thâm canh cây bưởi của Tân Lạc, với những vườn bưởi được trồng thuần, quy mô lớn từ vài nghìn mét vuông đến hàng vài hecta, vài chục hecta, sau mỗi vụ thu hoạch công tác chăm sóc đơn giản như tạo tán, cắt tỉa cành sâu bệnh, cành già cỗi, kết hợp vệ sinh vườn như thu gom quả rụng chôn lấp được các nhà vườn quan tâm thực hiện. Bên cạnh đó, trên địa bàn các xã trọng điểm trồng bưởi cũng còn có các nhà vườn trồng bưởi nhưng chưa được đầu tư công sức cũng như tiền của sau mỗi vụ thu hoạch để làm công tác vệ sinh vườn, tạo cành tỉa tán
- Chọn vườn bưởi đỏđại diện cho:
+ Phương thức canh tác trồng thuần, tạo cành, tỉa tán và vệ sinh vườn kết hợp thu gom quả rụng chôn lấp tiêu hủy
+ Phương thức canh tác trồng vườn tạp, không tạo cành, tỉa tán và vệ sinh vườn sau thu hoạch.
- Diện tích mỗi vườn 1000m2.
- Phương pháp điểu tra: Theo QCVN 01-119:2012/BNNPTNT Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia về phương pháp điểu tra phát hiện sinh vật hại trên cây ăn quả có múi và QCVN 01-38:2010/BNNPTNT Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia về phương pháp điểu tra phát hiện dịch hại cây trồng.
+ Chọn 10 điểm ngẫu nhiên nằm cách mép vườn ít nhất 1 hàng cây. + Số mẫu điểu tra của 1 điểm: Đối với sinh vật hại quả (vườn cây thời kỳ kinh doanh) mỗi điểm điểu tra 1 cây, trên mỗi cây chọn 4 hướng, mỗi hướng chọn 1 cành nằm ở tầng giữa của tán cây đểđiểu tra.
- Chỉ tiêu theo dõi: Tỷ lệ quả bị ruồi hại (%) và chỉ số hại (%) giữa 2 phương thức canh tác.
3.4.5. Phương pháp nghiên cứu đặc điểm gây hại của loài ruồi đục quả
Bactrocera dorsalis Hendel
- Tiến hành làm thẻ, thẻ làm bằng bìa catton cứng, có đánh số quả bưởi theo dõi.
- Treo thẻ ngẫu nhiên 30 quả bưởi trên vườn bưởi đỏ, tiến hành treo 3 vườn tổng số quả theo dõi là 90 quả. Thời gian treo từ 28/3 đến 07/11/2015 tương đương với các giai đoạn phát triển của quả bưởi được chia làm 3 đợt, treo đợt 1: từ lúc hình thành quả - quả non; treo đợt 2: giai đoạn phát triển quả - quả già và treo đợt 3: giai đoạn quả chín sinh lý và thu hoạch
- Điều tra định kỳ và trong thời gian cao điểm của loài ruồi đục quả gây hại để quan sát xác định thời điểm của ruồi trưởng thành đẻ trứng (qua vết châm hại còn mới) từ đó theo dõi triệu chứng gây hại bên ngoài vỏ quả và bên trong thịt quả.
- Mô tả triệu chứng và tập tính gây hại của ruồi đục quả qua quan sát mẫu quả hại, khi tiến hành bổ quả bị châm, quả bị rụng và từ thực tế điều tra ngoài đồng ruộng.
+ Các chỉ tiêu theo dõi:
- Số quả bưởi bị hại (có vết châm của ruồi đục quả). - Tỷ lệ quả bị ruồi châm
- Số quả bị rụng do nguyên nhân ruồi hại - Tỷ lệ quả bị rụng do ruồi gây hại
Hình 3.6. Tiến hành treo thẻ trên quảđể theo dõi mức độ hại
Nguồn ảnh: Bùi Thị Thu
3.4.6. Phương pháp nghiên cứu các biện pháp phòng trừ ruồi đục quả
Bactrocera dorsalis Hendel
3.4.6.1. Thí nghiệm biện pháp bao quả
- Cây trồng thử nghiệm: Cây bưởi đỏ; tuổi 5-7
- Địa điểm: Xã Thanh Hối, huyện Tân Lạc, tỉnh Hòa Bình
- Phương pháp: Chọn vườn bưởi giống Đỏ, sử dụng túi nilon kích thước 40x 50cm (túi bao quả được chúng tôi mua tại Viện nghiên cứu rau quả sau thu hoạch). Diện tích cả vườn là 1.500m2 tiến hành chăng dây để chia đôi vườn thành 2 phần, một nửa vườn chọn ngẫu nhiên 500 quảđể bao, đồng thời cũng đánh dấu 500 quảở một nửa vườn còn lại nhưng không bao quả làm đối chứng.
- Chỉ tiêu theo dõi:
+ Theo dõi ngoài vườn bố trí thí nghiệm: Tỷ lệ quả bị châm hại và tỷ lệ quả bị rụng trên 500 quảđược bao và những quảđối chứng không bao.
+ Theo dõi trong phòng thí nghiệm: Tiến hành thu mẫu là những quả bị rụng mang về phòng bổ quả để theo dõi tỷ lệ quả có sâu non (dòi) gây hại bên trong và mật độ sâu non của ruồi ở những quảđược bao và không được bao. Từ đó so sánh và đánh giá mức độ gây hại của ruồi.
+ Tính toán hiệu quả kinh tế: So sánh giá trị kinh tế giữa những quả được bao và không được bao. Từđó đánh giá hiệu quả kinh tế của biện pháp bao quả.
Hình 3.7. Bố trí thí nghiệm bao quả
Nguồn ảnh: Bùi Thị Thu
3.4.6.2. Thí nghiệm biện pháp phòng trừ ruồi đục quả bằng phun bả potein Ento- pro 150DD.
- Cây trồng thử nghiệm: Cây bưởi đỏ tuổi 5-7.
- Địa điểm tiến hành: Thị trấn Mường Khến, huyện Tân Lạc, tỉnh Hòa Bình. - Chọn 02 vườn có diện tích: 1000m2; 01 vườn phun bả (không xử lý thuốc hóa học trong thời gian tiến hành phun bả); 01 vườn đối chứng không phun bả (có phun 1 lần thuốc hóa học Regent 800WG liều lượng 1g/bình 12lit).
- Để xác định được mật độ trưởng thành ruồi đục quả vào bẫy, chúng tôi tiến hành điều tra số lượng ruồi vào bẫy trước mỗi lần phun bả protein Ento-pro150DD (vườn phun và không phun). Mỗi vườn đặt 3 bẫy với chất dẫn dụ với Vizubon-D.
- Tiến hành phun bả từ ngày 02/8 đến 27/9/2015 với số lần phun là 9 lần (chia 3 đợt theo dõi tương đương với 3 giai đoạn phát triển của quả bưởi là giai đoạn phát triển quả; giai đoạn quả già và giai đoạn quả chín sinh lý).
- Liều lượng xử lý bả cho 1 ha: 2 lít Ento-pro 150DD + 2gr Regent 800WG + 18lít nước /1 lần phun.
- Cách phun: Phun điểm, dạng hạt vào mặt dưới của lá cây, diện tích mỗi điểm phun là 1m2, phun 50ml dung dịch/điểm (tương đương 400 điểm ha). Phun định kỳ 7 ngày/lần và được tiến hành từ ngày 02/8/2015 đến ngày 27/9/2015 (9 lần phun).
+ Mật số trưởng thành ruồi đục quả vão bẫy tại vùng phun bả protein và vùng đối chứng không phun bả.
+ Tỷ lệ hại: Tiến hành thu mẫu làm 3 đợt tại vườn sử dụng bả Ento - pro 150DD và vườn không sử dụng bả (n=30 quả). Đợt 1: Sau khi phun bả 3 tuần đầu