PHẦN 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU
2.4. TRUYỀN NHIỄM HỌC
2.4.5. Chất chứa mầm bệnh
Cho đến nay có rất ít báo cáo chi tiết về khả năng ORT định vị tại các cơ quan của gà bị nhiễm bệnh. Vi khuẩn ORT đã được phân lập từ màng nhầy niêm mạc mũi, khí quản và phổi cho đến ngày thứ 7 sau khi nhiễm trùng, tuy nhiên khơng có triệu chứng lâm sàng của bệnh. Số lượng trung bình các đơn vị hình thành của chủng tái tổ hợp trên một gram của màng nhầy khí quản tăng lên, đạt được mức tối đa vào ngày 3 - 4 sau khi nhiễm bệnh (khoảng 6 log10 CFU/gram mô). Sau thời gian này giá trị giảm nhanh, vào ngày thứ 7 sau khi nhiễm bệnh khơng tìm thấy O.rhinotracheale (Marien et al., 2006).
ORT cũng được phân lập từ buồng trứng và ống dẫn trứng 3 ngày sau khi
nhiễm khuẩn đường ruột của chim. Sự hiện diện của vi khuẩn trong buồng trứng và ống dẫn trứng đã khẳng định trong giai đoạn cấp tính cho thấy việc truyền
ORT qua đường giao phối (Travers et al., 1996).
Ở gà bệnh có thể tìm thấy vi khuẩn O.rhinotracheale thường có trong phổi, túi khí, chất tiết của đường hơ hấp như: nước mũi, nước mắt, dịch nhầy khí quản và ở hai bên phế quản.
2.4.6. Sự truyền lây
Bệnh lây truyền từ gà bệnh cho gà khoẻ qua tiếp xúc trực tiếp. Gà bệnh bài thải mầm bệnh ra ngồi khơng khí qua chất tiết đường hơ hấp (hắt hơi) và từ đó lây cho gà khoẻ bằng đường hít thở. Ngồi ra, mầm bệnh có thể lây lan theo đường gió, dụng cụ chăn ni, xe vận chuyển, động vật mang mầm bệnh và con người.
Vi khuẩn xâm nhập vào cơ thể gà, sinh sôi và phát triển ở niêm mạc đường hơ hấp, sau đó đến cư trú ở cơ quan đích là phổi, hai phế quản gốc và gây nên bệnh tích đặc trưng của bệnh ORT ở đó.
Ngoài ra, khi phân lập ORT từ buồng trứng, ống dẫn trứng, trứng nở, trứng đã thụ tinh, trứng không được thụ tinh, trứng chết phôi và chết bệnh trong vỏ của gà và gà tây cho thấy chúng có khả năng truyền dọc. Tuy nhiên, khi tiêm ORT vào trứng gà có phơi, phơi được giết ở ngày thứ 9 và không phân lập được ORT từ trứng đó. Như vậy, có thể thấy rằng ORT khơng truyền qua trứng trong quá
trình ấp (Hinz et al., 1994).
2.4.7. Mùa vụ mắc bệnh
Bệnh ORT thường xảy ra vào mùa đông, mùa xuân và thời điểm giao mùa trong năm khi nền nhiệt có sự biến đổi mạnh.
Tuy nhiên, do ORT còn là một bệnh mới nên chưa có nghiên cứu báo cáo chính xác về mùa vụ nhiễm ORT tại Việt Nam.
2.5. TRIỆU CHỨNG VÀ BỆNH TÍCH 2.5.1. Triệu chứng
Gà thịt thương phẩm thường mắc phải ở 3 - 6 tuần tuổi với tỷ lệ chết vào khoảng 2 - 10% kèm theo các triệu chứng ủ rũ, giảm ăn, giảm tăng trọng và tăng dịch tiết và vảy mỏ, kèm theo có hiện tượng phù mặt. ORT có thể là nguyên nhân gây chết đột ngột (dưới 20% trong 2 ngày) ở gà con với sự nhiễm trùng não và xương sọ kèm theo hoặc không kèm theo các triệu chứng hơ hấp.
Vai trị của vi khuẩn ORT như là một tác nhân gây bệnh ban đầu bởi vì nó thường bị cơ lập cùng với các mầm bệnh khác như E.coli hoặc P. multocida và
có thể bị trầm trọng hơn do nhiễm virus trước đó (Page´s et al., 1995; De Rosa et
al., 1996; van Empel and Hafez, 1999; Bisschop et al., 2004).
Ở gà giống bố mẹ, các triệu chứng hô hấp nhẹ với tỷ lệ chết thường biến động, ở các ca khơng bị ghép bệnh, gà giảm đẻ, kích thước trứng và chất lượng vỏ trứng kém. Tỷ lệ trứng có phơi và tỷ lệ ấp nở cũng có thể bị ảnh hưởng (Saif
et al., 2003; Chin R.P et al., 2008).
Ở gà đẻ thương phẩm, giảm đẻ, trứng dị hình và tăng tỷ lệ chết có liên hệ tới sự nhiễm ORT.
Ở một số trường hợp, gà non mắc bệnh từ 2 đến 8 tuần tuổi. Tỷ lệ chết thường trong khoảng 1 - 15% trong pha cấp tính (8 ngày), nhưng tỷ lệ nhiễm có thể tăng cao với tỷ lệ chết tới 50%.
Ban đầu con bệnh có triệu chứng ho, vảy mỏ và có dịch nhày; một số có hiện tượng trụy hơ hấp nặng, khó thở, vươn cổ và viêm xoang mũi kèm theo các triệu chứng giảm ăn và giảm uống nước.
ORT được báo cáo là nguyên nhân gây ra các triệu chứng thần kinh hoặc
liệt do viêm màng não, viêm xương và viêm tủy xương ở gà và gà tây.
2.5.2. Bệnh tích
Bệnh tích đại thể
Các tổn thương đại thể thường gặp ở gà thịt thương phẩm bao gồm: viêm phổi, viêm màng phổi và viêm túi khí. Khi giết thịt hoặc kiểm tra sau giết mổ sẽ thấy phổi có dịch dạng bọt, màu trắng, chất dịch tiết này có màu giống sữa chua
và túi khí bị phá hủy hồn tồn, phủ một lớp màng đục, hầu hết các tổn thương chỉ tiến triển ở một bên thùy phổi. Ở gà có thể có hiện tượng phù thũng dưới da mặt, tại các điểm tiếp giáp có sụn gây viêm đầu, viêm xương, viêm xương tủy và viêm màng não.
Ở gà tây, có hiện tượng phù và viêm một bên phổi hoặc đối xứng 2 bên với các tơ huyết trên màng phổi, viêm mủ tơ huyết gây viêm túi khí, ngoại tâm mạc, màng bao tim và khí quản. Trong một số trường hợp có thể quan sát được gan, lách sưng và sự biến đổi ở cơ tim. Hiện tượng nhiễm khuẩn tại khớp, xương sống có thể bắt gặp ở gà lớn (Hinz et al., 1994; Sprenger et al., 1998).
Bệnh tích vi thể
Các tổn thương vi thể gặp hầu hết tại phổi, màng phổi và túi khí. Phổi sung huyết, trong tất cả nhu mơ có một lượng lớn hỗn hợp các fibrin lẫn với đại thực bào và tế bào heterophil (bạch cầu trung tính) nằm tự do trong lòng các mao mạch, phế nang và đoạn cuống phổi. Sự khuyếch tán và thâm nhiễm các đại thực bào với số lượng ít hơn các tế bào heterophil.
Ở trung tâm các lòng cuống phổi và nhu mô lân cận, các ổ hoại tử lan rộng. Ổ hoại tử thường chứa đầy hỗn hợp của các tế bào hoại tử, heterophil thâm nhiễm hoặc chất tiết, và có thể có sự phân tán thành các cụm nhỏ của vi khuẩn. Do có các cục huyết khối nên nhiều mao mạch bị căng phồng. Màng phổi và túi khí có thể dày lên và phù nề do lắng đọng tơ huyết ở các kẽ, sự xâm nhiễm của các tế bào bạch cầu trung tính, rải rác các ổ hoại tử nhỏ có sự thâm nhiễm của các bạch cầu trung tính và xơ hóa (Charlton et al., 1993).
2.6. CHẨN ĐỐN
2.6.1. Chẩn đốn lâm sàng
Chẩn đốn lâm sàng dựa trên một số triệu chứng lâm sàng như ủ rũ, giảm ăn, giảm uống nước, giảm đẻ, tỷ lệ ấp nở không đạt tiêu chuẩn. Một số triệu chứng điển hình của bệnh hơ hấp phức hợp trên gia cầm bao gồm: ho, vảy mỏ kèm theo dịch nhày, trụy hơ hấp, khó thở, vươn cổ và viêm xoang mũi.
Gà chết có bệnh tích điển hình như viêm phổi hóa mủ, viêm màng phổi, viêm túi khí, túi khí dày lên, gan có thể sưng.
Tuy nhiên, các bệnh hơ hấp khác có thể có một số triệu chứng trên nên chẩn đốn chính xác bệnh ORT chỉ dựa trên triệu chứng lâm sàng là rất khó.
2.6.2. Chẩn đốn vi khuẩn học
Để chẩn đốn chính xác bệnh, bên cạnh các triệu chứng lâm sàng thì cần chẩn đốn phịng thí nghiệm như phân lập vi khuẩn, phát hiện kháng nguyên…
2.6.2.1. Phân lập, nuôi cấy vi khuẩn
Để phân lập được ORT thường sử dụng các mô, cơ quan như phổi, khí quản, túi khí. Ngồi ra, dịch xoang dưới hốc mắt và hốc mũi cũng là những vị trí phù hợp cho việc nuôi cấy. Tuy nhiên, ORT dễ dàng bị bao phủ bởi sự phát triển nhanh của các vi khuẩn khác. Nuôi cấy vi khuẩn từ máu tim và mô của gan dưới các điều kiện thực tế cho kết quả âm tính, mặc dù trước đó vi khuẩn đã được phân lập từ các cơ quan cũng như ở các khớp xương, não, buồng trứng và ống dẫn trứng sau khi gây bệnh thực nghiệm (Soriano et al., 2002; Karrimi et al., 2010).
ORT cũng có thể được phân lập trên thạch máu thường hoặc thạch chocolate.
Khuẩn lạc phát triển tốt trên môi trường thạc máu Columbia Blood agar Base (CBA) đã bổ sung 10µg/ml Gentamycine, ủ 370C, 5% CO2, ở điều kiện hiếu khí trong thời gian 24 – 48h (Zahra et al., 2013). Khuẩn lạc xuất hiện có kích thước bằng đầu đinh ghim nhỏ (đường kính khoảng 1 -2 mm), màu xám tới trắng, mặt lồi với cạnh sắc nét. Nhuộm Gram cho kết quả vi khuẩn Gram âm đa hình thái đặc trưng. Khuẩn lạc âm tính với catalase và dương tính với oxidase. Ni cấy ORT
thuần khiết có mùi riêng biệt tương tự như mùi acid butyric. Các thử nghiệm bổ sung là rất cần thiết để xác định các đặc tính của ORT (Soriano et al., 2002).
Kiểm tra ngưng kết nhanh trên phiến kính cũng được sử dụng cho mục đích chẩn đốn. Trong một nghiên cứu với 112 mẫu phân lập, tuy nhiên hiện tượng tự ngưng kết thường xuất hiện. Xét nghiệm này dựa trên sự ngưng kết của vi khuẩn nhằm phát hiện kháng thể IgM. Thí nghiệm ngưng kết nhanh trên phiến kính có thể cho kết quả sau 2 phút và là một phương pháp đơn giản để phát hiện O. rhinotracheale. Kết quả thí nghiệm được phát hiện bằng thị giác và khơng khó
trong việc phát hiện mẫu dương tính và âm tính. Ngưng kết nhanh trên phiến kính để phát hiện kháng thể chống O.rhinotracheale, là một kỹ thuật có giá trị
trong việc kiểm tra đàn gia cầm nhiễm O. rhinotracheale (Back et al., 1998). Kiểm tra Accelerated Graphics PORT (AGP) sử dụng kháng huyết thanh dương tính đã biết có thể được sử dụng để xác định và định typ ORT đã phân lập.
2.6.2.2. Phát hiện kháng nguyên
PCR được sử dụng để phát hiện các ORT trong mẫu dịch khí quản được lấy từ các gà mắc bệnh nặng. Ngoài ra, xét nghiệm bằng miễn dịch huỳnh quang cũng đã
được sử dụng để phát hiện ORT trên gà. Sau đó, van Veen et al. (2000) cho rằng các xét nghiệm miễn dịch huỳnh quang và kỹ thuật peroxidase - anti peroxidase (PAP) nhạy cảm như nhau. Sử dụng các xét nghiệm này có thể xác định một tỷ lệ nhiễm
ORT cao ở đàn gà thịt sau giết mổ khi so sánh với các phương pháp chẩn đốn thơng
thường như huyết thanh học hoặc vi khuẩn học (Soriano et al., 2002).
2.6.2.3. Huyết thanh học
Huyết thanh học rất hữu dụng trong việc giám sát cũng như hỗ trợ chẩn đoán bệnh do ORT .
Các phản ứng kiểm tra ngưng kết huyết thanh trên tấm (SPAT) được sử dụng như một xét nghiệm nhanh cho việc phát hiện các kháng thể chống lại ORT. Việc chẩn đoán và giám định nhanh chóng bằng phương pháp xét nghiệm huyết thanh đem lại kết quả chính xác (Back et al., 1998). Hầu hết các SPTA chỉ phản ứng với một serotype nhất định, dù cho phản ứng chéo xảy ra.