Phần 3 Vật liệu và phương pháp nghiên cứu
3.4. Phương pháp nghiên cứu
3.4.2. Nghiên cứu đặc điểm sinh học, sinh thái học lồi mọt thóc đỏ Tribolium
Tribolium castaneum (Herbst) trên nguyên liệu hoa cúc khô nhập khẩu 3.4.2.1. Nhân ni nguồn mọt thóc đỏ Tribolium castaneum (Herbst)
Nguồn mọt: Thu thập mọt thóc đỏ Tribolium castaneum (Herbst) từ các lô
hàng hoa cúc khô nhập khẩu tại cửa khẩu Chi Ma, Lạng Sơn.
nhiệt độ 50oC trong 2 giờ để loại bỏ nguồn sâu mọt có trong thức ăn, sau đó thức ăn để ẩm đạt độ thủy phần 17% thì sử dụng làm nguồn thức ăn.
Ghép đôi 20 cặp trưởng thành thả vào lọ có đường kính 15 cm, cao 20 cm, nắp lưới. Bên trong lọ có chứa 0,1 kg nguyên liệu là hoa cúc khô (và bột mỳ) sau 24h tiến hành đưa trưởng thành mọt ra khỏi hộp và tiến hành thu trứng tiến hành thí nghiệm.
3.4.2.2. Nghiên cứu đặc điểm hình thái, thời gian phát triển các pha của lồi mọt thóc đỏ Tribolium castaneum (Herbst)
Thí nghiệm nghiên cứu theo phương pháp nuôi cá thể của William (1999). Sau khi trứng nở tách riêng từng cá thể sâu non nuôi cá thể trong hộp chiều cao x đường kính (4 cm x 7 cm) bên trong có sẵn thức ăn là hoa cúc khô, hàng ngày theo dõi ngày hai lần vào 8 giờ sáng và 16 giờ chiều về sự phát triển thời gian phát dục, tỷ lệ chết của pha sâu non, nhộng và trưởng thành trước đẻ của mọt. Số lượng cá thể theo dõi n=30.
Theo dõi thời gian phát triển các pha của mọt thóc đỏ theo từng giai đoạn (trứng, sâu non, nhộng và trưởng thành).
Hình 3.2. Hình ảnh ni sinh học lồi mọt thóc đỏ Tribolium castaneum (Herbst)
Pha trứng: kiểm tra hàng ngày cho đến khi trứng nở thành sâu non. Pha sâu non: hàng ngày theo dõi thời gian sâu non lột xác.
Pha nhộng: tiếp tục theo dõi và đếm số lượng mỗi ngày một lần. Ghi chép thời điểm khi sâu non tuổi cuối bắt đầu hóa nhộng và khi nhộng vũ hóa trưởng thành.
Pha trưởng thành: khi phát hiện nhộng vũ hóa trưởng thành. Ghép đơi trưởng thành đực - cái trong hộp petri có thức ăn. Theo dõi mỗi ngày một lần đến khi tìm thấy quả trứng đầu tiên và ghi chép ngày đẻ trứng.
thể côn trùng theo từng giai đoạn (trứng, sâu non, nhộng và trưởng thành). Ghi chép số cá thể chết trong quá trình theo dõi.
3.4.2.3. Nghiên cứu ảnh hưởng của yếu tố nhiệt độ và thức ăn đến thời gian phát triển, sức sinh sản và tỉ lệ trứng nở của mọt thóc đỏ Tribolium castaneum (Herbst)
Tiến hành ni theo phương pháp nuôi cá thể giống như mục 3.4.2.2. Nhiệt độ theo dõi ở 2 công thức ứng với mức nhiệt độ là 25 và 30oC, ẩm độ trung bình dao động từ 70 - 80% với hại loại thức ăn là bột mì và hoa cúc khơ.
Số cá thể thí nghiệm ban đầu (n=55) cho mỗi mức nhiệt độ. Thức ăn là hoa cúc khơ, bột mì.
Chỉ tiêu theo dõi: Thời gian phát triển các pha, tỷ lệ sống sót, sức sinh sản, thời gian sống…
3.4.2.4. Nghiên cứu thời gian sống của trưởng thành mọt thóc đỏ Tribolium castaneum (Herbst) trong điều kiện có và khơng có thức ăn
Mọt Tribolium castaneum (Herbst) sử dụng trong thí nghiệm là các cá thể mới vũ hóa. Bố trí 5 cặp mọt trưởng thành đực cái đựng trong hộp với chiều cao 15cm, đường kính 10 cm, nắp lưới có chứa 50g ngun liệu hoa cúc khơ, bột mỳ (có thức ăn). Lọ chỉ thả mọt khơng có thức ăn. Đặt các hộp trong điều kiện nhiệt độ 25oC và 30oC. Theo dõi hằng ngày 2 lần sáng và chiều, ghi chép số cá thể mọt chết cho đến khi không cịn một cá thể nào sống sót. Số lần nhắc lại n = 3
Chỉ tiêu theo dõi: Thời gian sống (ngày)
3.4.2.5. Nghiên cứu mức độ hại của lồi mọt thóc đỏ Tribolium castaneum (Herbst)
Thả trưởng thành mới vũ hóa (05 cặp đực - cái) vào các hộp nhựa kích thước: chiều cao 12cm x chiều rộng 9cm đựng 100g các loại (mỗi công thức nhắc lại 3 lần):
Công thức 1: Bột mỳ Công thức 2: Hoa cúc khô
Tại mỗi thời điểm khi kiểm tra dùng sàng rây mọt ra khỏi hộp để kiểm tra mật độ mọt. Sau khi kiểm tra toàn bộ số mọt được đưa trả về hộp ban đầu để kiểm tra ở số lần tiếp theo. Theo dõi mức độ hao hụt sau khoảng thời gian 20, 40, 60, 80, 100, 120 ngày và so sánh với số lọ đối chứng (khơng có mọt). Chỉ tiêu theo dõi: tỷ lệ hao hụt phần trăm theo Kenton and Carl (1978).