Phần 4 Kết quả nghiên cứu và thảo luận
4.2. Kết quả phân lập và xác định một số đặc điểm sinh học của virus LMLM
4.2.3.2. Thích nghi virus LMLM typ eO phân lập trên tế bào BHK-21
Để xác định lại đặc tính thích ứng và ổn định của virus LMLM trên tế bào BHK 21, chúng tôi đã cấy chuyển virus 5 đời trên tế bào BHK-21. Huyễn dịch virus LMLM type O được pha loãng 10-3 và gây nhiễm lên tế bào BHK-21.
Sau mỗi lần cấy truyền, thu nhận huyễn dịch virus và chia ra các tube tương ứng với mỗi lần cấy truyền, sau đó bảo quản ở âm 800C như mô tả ở phần phương pháp.
TCID50 được xác định như là độ pha loãng (hay đậm độ) ở ngưỡng cần thiết của một huyễn dịch virus xác định vừa đủ để gây nhiễm được 50% tế bào cảm thụ. Việc xác định trị số TCID50 dựa vào tác động phá huỷ tế bào của virus trên cơ sở quan sát dưới kính hiển vi và đếm số giếng có CPE.
Tiến hành kiểm tra hiệu giá virus trên tế bào BHK-21, hiệu giá virus TCID50 được tính toán theo phương pháp của Spearman Karber. Sự thích nghi của virus trên tế bào được đánh giá là ổn định nếu chỉ số TCID50 ổn định. Kết quả được trình bày ở bảng 4.5.
Bảng 4.5. Hiệu giá của chủng virus LMLM type O qua các đời cấy chuyển
(10x TCID50/ml) P4 P5 P6 P7 P8 O/VN/BG1/2016 7,25 7,13 7,25 7,13 7,25 O/VN/BN/2016 7,38 7,25 7,25 7,13 7,25 O/VN/HD/2016 7,13 7,38 7,00 7,25 7,38 O/VN/BG2/2016 7,25 7,38 7,13 7,25 7,25
Qua bảng 4.5 cho thấy: ở mẫu O/VN/BG1/2016, hiệu giá 4 chủng virus LMLM type O ở đời P4, P6 và P8 đều đạt 107,25 TCID50/ml, ở đời P5, P7 đạt 107,13 TCID50/ml. Ở mẫu O/VN/BN/2016, hiệu giá chủng virus LMLM type O cao nhất ở đời P4 (107,38 TCID50/ml), sau đó đến các đời P5, P6, P8 (107,25 TCID50/ml) và thấp nhất ở đời P7 (107,13 TCID50/ml). Ở mẫu O/VN/HD/2016, hiệu giá chủng virus LMLM type O cao nhất ở đời P5 và P8 (107,38 TCID50/ml), sau đó đến đời P7 (107,25 TCID50/ml), đời P4 (107,13 TCID50/ml) và thấp nhất ở đời P6 (107,00 TCID50/ml). Ở mẫu O/VN/BG2/2016, hiệu giá chủng virus LMLM type O cao nhất ở đời P5 (107,38 TCID50/ml), sau đó đến đời P4, P7, P8 (107,25 TCID50/ml) và thấp nhất ở đời P6 (107,13 TCID50/ml). Qua kết quả trên cho thấy sự chênh lệch về hiệu giá virus LMLM type O qua các đời cấy chuyển là không đáng kể . Như vậy, hiệu giá virus LMLM type O qua các đời cấy chuyển tương đối cao, ổn định qua các đời cấy chuyển. Kết quả này được thể hiện rõ hơn tại hình 4.8.
Hình 4.8. Log10 Hiệu giá của chủng virus LMLM type O qua các đời cấy chuyển