3. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn
3.5.4. So sánh tính độc của một số chủng nấm ký sinh rệp sáp, ve sầu hại cà phê trên
3.5.4.1 So sánh tính độc của một số chủng nấm ký sinh côn trùng hại cà phê trên tằm.
Đối với các loài nấm ký sinh côn trùng khác nhau khả năng gây chết sâu hại cũng khác nhau, do đó việc đánh giá tính độc của chúng là rất quan trọng và có ý nghĩa lớn trong nghiên cứu sử dụng biện pháp phòng trừ sinh học. Khi gây nhiễm nấm ký sinh lên các đối tượng sâu hại, một số cá thể sâu sẽ nhanh chết, số còn lại bị nhiễm nấm có thể kéo dài thời gian hơn, nhưng cũng có những cá thể sẽ sống được đến thời kì sinh sản. Trong quá trình tác động lên côn trùng, việc xâm nhiễm và tiết ra các enzyme càng mạnh thì tốc độ hủy hoại và tiêu diệt côn trùng gây bệnh càng nhanh và ngược lại. Từ kết quả các thí nghiệm riêng lẽ, chúng tôi tiến hành bố trí thí nghiệm kiểm chứng lại và so sánh tính độc của các chủng nấm B. bassiana (BVB1), M. anisopliae (MVB1) và Paecilomyces sp. (PVB1) trên tằm dâu và rệp sáp.
Gây nhiễm 3 chủng nấm khác nhau ở cùng nồng độ 4,5x108 bào tử/ml trên tằm dâu, mỗi công thức thí nghiệm gồm 50 tằm, 3 lần nhắc lại, theo dõi đánh giá số tằm chết và sống sau các ngày gây nhiễm trong vòng 14 ngày, kết quả thu được thể hiện qua Hình 3.21.
Ở Hình 3.21. cho thấy: Các chủng nấm thí nghiệm đều có hiệu lực gây chết tằm cao ở nồng độ 4,5x108 bào tử/ml và có sự sai khác có ý nghĩa thống kê (P<0,05).
Sau gây nhiễm 3 ngày, các chủng nấm thí nghiệm chưa gây chết tằm, tỷ lệ tằm chết ở mức 0%. Tuy nhiên, sang ngày thứ 5 tỷ lệ tằm chết tăng rất nhanh ở các công thức, cao nhất là chủng nấm Paecilomyces sp. (PVB1) với tỷ lệ tằm chết đạt trên 90% và có sự sai khác có ý nghĩa thống kê (P<0,05) so với các chủng nấm khác. Hai chủng
nấm M. anisopliae (MVB1) và B. bassiana (BVB1) có tỷ lệ tằm chết đạt trên 50%, tuy nhiên không có sự sai khác về mặt thống kê.
Tỷ lệ tằm chết sau gây nhiễm 7 ngày của các công thức tăng nhưng chậm và có sự sai khác có ý nghĩa thống kê (P<0,05). Sang ngày thứ 9, tỷ lệ tằm chết vẫn tiếp tục tăng và đạt mức cao trên 70% và có sự khác biệt về mặt thống kê giữa các chủng nấm thí nghiệm, chủng Paecilomyces sp. (PVB1) có tỷ lệ tằm chết đạt cao nhất và chủng nấm B. bassiana (BVB1) có tỷ lệ tằm chết thấp nhất. Tỷ lệ tằm chết không tăng ở các ngày tiếp theo.
Hình 3.21. Tỷ lệ tằm chết sau gây nhiễm các dung dịch nấm ở nồng độ 4,5x108 bào tử/ml.
Qua kết quả nghiên cứu cho thấy, khi đánh giá tính độc của các chủng nấm trên tằm dâu, thì chủng nấm Paecilomyces sp. (PVB1) thể hiện hiệu lực gây chết tằm cao nhất, tiếp theo là chủng nấm M. anisopliae (MVB1) và cuối cùng là chủng B. bassiana (BVB1).
3.5.4.2. So sánh tính độc của một số chủng nấm ký sinh côn trùng hại cà phê trên rệp.
Sau thí nghiệm so sánh tính độc của các chủng nấm trên tằm dâu, chúng tôi tiếp tục tiến hành thí nghiệm gây nhiễm 3 chủng nấm khác nhau ở nồng độ 4,5x108 bào tử/ml trên rệp để so sánh tính độc của nấm. Mỗi công thức thí nghiệm gồm 50 rệp, 3 lần nhắc lại, theo dõi đánh giá số rệp chết và sống sau các ngày gây nhiễm trong vòng 14 ngày, kết quả thu được thể hiện qua Hình 3.22.
Ở Hình 3.22. cho thấy: Các chủng nấm thí nghiệm đều có hiệu lực gây chết rệp cao ở nồng độ 4,5x108 bào tử/ml và có sự sai khác có ý nghĩa thống kê (P<0,05). Sau gây nhiễm 3 ngày, các chủng nấm thí nghiệm chưa gây chết rệp, tỷ lệ rệp chết ở mức 0%. Tuy nhiên, sang ngày thứ 5 tỷ lệ rệp chết tăng rất nhanh ở các công thức, cao nhất là chủng nấm Paecilomyces sp. (PVB1) với tỷ lệ rệp chết đạt trên 50% và có sự sai khác có ý nghĩa thống kê so với các chủng nấm khác. Hai chủng nấm M. anisopliae
b c c c c b b b b b a a a a a 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 1 3 5 7 9 11 14 T ỷ l ệ chết ( % )
Thời gian (ngày)
(MVB1) và B. bassiana (BVB1) có tỷ lệ rệp chết đạt trên 25%, tuy nhiên không có sự sai khác về mặt thống kê.
Hình 3.22. Tỷ lệ rệp chết sau gây nhiễm các dung dịch nấm ở nồng độ 4,5x108 bào tử/ml.
Tỷ lệ rệp chết sau gây nhiễm 7, 9, 11 ngày của các công thức tăng nhưng chậm và có sự sai khác có ý nghĩa thống kê giữa tỷ lệ rệp chết của chủng nấm Paecilomyces
sp. (PVB1) với với các chủng nấm khác. Tỷ lệ rệp chết ở 2 chủng nấm M. anisopliae
(MVB1) và B. bassiana (BVB1) không có sự sai khác về mặt thống kê (P<0,05). Sau gây nhiễm nấm 14 ngày, tỷ lệ rệp chết vẫn tiếp tục tăng và đạt mức nhất trên 75% và có sự khác biệt về mặt thông kê giữa các chủng nấm thí nghiệm, chủng
Paecilomyces sp. (PVB1) có tỷ lệ rệp chết đạt cao nhất (87,33%) và chủng nấm B. bassiana (BVB1) có tỷ lệ rệp chết thấp nhất (77,33%).
Như vậy, qua kết quả thí nghiệm so sánh tính độc của các chủng nấm cho thấy, chủng Paecilomyces sp. (PVB1) có hiệu lực gây chết rệp cao nhất, tiếp theo là chủng chủng nấm M. anisopliae (MVB1) và chủng nấm B. bassiana (BVB1) có hiệu lực gây chết rệp thấp nhất. b b b b c b b b b b a a a a a 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 1 3 5 7 9 11 14 T ỷ l ệ chết ( % )
Thời gian (ngày)
CHƯƠNG 4
KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1. Kết luận
- Qua điều tra thu mẫu nấm ký sinh trên rệp sáp, ve sầu hại cà phê thuộc 3 vùng Bảo Lộc, Bảo Lâm, Di Linh của tỉnh Lâm Đồng đã thu được 138 mẫu, trong 120 mẫu nấm được phân loại định danh thì có 11 chủng nấm thuộc các loài Metarhizium anisopliae, Paecilomyses sp. và Beauveria bassiana.
- Các chủng nấm phát triển tốt ở nhiệt độ 20-300C. Ở 250C, đường kính khuẩn lạc và mật số bào tử của các chủng nấm đạt cao nhất. Ở 150C và 350C, các chủng nấm phát triển chậm.
- Các chủng nấm phát triển tốt nhất khi nuôi cấy trên PDA, tiếp theo là môi trường MEA, SDAY. Ở môi trường MCA, CZA các chủng nấm phát triển chậm.
- Chủng nấm B. bassiana (BVB1), M. anisopliae (MVB1), Paecilomyces sp. (PVB1) có hiệu lực gây chết trên tằm dâu và rệp sáp cao khi gây nhiễm ở 2 nồng độ 4,5x107 bào tử/ml và 4,5x108 bào tử/ml.
- Giá trị LC50 và LT50 của dung dịch nấm:
+ B. bassiana (BVB1): đối với tằm là 2,51x107 bào tử/ml và 5,50 ngày, đối với rệp sáp là 3,24x107 bào tử/ml và 7,76 ngày.
+ M. anisopliae (MVB1): đối với tằm là 2,04x107 bào tử/ml và 5,37 ngày, đối với rệp sáp là 2,45x107 bào tử/ml và 7,24 ngày.
+ Paecilomyces sp. (PVB1): đối với tằm là 7,08x106 bào tử/ml và 3,02 ngày, đối với rệp sáp là 1,23x107 bào tử/ml và 5,89 ngày.
- Ở nồng độ gây nhiễm 4,5x108 bào tử/ml: Chủng nấm Paecilomyces sp. (PVB1) có hiệu lực gây chết tằm và rệp cao nhất, tiếp theo là chủng nấm M. anisopliae
(MVB1) và cuối cùng là chủng nấm B. bassiana (BVB1).
4.2. Đề nghị
- Cần tiếp tục nghiên cứu định danh các chủng nấm ký sinh bằng ADN để định danh một cách chính xác loài nấm thu thập được.
- Tiếp tục nghiên cứu các đặc tính sinh học và đánh giá tính độc của các chủng nấm thu thập được trên các đối tượng sâu hại cà phê.
- Tiếp tục nghiên cứu các chủng nấm Paecilomyces sp. (PVB1), M. anisopliae
TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt
1. Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn (2001), Tuyển tập tiêu chuẩn nông nghiệp Việt Nam, Tiêu chuẩn bảo vệ thực vật tập II, quyển 1, NXB Nông nghiệp, Hà Nội. 2. Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn (2012), Tổng hợp quy hoạch phát triển
ngành cà phê Việt Nam đến năm 2020 và tầm nhìn đến năm 2030, Ban hành theo quyết định số1987/QĐ/BNN-TT ngày 21/8/2012 của Bộ trưởng BộNN&PTNT.
3. Nguyễn Thị Chắt (2003), Rệp sáp gây hại cà phê và biện pháp phòng trị chúng trên địa bàn một số tỉnh phía Nam và Tây Nguyên, Kỷ yếu hội nghị khoa học chuyên ngành bảo vệ thực vật, NXB Nông nghiệp, Hà Nội.
4. Nguyễn Thị Chắt (2008), Rệp sáp hại cây trồng và biện pháp phòng trị, NXB Nông Nghiệp TP HCM.
5. Võ Chấp, Vũ Văn Tố (2003), Điều tra nghiên cứu rệp sáp hại cà phê và biện pháp phòng trừ bằng hóa học, Kỷ yếu hội nghị khoa học chuyên ngành Bảo vệ thực vật, NXB Nông Nghiệp, Hà Nội.
6. Tạ Kim Chỉnh (1996), Nghiên cứu tuyển chọn một số chủng vi nấm diệt côn trùng gây hại ở Việt Nam và khả năng ứng dụng, Luận án Tiến sĩ khoa học sinh học, Viện Khoa học công nghệ Việt Nam.
7. Tạ Kim Chỉnh, Hoa Thị Minh Tú, Mai Anh Nam (2003), Nghiên cứu khả năng sinh bào tử của một số chủng vi nấm diệt côn trùng, Hội nghị Công nghệ Sinh học toàn quốc, tr. 184-188.
8. Tạ Kim Chỉnh (2009), Hoàn thiện công nghệ sản xuất chế phẩm Vimetazimm95DP & Biobauve5DP từ hai chủng nấm Metarhizium anisopliae Ma5 & Beauveria bassiana Bb1 để phòng trừ một số loài côn trùng trong đất hại cây công nghiệp, Báo cáo tổng hợp dự án DAĐL-2008/11.
9. Cục Trồng trọt - Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn (2013), Hiện trạng sản xuất, giải pháp phát triển và trồng tái canh cà phê trong thời gian tới, trong "Hiện trạng tái canh cà phê và giải pháp triển khai thời gian tới", ngày 25 tháng 07 năm 2013 tại Đắk Lắk, tr. 36-42, Cục Trồng trọt - Bộ NN&PTNT.
10. Nguyễn Lân Dũng (1981), Sử dụng vi sinh vật để phòng trừ sâu hại cây trồng, NXB Khoa học kỹ thuật.
11. Đoàn Công Đỉnh (1999), Tổng kết điều tra dịch hại cà phê ở Tây Nguyên trong 3 năm 1996-1998, Tạp chí Bảo vệ thực vật số 6, tr. 29-32.
12. Nguyễn Văn Đĩnh và cộng sự (2004), Giáo trình biện pháp sinh học trong bảo vệ thực vật, Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội.
13. Nguyễn Văn Đĩnh, Hà Quang Hùng, Nguyễn Thị Thu Cúc, Phạm Văn Lầm (2012), Côn trùng và động vật hại nông nghiệp Việt Nam, Nhà xuất bản Nông nghiệp, tr. 257. 14. Vũ Quang Giảng (2008), Sự phân bố của rệp sáp mềm nâu (Coccus hesperidum Linnaeus)
trên cây cà phê chè và hiệu lực của một số thuốc hoá học, Báo cáo khoa học Hội nghị Côn trùng học toàn quốc lần thứ 6, Nhà xuất bản Nông nghiệp, tr. 536-541.
15. Trần Văn Hai, Trịnh Thị Xuân, Phạm Kim Sơn (2006), Tạo sinh khối và thử nghiệm hiệu lực của một số loại nấm ký sinh trên sâu ăn tạp và rầy mềm hại rau cải tại TP Cần Thơ, Tạp chí nghiên cứu khoa học, trường Đại học Cần Thơ.
16. Trịnh Văn Hạnh (2007), Nghiên cứu đặc điểm sinh học, sinh thái học của mối Coptotermes formosanus, Odontotermes hainanensis và sử dụng chế phẩm Metarhizium anisopliae
phòng trừ chúng, Luận án tiến sĩ sinh học, Đại học Khoa học Tự nhiên, Hà Nội.
17. Nguyễn Dương Khuê (2001), Thử nghiệm dùng nấm Metarhizium cho phòng trừ mối nhà, Tạp chí NN và PTNT, số 5/2001.
18. Nguyễn Thị Lộc (2007), Biocontrol potential of some entomogenous fungi against insect pets of rice, Báo cáo khoa học, Hội nghị côn trùng học toàn quốc lần thứ 5, NXB Nông nghiệp, tr.256-261.
19. Trần Văn Mão (2002), Sử dụng côn trùng và vi sinh vật có ích, Tập II, Sử dụng vi sinh vật có ích, Nhà xuất bản Nông nghiệp, Hà Nội.
20. Phạm Văn Nhạ (2013), Nghiên cứu sử dụng nấm Metarhizium anisopliae và nấm
Beauveria bassiana phòng chống rệp sáp hại cà phê tại Tây Nguyên, Luận án tiến sĩ nông nghiệp, Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội.
21. Phạm Văn Nhạ, Hồ Thị Thu Giang, Phạm Thị Vượng, Đồng Thị Thanh, Trần Thị Tuyết, Đặng Thanh Thúy, Phạm Duy Trọng (2011), Giám định một số chủng nấm ký sinh rệp sáp hại cà phê bằng phương pháp DNA, Tạp chí Khoa học và Phát triển, Tập 9, (số 5), tr. 713-718, Trường Đại Học Nông nghiệp Hà Nội.
22. Đoàn Triệu Nhạn, Phan Quốc Sủng, Hoàng Thanh Tiệm (1999), Cây cà phê ở Việt Nam, NXB Nông nghiệp Hà Nội.
23. Đoàn Triệu Nhạn (2008), Nghề trồng cà phê, NXB Nông Nghiệp, Hà Nội.
24. Ngân hàng thế giới (2004), Báo cáo Nghiên cứu ngành cà phê, Báo cáo số 29358-VN tháng 6/2004 của Ban Nông nghiệp và Phát triển nông thôn, Ngân hàng Quốc tế về Tái xây dựng và Phát triển.
25. Võ Thị Thu Oanh, Lê Đình Đôn, Nguyễn Thị Chắt, Bùi Cánh Tuyến (2008), Khả năng gây bệnh của nấm Metarhizium anisopliae (Metsch) Sorokin đối với rệp sáp giả (Dysmicoccus sp. ) trên cây na,Tạp chí BVTV, (số 3/2008).
26. Võ Thị Thu Oanh, Lê Đình Đôn, Bùi Cách Tuyến (2009), So sánh trình tự vùng ITS- rDNA của nấm Metarhizium anisopliae gây bệnh trên côn trùng phân lập ở một số tỉnh thành phía Nam Việt Nam, Tạp chí Nông nghiệp và PTNT, (số 4/2009).
27. Võ Thị Thu Oanh (2010), Nghiên cứu các đặc tính sinh học và đánh giá độc tính của các mẫu phân lập nấm Beauveria và Metarhizium ký sinh trên côn trùng gây hại, Luận án tiến sĩ nông nghiệp. Trường Đại học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh.
28. Phan Quốc Sủng, Đoàn Triệu Nhạn (1999), Lịch sử phát triển cà phê trên thế giới và ở Việt Nam, Nhà xuất bản Nông nghiệp, Hà Nội.
29. Sở Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn tỉnh Lâm Đồng (2014), Báo cáo Đánh giá tình hình tái canh cà phê trên địa bàn tỉnh Lâm Đồng, Báo cáo số 289/BC-SNN ngày 19 tháng 09 năm 2014.
30. Sở Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn tỉnh Lâm Đồng (2012), Báo cáo Quy hoạch phát triển ngành cà phê đến năm 2020 và tầm nhìn đến năm 2030, Báo cáo số 32/BC- SNN ngày 24 tháng 05 năm 2012.
31. Nguyễn Văn Thường (2006), Những điều còn ít biết về ve sầu, Thông tin khoa học kỹ thuật Nông Lâm nghiệp - Viện KHKT Nông Lâm nghiệp Tây Nguyên, số 1, tr. 26-31. 32. Phạm Thị Thuỳ, Đồng Thị Thanh và CTV (1994), Kết quả nghiên cứu nấm côn trùng
Beauveria và Metarhizium để phòng trừ một số sâu hại cây trồng, Báo cáo tóm tắt hội nghị khoa học toàn quốc về công nghệ sinh học, hoá sinh phục vụ sản xuất và đời sống, tr. 85-86.
33. Phạm Thị Thuỳ, Nguyễn Xuân Thanh (2003), Nghiên cứu đặc điểm sinh học của rệp sáp Pseudococcus citri Risso hại rễ cà phê và khả năng sử dụng nấm Metarhizium anisopliae để phòng trừ rệp sáp tại tỉnh Đăl Lăk năm 2002 – 2003, Báo cáo khoa học Hội nghị côn trùng học quốc gia lần thứ 5, NXB Nông nghiệp, tr. 479-483.
34. Phạm Thị Thùy (2004), Công nghệ sinh học trong Bảo vệ thực vật, NXB Đại học Quốc gia. 35. Nguyễn Thị Thuỷ, Phạm Thị Vượng và Lê Xuân Vị (2007), Nghiên cứu một số đặc
điểm sinh học và diễn biến quần thể rệp sáp(Planococcus sp.)hại cà phê tại Đắc Lắc năm 2006, Tạp chí BVTV, (số 1/2007), tr. 15-20.
36. Nguyễn Thị Thuỷ, Phạm Thị Vượng và Lê Xuân Vị (2011), Một số yếu tố ảnh hưởng đến mức độ phát sinh, gây hại của loài rệp sáp mềm tua ngắn (Planococcus kraunhiae)
trên cây cà phê tại Đắk Lắk, Báo cáo khoa học Hội nghị côn trùng học quốc gia lần thứ 7, NXB Nông nghiệp, tr. 706-711.
37. Vũ Văn Tố (2000), Nghiên cứu rệp sáp (Pseudococcus citri Risso) hại quả cà phê và biện pháp phòng trừ bằng hoá học tại tỉnh DăkLăk và Gialai, Tạp chí BVTV, (số 2/2000).
38. Viện Bảo vệ thực vật (1976), Kết quả điều tra côn trùng 1967 – 1968, Nhà xuất bản Nông nghiệp Hà Nội, tr. 367-384.
39. Viện Bảo vệ thực vật (1999), Kết quả điều tra Côn trùng và Bệnh cây ở các tỉnh Miền Nam 1977 – 1978, Nhà xuất bản Nông nghiệp Hà Nội.
40. Viện Bảo vệ thực vật (1997), Phương pháp nghiên cứu Bảo vệ Thực vật, tập 1, NXB Nông nghiệp Hà Nội.
41. Phạm Thị Vượng và Trương Văn Hàm (2004), Kết quả nghiên cứu và ứng dụng biện pháp phòng trừ một số sâu hại quan trọng trên cà phê ở phía Bắc 1997-2000, Tạp chí BVTV, (số 2/2004).
42. Phạm Thị Vượng, Nguyễn Thị Thủy, Lê Xuân Vị (2007), Tình hình ve sầu hại cà phê và kết quả thử nghiệm phòng trừ chúng bằng một số loại thuốc bảo vệ thực vật, Tạp chí BVTV, (số 4/2007).
43. Phạm Thị Vượng, Nguyễn Thị Thủy, Phan Quang Hương (2007), Ve sầu hại cà phê ở Tây Nguyên biện pháp phòng trừ, Kết quả nghiên cứu khoa học công nghệ 2006 – 2010, Viện Khoa học nông nghiệp Việt Nam, tr. 487-491.