(Hình A: Tế bào ATMSC đối chứng, Hình B: tế bào ATMSC có bổ sung dịch chiết nhau thai heo sau 12h. Scale bar 200 µm)
3.1.1.4. Sự tăng sinh của ATMSC dưới tác dụng của dịch chiết nhau thai heo
Các tế bào ATMSCs đƣợc nuôi cấy trong môi trƣờng có bổ sung dịch chiết nhau thai ở các nồng độ 50 µg/mL, 100 µg/mL và 150 µg/mL. Số tế bào sẽ đƣợc khảo sát số lƣợng vào các ngày 1 đến ngày 10. Sau đó tính toán giá trị trung bình, sai số và so sánh sự khác biệt bằng thống kê T-test.
Hình 3.4. Biểu đồ đƣờng cong tăng trƣởng của tế bào ATMSCs dƣới tác động của dịch chiết nhau thai heo ở các nồng độ 50, 100, 150µg/mL)
Kết quả ở đồ thị 3.1 cho thấy sự tăng sinh của tế bào ở các nghiệm thức có sự khác biệt.
Nghiêm thức 1: đối chứng (màu xanh dƣơng)
Nghiệm thức 2: đối chứng dƣơng (màu tím)
Nghiệm thức 3: sử dụng dịch chiết ở nồng độ 50 µg/mL (màu xanh lá)
Nghiệm thức 4: sử dụng dịch chiết ở nồng độ 100 µg/mL (màu đỏ)
Nghiệm thức 5: sử dụng dịch chiết ở nồng độ 150 µg/mL (xanh biển)
Khi so với đối chứng, nghiệm thức 3 không có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê so với đối chứng. Tế bào đạt đỉnh ở ngày 8 là 5x104 tế bào và giảm số lƣợng tế bào từ ngày 9, ngày 10. Tuy nhiên, nghiệm thức 4 có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê so với đối chứng âm (p < 0,05) và đối chứng dƣơng (p < 0,05). Tế bào tăng cực đại ở ngày 7 đạt 5.8x104 tế bào, còn đối chứng thì đạt 4,7x104 tế bào. Quan trọng, là tế bào duy trì sự tăng sinh đến tận ngày 9 và giảm nhẹ vào ngày 10. Ở nghiệm thức 5, tế bào tăng cực đại tại ngày 6 đạt 5,1x104 tế bào. Tuy nhiên, tế bào lại gỉảm mạnh ở ngày 8 và nhanh chóng giảm số lƣợng tế bào có ý nghĩa thống kê với đối chứng.
Nhƣ vậy, có thể thấy ở nghiệm thứ 4, khi có sử dụng dịch chiết ở nồng độ 100 µg/mL thì sự tăng sinh tế bào đạt tối ƣu.
3.1.2.Sự biểu hiện gene Col-IV của tế bào gốc trung mô từ mô mỡ ngƣời ngƣời
ATMSCs đƣợc nuôi trong đĩa đƣờng kính 35mm, khi đạt tới gần bão hoà, thì bổ sung dịch chiết nhau thai heo ở nồng độ 100 µg/ml vì đây là nồng độ tối ƣu để tăng sinh AT-MSC. Sau 24h, chúng tôi tiến hành phản ứng RT-PCR theo hƣớng dẫn của nhà cung cấp.
(A)
(B)