Phương pháp phân lập mẫu hạt lạc giống và giám định bệnh hại trên hạt

Một phần của tài liệu Đánh giá tỷ lệ nhiễm aspergillus flavus trên hạt giống lạc tại nghi lộc, vùng phụ cận vụ xuân 2011 và phòng trừ bằng trichoderma spp luận văn thạc sỹ nông lâm ngư (Trang 52 - 53)

hại trên hạt

Giám định nấm gây hại hạt giống theo tài liệu giám định bệnh hại hạt giống của Viện nghiên cứu bệnh hạt giống Đan Mạch (Mathur S.B và Olga K., 2001), kiểm tra nấm bệnh tồn tại trên hạt giống bằng phương pháp giấy thấm hoặc bằng phương pháp cấy trên môi trường.

Phương pháp chia mẫu: Mẫu hạt giống được trải đều trên mặt phẳng theo hình tròn. Chia mặt phẳng thành 4 phần đều nhau, lấy mỗi phần một lượng nhất định sau đó trộn đều sao cho đủ lượng mẫu kiểm tra, lượng mẫu kiểm tra: 400 hạt/mẫu.

Phương pháp giám định bệnh hại trên hạt giống bằng phương pháp giấy thấm: Đặt 10 hạt trên giấy thấm đã được làm ẩm bằng nước cất vô trùng trong đĩa petri đã được khử trùng. Sau đó đặt chúng trong phòng ủ đảm bảo 12 giờ sáng, 12 giờ tối ở nhiệt độ 22 – 25 0C. Sau 7 ngày kiểm tra mẫu, soi hạt dưới kính lúp điện lần lượt từ vòng ngoài vào trong theo tâm đĩa, đối với những nấm chưa xác định rõ thì phải khều được bào tử nấm để soi dưới kính hiển vi, hoặc cho lên môi trường WA để làm thuần nấm, sau đó chuyển sang môi trường PDA để quan sát tản nấm.

Phương pháp giám định bệnh hại hạt giống bằng phương pháp đặt hạt trên môi trường thạch đường khoai tây (PDA): Đặt 10 hạt trên đĩa PDA đã được khử trùng. Sau đó đặt chúng ở điều kiện nhiệt độ phòng. Sau 7 ngày kiểm tra mẫu, soi hạt dưới kính hiển vi soi nổi lần lượt từ vòng ngoài vào tâm đĩa, đối với những bệnh chưa xác định được rõ thì phải đưa qua kính hiển vi điện tử để kiểm tra. Phương pháp này có thể xác định nấm nhanh chóng dựa trên đặc điểm của chúng khi phát triển xung quanh hạt bị nhiễm bệnh. Có thể dùng môi trường chọn lọc cho các loại nấm khó phát hiện qua phương pháp giấy thấm. Phương pháp này có thể dùng lượng hạt trên mẫu là 400 hạt.

Một phần của tài liệu Đánh giá tỷ lệ nhiễm aspergillus flavus trên hạt giống lạc tại nghi lộc, vùng phụ cận vụ xuân 2011 và phòng trừ bằng trichoderma spp luận văn thạc sỹ nông lâm ngư (Trang 52 - 53)