Để nghiên cứu ảnh hởng của giá thể đến sức sống của cây ex vitro, chúng tôi bố trí 3 công thức giá thể khác nhau với cùng một điều kiện huấn luyện là:
- Độ ẩm giá thể 65 - 80% - Nhiệt độ : 25 2± 0C
Cây con đợc chăm sóc theo các yêu cầu chặt chẽ về nhiệt độ, ánh sáng, gió, Kết quả giai đoạn huấn luyện thích nghi đ… ợc trình bày ở bảng 5.
Bảng 5: ảnh hởng của giá thể, dinh dỡng đến sức sống của cây cúc CN97 ex vitro Công thức giá thể Số mẫu Tỷ lệ sống (%) Số lá mới cây (lá) Chiều cao (cm)
Hình thái cây ex vitro
H1: Cát 240 60,00% 3,40 5,45 Cây nhỏ, lá mỏng, xanh nhạt, dễ bị đổ, sinh trởng chậm. H2: Đất thịt 240 97,30 % 4,60 6,40
Cây mập, khoẻ, lá to, dày, xanh, ít bị đổ và héo; sinh trởng mạnh H3: (Đất + cát) = (1:1) 240 90 % 4,17 6,05
Cây to, lá mỏng, xanh nhạt, sinh trởng nhanh nhng 1số cây hay bị héo, đổ non
- Giá thể cát không thích hợp để huấn luyện thích nghi cây cúc CN97 ex vitro, các chỉ tiêu đợc đánh giá đều kém hơn so với các loại giá thể khác. ở giá thể cát, cây cúc ex vitro rất nhạy cảm với độ ẩm của giá thể. Mặc dù thờng xuyên đợc phun nớc (dạng sơng mù) nhng khả năng giữ ẩm của cát kém nên chỉ sau một thời gian ngắn, độ ẩm giá thể giảm, cây thiếu nớc nên bị héo, đổ rạp. Tỷ lệ cây sống chỉ đạt 60%, chiều cao chỉ đạt 5,45 cm, trung bình có 3,4 lá mới/cây, bộ rễ phát triển nhanh nhng yếu, sức sống của cây kém.
- Đối với giá thể là đất thịt (đã đợc nghiền mịn), các chỉ tiêu nghiên cứu của cây con đều cao hơn hẳn so với các giá thể khác. Tỷ lệ cây sống và thích nghi với môi trờng đạt 97,3%, chiều cao cây đạt 6,4 cm; số lá mới/cây trung bình là 4,6 lá; bộ rễ thời gian đầu phát triển chậm nhng sang tuần thứ 2 thì phát
triển mạnh, đờng kính thân to, lá dày, đẹp, màu xanh đậm. Dáng cây khoẻ mạnh, đầy sức sống.
- Đối với giá thể là hỗn hợp cát và đất thịt, tỷ lệ cây sống cũng tơng đối cao (90%); chiều cao trung bình 6,05 cm; số lá mới ít hơn (4,17 lá) so với giá thể đất thịt. Cây to, lá mỏng, sinh trởng tơng đối nhanh nhng lá không bóng đẹp nh ở công thức H2.
Nh vậy trong cùng một điều kiện huấn luyện, với độ ẩm không khí 80 -85%; độ ẩm giá thể 65 - 80%; nhiệt độ: 25 2± 0C; nguồn khoáng bổ sung là dung dịch dinh dỡng MS thì giá thể thích hợp nhất để huấn luyện thích nghi cây cúc CN97 ex vitro là đất thịt.
Nhận xét chung:
Từ những kết quả nghiên cứu thu đợc, chúng tôi đề xuất quy trình nhân giống in vitro giống cúc CN97 nh sau:
Quy trình Điều kiện nuôi cấy
Cây giống
Chồi đỉnh và các
đoạn thân mang mắt ngủ
Giai đoạn vào mẫu, Công thức khử trùng:
cấy gây HgCl2 0,1% trong 10 phút
Thời gian cấy gây là 4 tuần
Mẫu in vitro
Môi tr ờng nhân nhanh :
Giai đoạn nhân nhanh MS + 8 g/l agar +30 g/l saccaroza + 15% nớc dừa +7 ppm kinetin. Chồi in vitro Thời gian nhân nhanh là 4 tuần
Môi tr ờng ra rễ:
Giai đoạn ra rễ, MS + 8 g/l agar +30 g/l saccaroza tạo cây hoàn chỉnh + 10% nớc dừa + 0,50 g/l than hoạt tính + 0,5 ppm α- NAA
Cây in vitro hoàn chỉnh Thời gian ra rễ là 4 tuần
Giai đoạn huấn luyện Giá thể sử dụng để huấn luyện:
thích nghi Đất thịt
Thời gian huấn luyện là 4 tuần Cây ex vitro (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Vờn ơm