3. Đối t−ợng, nội dung, nguyên liệu và ph−ơng pháp nghiên cứu
3.4.2. Ph−ơng pháp xác định tính chất sinh hoá học của Pasteurella phân lập đ−ợc
* Thử phản ứng Oxydasa:
Dùng que cấy lấy khuẩn lạc từ môi tr−ờng thạch bôi lên mặt giấy đã thấm thuốc thử. Nếu chỗ đ−ợc bôi khuẩn lạc sau 30 giây xuất hiện màu đen tím đ−ợc coi là d−ơng tính. nếu không xuất hiện màu đen tím hoặc không đổi màu là âm tính.
* Thử phản ứng Catalasa:
Dùng que lấy khuẩn lạc từ môi tr−ờng thạch bôi phết lên mặt phiến kính sạch, nhỏ 1- 2 giọt dung dịch oxy già (H2O2) 35 lên trên, trộn đều. Nếu có hiện t−ợng sủi bọt là d−ơng tính.
* Thử phản ứng hoàn nguyên Nitrat:
Có thể thực hiện phản ứng theo hai cách:
- Cấy vi khuẩn cần thử vào môi tr−ờng Nitrat lỏng, nuôi cấy ít nhất 48 giờ ở 370C. Sau dùng 5 giọt dung dịch A và 5 giọt dung dịch B (đã đ−ợc chuẩn bị ở mục 3.3.6.4) nhỏ vào môi tr−ờng. Mầu đỏ xuất hiện là d−ơng tính.
- Tiến hành trên môi tr−ờng Mannitol- motility: sau khi nuôi cấy qua đêm vi khuẩn cần thử trên môi tr−ờng này sẽ thêm 4 giọt mỗi dung dịch A và B. Phản ứng coi là d−ơng tính khi xuất hiện màu đỏ.
Cấy vi khuẩn vào môi tr−ờng n−ớc thịt Peptone đã có 1% đ−ờng cần kiềm tra và chỉ thị mầu Andrade. Để ở 370C trong 24 giờ rồi đọc kết quả. Phản ứng d−ơng tính khi môi tr−ờng chuyển thành màu đỏ. Phản ứng âm tính khi môi tr−ờng không chuyển màu.
* Thử phản ứng phân huỷ Urea
Dùng ống nghiệm vô trùng hút 0,1 ml canh khuẩn (đã nuôi cấy trong môi tr−ờng n−ớc thịt ở 370C trong 24 giờ) nhỏ vào môi tr−ờng chứa Urea. Sau đó để tủ ấm 370C trong 24 giờ. Quan sát sự thay đổi màu của môi tr−ờng.