2. đỐI TƯỢNG, NỘI DUNG, VẬT LIỆU, PHƯƠNG PHÁP
2.4.3.Giám ựịnh ựặc tắnh sinh vật, hóa học
(i) Kiểm tra ựặc tắnh lên men ựường glucose, lactose, sinh H2S và sinh hơi trên môi trường KIA
- Thạch ống KIA màu ựỏ gồm 2 phần: phần thạch ựứng ựể kiểm tra khả năng lên men ựường glucose, sinh hơi, sinh H2S, phần thạch nghiêng ựể kiểm tra khả năng lên men ựường lactosẹ
- Ria cấy: Lấy 1 khuẩn lạc riêng rẽ ria cấy lên phần thạch nghiêng và trắch sâu tới ựáy ống nghiệm của phần thạch ựứng, nuôi cấy ở 37OC/18-24h.
Lên men ựường Lactose: đọc tại phần thạch nghiêng, (+) dương tắnh khi phần thạch nghiêng chuyển màu vàng; (-) âm tắnh khi giữ nguyên màu hồng.
Lên men ựường Glucose: đọc tại phần thạch ựứng (+) dương tắnh khi chuyển màu vàng; (-) âm tắnh khi giữ nguyên màu hồng.
Sinh H2S: đọc tại phần thạch ựứng (+) dương tắnh khi ựường cấy trắch sâu chuyển sang màu ựen; (-) âm tắnh khi giữ nguyên màu hồng.
Sinh hơi/khắ: đọc tại phần thạch ựứng (+) dương tắnh khi thạch bị nứt vỡ hoặc bị ựẩy lên trên khỏi ựáy ống nghiệm; (-) âm tắnh khi phần thạch ựứng giữ nguyên khối, không bị nứt hay có bọt khắ.
(ii) Kiểm tra ựặc tắnh lên men ựường manitol và khả năng di ựộng
Cấy vi khuẩn trắch sâu vào giữa ống môi trường Mannitol-Mobiliti, ủ ở tủ ấm 37OC/ 18- 24 h.
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ.. 27
Lên men ựường Mannitol: (+) dương tắnh khi môi trường chuyển sang màu vàng, là âm tắnh khi giữ nguyên màu ựỏ.
Khả năng di ựộng: (+) dương tắnh khi vi khuẩn mọc ựục lan rộng ra khỏi ựường cấy hoặc vi khuẩn làm ựục môi trường, (-) âm tắnh khi không có hiện tượng lan ra quanh ựường cấỵ
(iii) Kiểm tra ựặc tắnh phân giải Urê, sinh Indol
Cấy vi khuẩn vào môi trường Urê - Indol, ủ trong tủ ấm 37OC/18-24h. Dương tắnh phân giải Urê khi môi trường màu cánh sen; âm tắnh khi môi trường màu ựỏ.
Khả năng sinh Indol: Nhỏ 1 - 2 giọt dung dịch Kovak vào môi trường, lắc nhẹ, ựể yên trong vài phút; (+) dương tắnh khi xuất hiện một vòng ựỏ ựậm trên mặt môi trường; âm tắnh khi không có sự ựổi màụ