3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.3.1. Kết quả xác ựịnh một số gen mã hóa yếu tố ựộc lực
Chúng tôi ựã sử dụng mẫu tiến cứu kết hợp với mẫu hồi cứu ựể nghiên cứu kiểu gene của các chủng Ẹcoli gây bệnh tại 3 tỉnh Bắc Ninh, Bắc Giang và Ninh Bình.
Tổng số mẫu tiến cứu là 36 chủng Ẹcoli phân lập từ 37 mẫu phân lợn con sau cai sữa bị tiêu chảy ựược thu thập từ 3 tỉnh.
Mẫu hồi cứu là các chủng Ẹcoli ựã ựược phân lập từ mẫu phân lợn con sau cai sữa bị tiêu chảy cũng tại các ựịa phương tương ứng gồm 28 chủng của Bắc Ninh, 26 chủng của Bắc Giang và 26 chủng của Ninh Bình. Những chủng này ựộc lập với 36 chủng Ẹcoli trong ựiều tra thu mẫu tiến cứu trình bày ở phần trên. Mẫu hồi cứu ựược phân lập trước thời ựiểm chúng tôi tiến hành thu thập mẫu phân tại thực ựịa nhưng vẫn trong khoảng thời gian một năm của quá trình thực hiện ựề tài luận văn cao học. Các chủng Ẹcoli thuộc mẫu hồi cứu ựã ựược giám ựịnh sinh hóa và ựược lưu giữ lại tại phòng thắ nghiệm của Bộ môn Hóa sinh-Miễn dịch-Bệnh lý, Viện thú ỵ
Ứng dụng phương pháp PCR, sử dụng các cặp mồi ựặc hiệu như trình bày ở phần vật liệu và phương pháp, chúng tôi ựã xác ựịnh các gene mã hóa cho các yếu tố ựộc lực chắnh bao gồm (yếu tố bám dắnh F4, F5), các gene mã hóa cho các loại ựộc tố ựường ruột (STa, STb, LT) của 116 chủng Ẹcoli phân lập tại 3 ựịa bàn nghiên cứụ Chúng tôi cũng thực hiện PCR với yếu tố bám dắnh F18 và gene mã hóa ựộc tố thần kinh VT2e, tuy nhiên hiện chúng tôi chưa có cặp mồi phân biệt F18ab (gây phù ựầu) và F18ac (gây tiêu chảy), do vậy phân
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ.. 40
tắch kiểu gene liên quan ựến các chủng Ẹcoli F18 chúng tôi chỉ quan tâm chủng có mang gene mã hóa yếu tố bám dắnh F18 và ựồng thời mang gene mã hóa ựộc tố ựường ruột.
Bảng 3.5. Tỷ lệ Ẹcoli mang gene mã hóa cho các yếu tố ựộc lực
Tỉnh Số chủng kiểm tra Số chủng mang gene Tỷ lệ
Bắc Ninh 41 8 19,51
Bắc Giang 35 18 51,43
Ninh Bình 40 15 37,50
Tổng 116 41 35,34
Nhận xét:
(i) Kết quả ở bảng 3.5 trình bày số liệu của thống kê trong ựó một chủng
Ẹcoli mang bất kỳ 1 trong các gene mã hóa yếu tố bám dắnh và/hoặc ựộc tố ựường ruột sẽ ựược ghi nhận là dương tắnh. Kết quả tại bảng này cho thấy trong số 116 chủng Ẹcoli phân lập tại 3 ựịa phương, có 41 chủng mang 1 trong số những gene mã hóa cho yếu tố ựộc lực (35,34%). Kết quả này làm chắnh xác hóa hơn kết quả phân lập trên ựây, 100% số mẫu phân ựều có Ẹcoli; kết quả xác ựịnh kiểu gene chứng tỏ không phải 100% số chủng Ẹcoli phân lập từ lợn sau cai sữa mắc tiêu chảy là những Ẹcoli có ựộc tố gây tiêu chảỵ
(ii) Số chủng Ẹcoli phân lập tại tỉnh Bắc Giang cho tỷ lệ mang gene mã hóa cho các yếu tố ựộc lực là cao nhất là 18/35 chủng, chiếm tỷ lệ 51,43%; tiếp ựến là Ninh Bình với 15/40 chủng chiếm tỷ lệ 37,50% và thấp nhất là Bắc Ninh với 8/41 chủng, chiếm tỷ lệ 19,51%.
Tỷ lệ mang gene mã hóa yếu tố ựộc lực tại Bắc Ninh là thấp nhất có thể liên quan ựến hiện tượng tỷ lệ chết của lợn cai sữa bị tiêu chảy tại Bắc Ninh là thấp nhất (xem bảng 2 phần trên), tuy nhiên suy luận này chưa trùng khớp với chênh lệch tỷ lệ mang gene mã hóa yếu tố ựộc lực tại Bắc Giang và Ninh Bình (51,43% cao hơn 37,50%) trong khi ựó tỷ lệ chết của lợn cai sữa mắc
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ.. 41
tiêu chảy ở hai ựịa phương này là tương ựương (10%).
Hiện chúng tôi chưa ựủ dữ liệu ựể quy nạp nguyên nhân của sự khác biệt tỷ lệ mang gene mã hóa yếu tố ựộc lực giữa 3 ựịa bàn ựiều tra, tuy nhiên có thể ghi nhận, tần số xuất hiện gene mã hóa yếu tố ựộc lực phụ thuộc vào vùng ựịa lý.