+ Các bình ñịnh mức 20ml, 50ml, 100ml, 200ml, 500ml.
+ Các loại ống ñong, ống hút, pipet, buret: 0,1ml, 0,2ml, 0,5ml, 1ml, 5ml, 10ml, 20ml, 25ml.
+ Dãy ống nghiệm thử hoạt ñộ men bằng thuỷ tinh trung tính, chịu nhiệt. + Cối chày sứ, phễu lọc, giấy lọc, nhiêt kế, ñĩa lồng, bộ ñếm số vi khuẩn,....
Các loại dụng cụ thuỷ tinh ñều ñược xử lý tráng hoặc ngâm trong dung dịch bicromat, rửa sạch bằng nước thường, tráng nhiều lần bằng nước cất, sấy
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 36 khô ở 1300C/1h sau ñó mới sử dụng trong thí nghiệm.
3.3. Phương pháp nghiên cứu 3.3.1. Chế tạo dung dịch pancreatin 0,02% 3.3.1. Chế tạo dung dịch pancreatin 0,02% Hình 3.1: Sơñồ minh họa quy trình chế biến, bảo quản tuỵ tạng - Chế tạo chế phẩm Pancreatin
Tuỵ lợn lấy từ mẫu ñã nghiền nhuyễn, cân khoảng 10gr cho vào bình nón 50ml, thêm vào 10ml dung dich ete etylic, ñậy nút, lắc kỹ. ðể khoảng 1h sau ñó ñem lọc qua giấy thấm mỡ (giấy lọc phải ñược ngâm trong dung dịch pancreatin và ñể khô), tiếp tục ngâm phần cặn bám trên giấy lọc trong dung dịch ete etylic như trên, lọc lại qua giấy lọc thấm mỡ. Dùng que thuỷ tinh gạt nhẹ phần tổ chức phía trên giấy lọc vào cốc thuỷ tinh sạch
Tiến hành làm khô phần tổ chức bám trên bề mặt giấy lọc bằng hoá chất hút ẩm ở nhiệt ñộ từ 10 - 12oC thu ñược chế phẩm pancreatin ñã ñược tách hết mỡ.
Chế phẩm pancreatin sau khi làm khô ñược ñồng nhất hoá bằng phương pháp nghiền kỹ trong cối chày sứ sạch, tiếp tục làm khô ở nhiệt ñộ thấp cho tới khi khô hẳn. [18]
- Chế tạo dung dịch pancreatin 0,02 %
Cân 0,1gr chế phẩm Pancreatin sau khi ñã ñạt ñộ khô, cho vào cối chày
Tụy tươi Sơ chế tách mỡ Rửa sạch bằng nước thường, nước cất Xay nhiễn Lấy mẫu Bảo quản ñông lạnh Lấy mẫu
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 37 sứ nhỏ, thêm vào 1ml dung dịch muối borat (3.2.2.2), nghiền kỹ chế phẩm trong dung dịch muối rồi ñổ vào bình ñịnh mức 500 ml. Rửa kỹ cối nhiều lần bằng nước cất rồi ñổ cả vào bình, thêm nước cất cho ñủ tới vạch ñịnh mức 500 ml, lắc ñều thu ñược dung dịch pancreatin 0,02 %. Dung dịch ñược bảo quản ở nhiệt ñộ 10 - 12oC . (Hình minh hoạ)
Hình 3.2: Sơñồ minh họa quy trình ñiều chế dung dịch pancreatin 0,02%
3.3.2. ðiều chế dung dịch casein 0.2%
- Cách ñiều chế: Cân 0,2gr bột casein cho vào bình nón 50ml, ñổ vào bình 20ml nước cất và 5ml NaOH 1N. ðun cách thuỷ cho tan hết, tiến hành