Bảng 3.3. Kết qủa phản ứng ngƣng kết kháng nguyên – kháng thể
Chủng giống
Kháng huyết thanh mẫu chuẩn Nƣớc muối sinh lý Nhóm A Nhóm B Nhóm C Nhóm D Sh. dysenteriae SG (+++) (-) (-) (-) (-) Sh. flexneri HN1 (-) (+++) (-) (-) (-) Sh. boydii 116 (-) (-) (+++) (-) (-) Sh. Sonnei 285 (-) (-) (-) (+++) (-) (+++) : Ngƣng kết nhiều (-) : Không ngƣng kết NMSL NHÓM A KHT NHÓM B KHT NHÓM CKHT NHÓM D KHT Chủng Sh. dysenteriae SG Chủng Sh. flexneri HN1
Hình: 3.9. Phản ứng ngƣng kết giữa các chủng với kháng huyết thanh đặc hiệu nhóm A, B, C và D mẫu Sanofi - Pháp
Chủng Sh. boydii 116 Chủng Sh. sonnei 285
Kiểm tra tính đặc hiệu của chủng giống bằng kháng huyết thanh đặc hiệu mẫu của hãng Sanofi Pasteur - Pháp nhóm A, B, C và D. Chủng cần kiểm tra đƣợc nuôi cấy trên môi trƣờng thạch LB ở 37o
C trong vòng 18 – 22 giờ. Kết qủa bảng 3.3 và hình 3.9 cho thấy:
- Chủng Shigella dysenteriae SG tạo ngƣng kết nhiều (+++), rõ ràng và nhanh trong vòng 2 phút với kháng huyết thanh mẫu nhóm A thấy đƣợc bằng mắt thƣờng. Không tạo ngƣng kết với kháng huyết thanh mẫu nhóm B, C và D.
- Chủng Shigella flexneri HN1tạo ngƣng kết nhiều (+++), rõ ràng và nhanh trong vòng 1 phút với kháng huyết thanh mẫu nhóm B, không tạo ngƣng kết với kháng huyết thanh mẫu nhóm A, C và D khi nhìn bằng mắt thƣờng.
- Chủng Shigella boydii 116 ngƣng kết nhiều, rõ ràng (+++) nhanh trong vòng 2 phút, thấy đƣợc bằng mắt thƣờng với kháng huyết thanh mẫu nhóm C, không tạo ngƣng kết với nhóm huyết thanh nhóm A, B và D.
- Chủng Shigella sonnei 285 tạo ngƣng kết nhiều (+++), rõ ràng và nhanh trong vòng 2 phút với kháng huyết thanh mẫu nhóm D, không tạo ngƣng kết với kháng huyết thanh mẫu nhóm A, B và C khi nhìn bằng mắt thƣờng.
Tất cả 4 chủng khảo sát đều không tạo ngƣng kết (-) với nƣớc muối sinh lý, hoàn toàn là một huyền dịch màu trắng đục.
Khi nghiên cứu sản xuất kháng huyết thanh mục tiêu sau cùng làm thế nào để có thể thu đƣợc nhiều kháng thể nhất. Việc khởi đầu là phải chọn cho đƣợc chủng giống có kháng nguyên đặc hiệu nhằm gây đƣợc một đáp ứng miễn dịch mạnh và thu đƣợc kháng thể đặc hiệu cao. Do đó, việc kiểm tra chất lƣợng của các chủng giống nhƣ trên trƣớc khi dùng để nuôi cấy sản xuất kháng nguyên là rất cần thiết. Vì thế, ngoài việc kiểm tra hình thái, đặc tính sinh hóa của chủng giống, chúng tôi còn tiến hành kiểm tra tính chất huyết thanh nhằm để xác định chúng có đầy đủ các kháng nguyên đặc hiệu cần thiết hay không.
Từ kết quả thu đƣợc ở trên chúng tôi nhận xét:
Các chủng giống Shigella đƣa vào nghiên cứu sản xuất kháng huyết thanh:
Shigella dysenteriae SG, Shigella flexneri HN1, Shigella boydii 116 và Shigella sonnei
285 nhận từ viện Pasteur Paris – Pháp là các chủng tạo ngƣng kết đặc hiệu với kháng huyết thanh mẫu cùng nhóm, không gây phản ứng chéo với các nhóm huyết thanh khác. Điều này cho thấy các chủng có chứa đầy đủ các kháng nguyên đặc hiệu cần thiết nhằm kích thích cơ thể tạo đƣợc đáp ứng miễn dịch.
Kết quả này chứng tỏ rằng quá trình giữ chủng giống ở dạng đông khô trong điều kiện nhiệt độ âm tại Công ty Vắc xin Pasteur Đà Lạt đảm bảo chủng ổn định. Kỹ thuật này một lần nữa chứng minh sự ƣu việc trong quá trình bảo quản chủng.
Qua kết quả nghiên cứu đƣợc ở trên chúng tôi nhận thấy 4 chủng trên đảm bảo đầy đủ các đặc tính sinh học cần thiết, thỏa mãn các yêu cầu chủng giống để đƣa vào sản xuất kháng nguyên gây miễn dịch.