5.1. Kết luận
Từ những kết quả thu được có thể đưa ra một số kết luận sau:
Sự tái sinh của ĐST nuôi cấy
Thời gian tái sinh, tỉ lệ tái sinh và hệ số nhân chồi của ĐST nuôi cấy chủ yếu do kích thước mẫu chi phối. Mẫu cấy kích thước từ 0,3 – 0,5 mm có thời gian tái sinh trung bình, tỉ lệ tái sinh và hệ số nhân chồi thấp hơn so với mẫu cấy có kích thước từ 0,5 – 1 mm.
Sự tương tác giữa yếu tố xử lí nhiệt và kích thước mẫu ảnh hưởng đến hệ số nhân chồi và ảnh hưởng này thay đổi tùy theo giống. Tuy nhiên, việc xử lí nhiệt ở 370C trong 30 ngày ảnh hưởng không đáng kể đến sự tái sinh của ĐST chồi dứa Cayenne in vitro.
Sự sinh trƣởng của ĐST nuôi cấy
Kết quả về các chỉ tiêu sinh trưởng của chồi dứa tái sinh cho thấy chiều cao chồi, số lá, số rễ và chiều dài rễ chủ yếu do yếu tố giống quyết định. Chồi tái sinh từ ĐST thuộc giống Cayenne Trung Quốc và Thái Lan sinh trưởng tốt hơn giống Cayenne Lâm Đồng trong điều kiện thí nghiệm.
Sự tương tác giữa hai yếu tố giống và xử lí nhiệt ảnh hưởng nhất định đến sự tăng trưởng chiều cao và chiều dài rễ của chồi dứa tái sinh của cả ba giống dứa Cayenne. Ở chồi tái sinh thuộc giống Cayenne Trung Quốc có xử lí nhiệt thì chiều cao trung bình và chiều dài rễ lớn hơn so với chồi tái sinh cùng giống không xử lí nhiệt; ở chồi dứa Cayenne Thái Lan tái sinh được xử lí nhiệt thì sự tăng trưởng chiều cao và chiều dài rễ giảm đi so với chồi tái sinh cùng giống không xử lí nhiệt và chồi dứa thuộc giống Cayenne Lâm Đồng không bị ảnh hưởng bởi việc xử lí nhiệt.
Từ các kết quả có được, có thể thấy việc xử lí nhiệt nhìn chung ảnh hưởng không đáng kể đến sự sinh trưởng của chồi tái sinh.
Kiểm tra PMWaV ở chồi tái sinh
Thực tế cho thấy bằng phương pháp nuôi cấy ĐST đơn thuần không thể loại bỏ PMWaV-1 nhưng có thể tạo được chồi dứa sạch PMWaV-1 với tỉ lệ thấp 66,67% (6/9) bằng cách kết hợp nuôi cấy ĐST và xử lí nhiệt ở 370C trong 30 ngày. Việc xử lí nhiệt bước đầu thể hiện hiệu quả bất hoạt và loại bỏ PMWaV-1và làm tăng khả năng sạch virus của ĐST nuôi cấy.
Trong khi đó, có thể tạo chồi dứa hoàn toàn sạch PMWaV-2 bằng phương pháp nuôi cấy ĐST và phương pháp kết hợp xử lí nhiệt - nuôi cấy ĐST. Tuy nhiên, cần tiếp tục nghiên cứu thêm về vấn đề này để có kết luận chính xác hơn.
5.2. Đề nghị
Để có thể áp dụng đề tài vào thực tiễn, chúng tôi xin đề nghị một số nghiên cứu tiếp theo để hoàn thiện phương pháp tạo cây sạch virus này:
- Cần nghiên cứu sự liên quan giữa kích thước mẫu ĐST nuôi cấy và khả năng sạch virus của mẫu.
- Tiếp tục nghiên cứu ảnh hưởng của các mức nhiệt độ cao hơn (380C – 400C) và thời gian xử lí nhiệt khác nhau lên sự sinh trưởng của chồi tái sinh.
- Nghiên cứu tối ưu hóa qui trình xử lí nhiệt nhằm làm tăng diện tích vùng “sạch virus” ở mô phân sinh ngọn. Từ đó có thể tăng kích thước mẫu ĐST nuôi cấy, tăng khả năng tái sinh của ĐST mà vẫn đảm bảo “sạch virus”.
- Tiếp tục nghiên cứu hiệu quả loại bỏ PMWaV của phương pháp nuôi cấy ĐST và nuôi cấy ĐST kết hợp xử lí nhiệt.
- Áp dụng những kết quả của các đề tài nghiên cứu trước về nuôi cấy mô cây dứa Cayenne, sử dụng môi trường có chất kích thích tăng trưởng để rút ngắn thời gian tái sinh của ĐST nuôi cấy và nhân nhanh các chồi có kết quả kiểm tra PMWaV (-).
- Không sử dụng các chồi in vitro có kết quả kiểm tra PMWaV (+) với mục đích kinh doanh hay sản xuất.