Phân lập Enterobacter sakazakii trên môi trường vi sinh Brilliance

Một phần của tài liệu LUẬN VĂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC TÌM HIỂU QUY TRÌNH PHÁT HIỆN ENTEROBACTER SAKAZAKII TRONG SỮA BỘT (Trang 41 - 42)

Enterobacter sakazakii Agar[7].

- Nguyên tắc

Brilliance™ Enterobacter sakazakii Agar (công thức chuẩn Chromogenic

Enterobacter sakazakii Agar) là môi trường sử dụng cho việc phân lập và đếm

Enterobacter sakazakii từ mẫu thực phẩm

Brilliance Enterobacter sakazakii Agar dựa trên phản ứng anpha- glucosidase, phản ứng này dựa trên sự kết hợp chặt chẽ giữa cơ chất chromogenic

5-bromo-4-chloro-3indolyl-anpha-D-glucopyranoside có mặt trong môi trường.

Enzyme anpha-glucosidase, hiện diện trong Enterobacter sakazakii, cơ chất

hydrolyses sinh ra khuẩn lạc màu xanh trên đĩa môi trường màu vàng xám.

Proteus vulgaris cũng có hoạt tính anpha-glucosidase dương tính yếu và cũng có thể phát triển để sinh ra những khuẩn lạc có màu tương tự như E. sakazakii.

Tuy nhiên trên môi trường này, Proteus spp mọc lên những khuẩn lạc màu xám: chúng sản sinh ra hydrogen sulphide trong sự hiện diện của ferric ions hình thành nên ferrous sulphide. Desoxycholate có tác dụng làm ẩn đi sự phát triển của

hầu hết vi sinh vật Gram dương .

- Môi trường

 EE broth

 Brilliance Enterobacter sakazakii Agar

-Cách tiến hành

Các mẫu được giữ ấm trong nước qua đêm, sau đó được làm giàu trong

môi trường EE broth

Dùng một que cấy vòng lấy 10µl từ canh thang đã được giữ ấm EE broth

và trải đều lên bề mặt của thạch Brilliance Enterobacter sakazakii Agar pleate. Giữ ấm đĩa thạch ở 35-37°C trong 24 giờ, và quan sát khuẩn lạc màu xanh lá cây

Xác định số khuẩn lạc bằng phương pháp đếm hoặc bằng phương pháp sinh

Kết quả : Dương tính các khuẩn lạc có màu xanh lá cây

Hình 3.3: Khuẩn lạc Enterobacter sakazakii trên môi trường Brilliance

Enterobacter sakazakii Agar

Một phần của tài liệu LUẬN VĂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC TÌM HIỂU QUY TRÌNH PHÁT HIỆN ENTEROBACTER SAKAZAKII TRONG SỮA BỘT (Trang 41 - 42)