Chương 3 KẾT QUẢ THẢO LUẬN
3.1. Kết quả 1 Định danh
3.1.1. Định danh
Qua quan sát hình thái
Dưới kính hiển vi quang học tế bào vi tảo có hình hộp tròn, thường có hai thể sắc tố màu nâu vàng, màu sắc đậm hay nhạt, phân mảnh hay chiếm trọn thể tích tế bào phụ thuộc vào trạng thái sinh lý của tế bào theo từng giai đoạn khác nhau. Giữa các tế bào có các sợi tơ dài (giống các tơ xương) kết nối các tế bào lại với nhau thành chuỗi (Ảnh 3.1).
Ảnh 3.1: Hình thái một chuỗi tế bào vi tảo dưới kính hiển vi quang học (X40)
Các tế bào trong chuỗi sinh sản bằng cách phân đôi làm gia tăng độ dài chuỗi đến một mức nhất định. Khi trong chuỗi có tế bào chết, tại vị trí đó sẽ đứt ra (mũi tên chỉ vị trí bị đứt), phân mảnh thành chuỗi mới (Ảnh 3.2).
Ảnh 3.2: Chuỗi tế bào mới được hình thành từ vị trí bị đứt ở chuỗi cũ
Qua nhiều lần sinh sản vô tính bằng phân chia tế bào, loài này có hiện tượng giảm kích thước, sau đó hồi phục lại kích thước ban đầu (Ảnh 3.3).
Ảnh 3.3: Chuỗi tế bào giảm và hồi phục kích thước
Bên cạnh đó, hình thức sinh sản hữu tính sau đó tạo bào tử khôi phục kích thước ở loài này cũng được ghi nhận. Bào tử được hình thành ngay trên chuỗi, có kích thước khá to và có dạng hình cầu, tế bào chất đậm đặc (Ảnh 3.4).
Ảnh 3.4: Bào tử vi tảo dưới kính hiển vi quang học (mũi tên)
Việc định danh loài vi tảo trên đến chi được thực hiện thông qua ảnh chụp dưới kính hiển vi quang học. Theo Trương Ngọc An (1993), vị trí phân loại trong chi của loài trong hệ thống phân loại như sau:
Ngành Lớp Bộ Bộ phụ Họ Chi : : : : : : Bacillariophyta Bacillariophyceae Centrales Shütt Biddulphiineae Skeletonemaceae Lebour Skeletonema Greville
Bằng phương pháp sinh học phân tử
Kết quả giải trình tự gen 18S ribosom cho thấy các trình tự giống nhau giữa
Skeletonema sp. với loài Skeletonema subsalsum dòng MMDL 5619 đến 99%, chỉ
Ảnh 3.5: Kết quả giải trình tự gen 18S ribosom của Skeletonema sp.
Bên cạnh đó, kết quả giải trình tự gen 16S ribosom cho thấy các trình tự giống nhau giữa Skeletonema sp. với loài Skeletonema subsalsum dòng C105 lên đến 100% (Ảnh 3.6, phụ lục 7).
Ảnh 3.6: Kết quả giải trình tự gen 16S ribosom của Skeletonema sp.
Như vậy, kết hợp hình thái dưới kính hiển vi quang học và giải trình tự gen 18S,16S loài Skeletonema sp. được xác định là Skeletonema subsalsum (A.Cleve) Bethge, 1928.
3.1.2. Khảo sát và chọn môi trường nuôi thích hợp 3.1.2.1. Hình thái tế bào