PHẦN 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Kết quả ựánh giá các tổ hợp lai vụ đơng
4.3. Chọn lọc cá thể cà chua tốt mang gen Ty3/Ty3 từ một số quần thể phân ly F
Sử dụng giống cà chua thuần có một lợi thế rất lớn là giá thành hạt giống thấp do khơng tốn cơng sản xuất hạt lai, góp phần tiết kiệm chi phắ và nâng cao thu nhập cho người nông dân. Hiện nay, công nghệ chỉ thị phân tử trợ giúp chọn lọc MAS đã giúp cho việc chọn tạo giống dịng thuần trở nên dễ dàng hơn rất nhiềụ để chọn tạo ựược giống cà chua thuần chắn chậm và kháng virus xoăn vàng lá, chúng tơi dự định tiến hành gây tạo các quần thể phân ly F2 từ các tổ hợp F1 ưu tú, sau đó tách DNA và chạy phản ứng PCR với mồi ựặc hiệu phát hiện gen kháng Ty3 và gen chắn chậm rin nhằm chọn lọc ựược các cá thể mang gen kháng virus và ựồng hợp tử. Tuy nhiên, các THL chắn chậm với gen ức chế sự chắn rin từ dịng bố 176 đã khơng cho THL triển vọng nàọ Vì thế, chúng tơi đã tiến hành gây tạo 4 quần thể phân ly F2từ các THL triển vọng và kháng virus tốt nhất là T1, T2, T7 và T12 trong vụ xn hè 2013, sau đó tiến hành chọn lọc cá thể tốt mang gen kháng ựồng hợp tử Ty3 từ các quần thể phân ly nàỵ
Hình 4.7. đánh số chọn lọc cá thể từ các quần thể phân ly F2 ở giai ựoạn cây con
Cây cà chua thuộc loại cây lớn, địi hỏi nhiều diện tắch đất trồng và cơng chăm sóc. đặc biệt trong quy trình chọn giống nếu gieo trồng một quần thể lớn ựể tiến hành chọn lọc theo kiểu hình thì sẽ tốn rất nhiều cơng chăm sóc, diện tắch ựất trồng cũng như công theo dõi đánh giá cả quần thể đó để chọn ra các cây tốt và loại bỏ dần các cây xấụ Sự ựơn giản và chắnh xác của phản ứng PCR là một cơng cụ rất hữu hiệu giúp chúng ta giảm được phần cơng việc lớn kể trên. để tiến hành chọn lọc cá thể cà chua mang gen kháng Ty3 ựồng hợp tử, chúng tơi đã tiến hành gieo hạt cà chua trên khay bầu, mỗi tổ hợp gieo 80 - 100 cây, ựến giai ựoạn 15 ngày tuổi tiến hành cắm thẻ ựánh số chọn ra từ mỗi quần thể 40 cây tốt: cây mập, sinh trưởng khoẻ, phát triển nhanh (hình 4.7) và tách
chiết DNA, sau đó chạy PCR với cặp mồi P6-25 phát hiện các cá thể mang gen Ty3
ựồng hợp tử ngay ở giai ựoạn cây con. Các cá thể ựược chọn mang kiểu gen Ty3/Ty3 sau khi ra 6 lá thật (khoảng 30 ngày) thì được trồng ra đồng ruộng trong vụ xn hè 2013 và tiến hành ựánh giá ựặc ựiểm nông sinh học ựể chọn ra các cá thể tốt nhất, thu hạt để tạo dịng thuần từ các cá thể nàỵ